猪圆环病毒2型单克隆抗体研制与夹心ELISA抗原检测方法的建立

发布时间：2021-08-30 03:22

　　猪圆环病毒2型（PCV2）是影响世界养猪业经济损失的重要致病原之一。本研究利用纯化的猪圆环病毒2型（PCV2）免疫Balb/c小鼠,通过单克隆抗体技术,筛选获得3株能稳定分泌抗PCV2-Cap蛋白抗体的杂交瘤细胞株,分别命名为3E5、3E6和5A6。体外培养连续传代至第20代,分泌抗体的效价基本一致。3E5、3E6和5A6培养的上清效价分别为1:12800、1:1600和1:6400,腹水效价为1:6400000、1:640000和1:800000;3株单抗亚类鉴定,重链均为IgG2a型,轻链为κ型;间接免疫荧光试验结果显示,3株单抗均可与PCV2毒株产生特异性荧光反应;病毒中和试验结果为,3E5和3E6均具有良好的中和活性,而5A6不具有中和活性;Westernblot结果表明,3株单抗均能与纯化PCV2Cap蛋白（约30kDa）发生特异性反应,其识别的表位需要Cap蛋白N端42-50aa区域的参与。利用PCV2单克隆抗体3E5作为捕获抗体,兔抗PCV2血清为第一抗体,成功建立了PCV2夹心ELISA抗原检测方法。该方法与猪圆环病毒1型、猪流行性腹泻病毒、猪巨细胞病毒、猪繁殖与呼吸综... 

【文章来源】：中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会论文集中国畜牧兽医学会会议论文集

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本文编号：3371957