猪圆环病毒2型与猪小肠上皮细胞微丝骨架的相互作用
发布时间：2021-09-06 06:01
猪圆环病毒2型（Porcine Circovirus type 2, PCV2）可引起猪肉芽肿性肠炎,该病可经消化道传播,多致使仔猪腹泻,近年来给养猪业带来一定经济损失。微丝骨架是细胞骨架的重要组成之一,其处于高度变化的动态过程中。它们一般以成束或成网的形式存在于细胞质膜内,参与调控细胞的分裂、黏附、迁移和物质运输等过程。由于病毒的生命进程严格依赖宿主细胞,所以病毒为了创造有利于其入侵、复制、释放和传播的条件,逐渐进化为能与宿主细胞微丝骨架相互作用的类型。既往研究表明,病毒可以利用囊泡运输和/或参与调控微丝骨架的信号通路完成自身的生命进程。本试验以猪小肠上皮细胞系（intestinal porcine epithelial cell line, IPEC-J2）为试验对象,尝试建立了PCV2感染肠道的体外细胞模型,并初步探索了其与宿主细胞微丝骨架之间的相互作用,为今后对PCV2通过消化道感染机制的深入研究奠定基础。1.猪圆环病毒2型对猪小肠上皮细胞感染模型的初步建立本试验以TCID50为104.5/mL的PCV2为试验材料,感染猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）。结果发现,PCV2虽不能...
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３?ＰＣＶ２在铅细胞中的复制和释放Ｗ??
白阵列或网络。??Ｈ个最基本的肌动蛋白网络的例子是应为纤维（ｓｔｒｅｓｓ化ｅｒｓ）、丝状伪足??（ｆｉｌｏｐｏｄｉａ）和片状伪足（ｌａｍｅ山ｐｏｄｉａ）（图２－１）。应力纤维横贯于细胞长轴，是较短??且具有交替极性的收缩束。通过与二聚结合蛋白ａ－辅肌动蛋白和马达蛋白肌球蛋白ＩＩ??的互作，这些丝状物结合在起。这些纤维对维持细胞黏附和形态变化是必不可少的。??丝状伪足包含聘硬的、紧密结合的呈平行排列的肌动蛋白束，向质膜聚合，形成较薄??的刺状突起。这些结构可Ｗ探测或感受细胞外环境，并且包含一些信号、整合素和巧??粘素（细她粘附分子）的受体。片状伪足是高度分支化的肌动蛋白丝网络，具有质膜??附近最高的分支频率。丝状肌动蛋白的这种叫对枝状＂片状阵列还涉及细胞迁移和膜皱??１３??
?ｉｏｔｎｉＨｓｏ?ｌｏｗｅｏｅｅ?ｔｉｗｏＳｗａｃ?ｉｎｏｏｏｏｏｏｅｏ??＜ｈｎｎｔｉｔｙ??图３－５?ＰＣＶ２标准质粒的标准曲线??Ｆｉｇ．?３－５?Ｓｔａｎｄａｒｄ?Ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＰＣ?Ｖ２?Ｓｔａｎｄａｒｄ?Ｐｌａｓｍｉｄ??ＰＣＶ２感染ＩＰＥＣ－Ｊ２细胞后，经绝对定量ＰＣＲ得到细胞和培养上清液中病毒拷贝??数的总和，进而绘制ＰＣＶ２在ＩＰＥＣ－Ｊ２细胞上的生长曲线。具体为：感染后从６ｈ到??９６ｈ，ＰＣＶ２的拷贝数呈上升趋势，之后开始下降（图３－６）。在盲传试验中，ＷＰＣＶ２??初次感染细胞中的病毒拷贝数为１，之后将带毒传代细胞中的病毒拷贝数与之相比得??到相对值。结果发现，随着ＩＰＥＣ－Ｊ２细施传代次数的增加，ＰＣＶ２的拷贝数呈急剧上??升趋势。传代至第６代时细胞严重调亡，从而终止传代（图３－７）。??（ｌｏｇ）??巧??Ｅ?１２－??ｆｅｗ－??！８．ｒ??〇??〇??６－?ＩＩＩ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?
【参考文献】：
期刊论文
[1]多重PCR/RT-PCR技术检测PRRSV、PPV、PRV和PCV-2[J]. 王娟萍,姚敬明,高英杰,金扩世,丁馥香,周胜花,曹日亮,贺东昌,雷宇平. 中国兽医学报. 2009(03)
[2]猪圆环病毒分离鉴定及猪断奶多系统衰弱综合征的诊断[J]. 郎洪武,王力,张广川,程君生,宋立. 中国兽医科技. 2001(03)
本文编号：3386892
【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：77 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－３?ＰＣＶ２在铅细胞中的复制和释放Ｗ??
白阵列或网络。??Ｈ个最基本的肌动蛋白网络的例子是应为纤维（ｓｔｒｅｓｓ化ｅｒｓ）、丝状伪足??（ｆｉｌｏｐｏｄｉａ）和片状伪足（ｌａｍｅ山ｐｏｄｉａ）（图２－１）。应力纤维横贯于细胞长轴，是较短??且具有交替极性的收缩束。通过与二聚结合蛋白ａ－辅肌动蛋白和马达蛋白肌球蛋白ＩＩ??的互作，这些丝状物结合在起。这些纤维对维持细胞黏附和形态变化是必不可少的。??丝状伪足包含聘硬的、紧密结合的呈平行排列的肌动蛋白束，向质膜聚合，形成较薄??的刺状突起。这些结构可Ｗ探测或感受细胞外环境，并且包含一些信号、整合素和巧??粘素（细她粘附分子）的受体。片状伪足是高度分支化的肌动蛋白丝网络，具有质膜??附近最高的分支频率。丝状肌动蛋白的这种叫对枝状＂片状阵列还涉及细胞迁移和膜皱??１３??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]多重PCR/RT-PCR技术检测PRRSV、PPV、PRV和PCV-2[J]. 王娟萍,姚敬明,高英杰,金扩世,丁馥香,周胜花,曹日亮,贺东昌,雷宇平. 中国兽医学报. 2009(03)
[2]猪圆环病毒分离鉴定及猪断奶多系统衰弱综合征的诊断[J]. 郎洪武,王力,张广川,程君生,宋立. 中国兽医科技. 2001(03)
本文编号：3386892
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