奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的构建及其效力检测

发布时间：2021-09-09 09:41

　　奶牛乳房炎是奶牛养殖中常见的多发性疾病，是造成奶牛养殖业严重经济损失的疾病之一，同时危害人类健康和公共卫生，金黄色葡萄球菌是其主要病原之一。防治上由于药物残留和细菌耐药性的不断增强和蔓延，疫苗被认为是最有效的手段。黏附素存在金黄色葡萄球菌表面，是一类识别并特异性结合细胞和组织特殊结构及相关蛋白，荚膜多糖是细菌在宿主及环境生存的重要表面结构，与载体蛋白结合可转变为T细胞依赖性抗原。纤黏蛋白（FnBP）和纤黏蛋白原凝集素A（ClfA）存在于几乎所有的金黄色葡萄球菌，ClfA的黏附作用位于其蛋白的A区域（221～550aa）内，5型荚膜多糖是临床分离的主要血清型。本研究以ClfAA、FnBPA及CP5为研究对象，旨在开展金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的研制。目的：奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌亚单位疫苗的构建方法：采用PCR技术对引起奶牛乳腺炎的金黄色葡萄球菌分离株SHZ1的ClfAA和FnBPA基因进行扩增，利用载体pMD19-T分别构建克隆质粒，再运用酶切技术成功构建双基因表达质粒pET-32a（+）-ClfAA-FnBPA。用不同浓度的IPTG进行4h诱导，过Ni柱使蛋白得到进一步纯化；荚膜多糖提... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

【文章页数】：76 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
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摘要
Abstract
英文缩略表
引言
第一章 文献综述 奶牛乳房炎研究进展
    1 奶牛乳房炎诊断与防治
        1.1 奶牛乳房炎危害
        1.2 奶牛乳房炎分类
        1.3 奶牛乳房炎的病因
        1.4 奶牛乳房炎诊断
        1.5 奶牛乳房炎的防治
    2 致奶牛乳房炎金黄色葡萄球菌
        2.1 金黄色葡萄球菌生物学特性
        2.2 金黄色葡萄球菌致病性
        2.3 黄色葡萄球菌疫苗研究
        2.4 黄色葡萄球菌荚膜多糖的提纯
        2.5 蛋白质-多糖偶联方法研究
第二章 实验研究
    实验一 金黄色葡萄球菌 CLFAA、FNBPA 基因的克隆与串联表达
        摘要
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
    实验二 5 型荚膜多糖的提取纯化及生物学特性研究
        摘要
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
    实验三 CLFA A-FNBPA 与 CP5 偶联抗原的制备及生物学特性分析
        摘要
        1 材料与方法
        2 结果
        3 讨论
结论
创新点
全文参考文献
附录
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]奶牛乳房炎的危害及其防治措施[J]. 米耀荣,郭生泉,张勇,徐启华,马启才,刘建鹏,窦鹏勋.  畜牧与饲料科学. 2009(10)
[2]多糖的研究开发中值得注意的一些问题[J]. 方积年,丁侃.  食品与药品. 2007(12)
[3]多重PCR检测奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和酵母菌方法的建立与应用[J]. 马保臣,秦卓明,蔡玉梅,董玉兰,柴同杰.  畜牧兽医学报. 2006(11)
[4]奶牛乳腺炎防治研究进展[J]. 李英俊,藏丽,郭顺元,张乃生,韦旭斌.  中国奶牛. 2006(03)
[5]奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌TH-16S 733330株荚膜多糖免疫原性研究[J]. 马文戈,李建军,喻昌盛,徐志光.  中国兽药杂志. 2006(02)
[6]奶牛乳腺炎的细菌学研究[J]. 马保臣,牛家华,高玉君,秦卓明,柴同杰,李建基,王春璈.  家畜生态学报. 2005(06)
[7]奶牛金黄色葡萄球菌乳房炎菌苗佐剂研究现状[J]. 林锋强,胡松华,胡奇林,陈少莺.  动物医学进展. 2004(06)
[8]克仑特罗偶联物的鉴定[J]. 谷峰,薛飞群,张丽芳.  中国兽药杂志. 2004(03)
[9]奶牛乳腺炎研究进展[J]. 刘佩红,黄忠,李维功,徐锋.  上海畜牧兽医通讯. 2003(06)
[10]奶牛乳房炎的病因分析[J]. 聂爱琴,郑明学,古少鹏,韩克光.  科技情报开发与经济. 2003(03)

博士论文
[1]以肺炎球菌溶血素为载体的中耳炎肺炎球菌结合疫苗的制备及免疫原性研究[D]. 陈泽宇.复旦大学 2007

硕士论文
[1]金黄色葡萄球菌血清5型荚膜多糖的提取纯化及鉴定[D]. 刘庆涛.吉林大学 2007



本文编号：3391867