饲料中沙门菌快速检测方法的建立及其分离株的耐药性与致病性分析

发布时间：2021-08-30 19:33

　　本研究建立了饲料中沙门菌的快速检测PCR和实时荧光PCR方法，进行了饲料中沙门菌的分离与鉴定，开展了沙门菌饲料分离株与活禽分离株耐药性比对及饲料分离株致病性风险评估。我国饲料中沙门菌的检测一直应用传统的微生物培养法检测，该方法检测周期长约5～7天，且操作步骤繁琐，应用试剂种类繁多，对疑似菌落的选取主观判断性强，易出现漏检，对检测人员技术水准要求较高。本研究以沙门菌菌属特异性基因invA基因为目的基因，利用分子生物学方法，建立了饲料中沙门菌的PCR检测技术和实时荧光PCR检测技术，克服了上述缺陷，将检测时间缩短至48小时，同时具有特异性好，灵敏度高，无假阴性，可操作性强，检测成本低等优点。PCR检测方法对饲料中沙门菌的检出限可达1～3CFU/25g，可检测的最低菌液浓度为3.2～4.0×102CFU/mL。本课题研究的PCR检测方法已通过国家标准化委员会的评审，现成为国家标准，于2012年11月正式发布实施（国标号为GB/T28642-2012）。在2008～2012年，我们对采自辽宁省的1221批饲料样品进行了沙门菌检测，同时应用本研究中建立的PCR方法和传统微生物方法检测，两种方法检... 

【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：123 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

沙门菌参考菌株invA基因PCR扩增产物电泳检测结果

PCR产物酶切琼脂糖凝胶电泳

烯酰胺凝胶电泳检测（图结果相符。4 3 2 1 1-2 PCR 产物酶切琼脂糖凝胶电CR products enzyme agarose gel elec2.PCR 产物；3. MLuI 酶切产物；3 2 1

【参考文献】：
期刊论文
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[3]禽源大肠杆菌和沙门氏菌的分离鉴定与耐药性检测[J]. 李淑芳,曹慧,黄燕霞,陈冬杰,邹海鹏,迟明飞,陈伟垣,谢文斌.  中国动物检疫. 2013(07)
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[7]基于SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR建立生乳及乳制品沙门氏菌快速检测技术[J]. 张巧艳,陈亭亭,陈笑芸,杨胜利,缪青梅.  浙江农业学报. 2012(05)
[8]减少猪群中沙门氏菌感染从饲喂干净的饲料开始[J]. 翁善钢.  饲料广角. 2012(16)
[9]沙门氏菌热裂解气相色谱-质谱法研究[J]. 董海燕.  针织工业. 2012(06)
[10]抗生素诱导对沙门氏菌耐药谱型变化的影响[J]. 陈朝喜,杜雄伟.  西南民族大学学报(自然科学版). 2012(03)

博士论文
[1]沙门氏菌快速检测体系的建立与应用及其耐药性分析研究[D]. 孔繁德.南京农业大学 2006



本文编号：3373374