EIAV Rev N端基序促进病毒Gag组装及拮抗马A3Z3分子抗病毒作用的机制研究

发布时间：2021-08-31 02:08

　　近年来在逆转录病毒研究中发现的一些细胞内分子,包括Trim5a、Tetherin、 SAMHDI和APOBEC3等,均扮演对病毒感染的天然免疫限制角色,被称为天然免疫限制因子。这些限制因子通过不同的机制抑制病毒在细胞内的有效复制：TRIM5a能损伤病毒DNA合成和限制病毒脱衣壳；Tetherin可以限制病毒的出芽和释放；SAMHDI影响病毒DNA合成原料限制了病毒的复制；APOBEC3通过对病毒cDNA进行超突变来影响病毒的复制。而作为应对的策略,病毒也会进化出相应机制对这种天然的限制进行拮抗。病毒与限制因子间相互作用机制的研究,对于深入了解慢病毒感染机理和研发抗慢病毒药物有重要意义。马传染贫血病毒（equine infectious anemia virus, EIAV）是马属动物感染的慢病毒,是用于慢病毒研究的重要病毒模型。而在马属动物限制因子研究方面,多种马属动物限制因子逐渐被发现,并被证实具有限制EIAV复制的功能。本研究关注APOBEC3分子与EIAV间的相互作用机制,重点探讨我们克隆获得的一种马APOBEC3新突变体与EIAV之间的相互作用。首先克隆获得五种马APOBEC3... 

【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：47 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
    1.1 课题背景
    1.2 文献综述
        1.2.1 逆转录病毒进化
        1.2.2 EIAV基因组结构及病毒蛋白功能
        1.2.3 APOBEC3概述
    1.3 本研究的主要内容及意义
2 马APOBEC3分子与EIAV Rev蛋白的相互作用
    2.1 材料
        2.1.1 病毒和细胞
        2.1.2 质粒和菌株
        2.1.3 引物
        2.1.4 主要试剂
        2.1.5 主要仪器
    2.2 实验方法
        2.2.1 RNA的提取及其反转录
        2.2.2 马APOBEC3和EIAV Rev真核表达载体的构建
        2.2.3 EIAV假病毒系统的构建
        2.2.4 马APOBEC3抗EIAV活性检测
        2.2.5 EIAV Gag剪切以及释放的Western Blot检测
        2.2.6 EIAV Gag与Rev细胞内定位的激光共聚焦检测
    2.3 实验结果
        2.3.1 基因克隆鉴定
        2.3.2 马APOBEC3分子对EIAV的限制作用
        2.3.3 马A3Z3V2分子对Gag加工的限制作用
        2.3.4 EIAV完整型和截短型Rev功能不同
        2.3.5 完整型Rev对抗马A3Z3V2分子
        2.3.6 完整型Rev N端基序的重要性
        2.3.7 马A3Z3分子56位丙氨酸决定其对截短型Rev的限制作用
        2.3.8 Rev/RRE、Gag和eqA3Z3V2三者之间相互作用模式
    2.4 讨论
结论
参考文献
附录
攻读学位期间发表的学术论文
致谢



本文编号：3373960