猪圆环病毒2型Cap蛋白基因重组腺病毒的构建及实验免疫研究

发布时间：2021-09-19 13:20

　　猪圆环病毒2型（Porcine circovirus-2, PCV-2）是迄今发现的一种最小的致病性动物病毒,是引起断奶仔猪多系统衰竭综合征（PMWS）的主要病原,此外还能够引起猪的皮炎和肾病综合征（PDNS）、增生性和坏死性肺炎、胎儿心肌炎、母猪繁殖障碍、肠炎、断奶仔猪与育肥猪的呼吸道疾病以及仔猪先天性震颤（CT）等,这些疾病统称为猪圆环病毒相关疾病（PCVAD）。该病目前已遍布各养猪国家,成为危害世界养猪业的重要疫病之一。衣壳蛋白是PCV-2主要的免疫原蛋白,是疫苗研发和PCV-2特异性血清学诊断的重要靶蛋白。本研究将编码PCV-2Cap蛋白的ORF2克隆到腺病毒表达系统穿梭质粒,构建了重组穿梭质粒pacAd5CMV-Cap，将被限制性内切酶Pad线性化后的骨架质粒和重组穿梭质粒共转染HEK293AD细胞,两者在真核细胞内同源重组并包装出携带PCV2-Cap基因的复制缺陷型重组人5型腺病毒,命名为rAd5-Cap;以同样方法重组获得了不含任何靶基因的野生型重组腺病毒wt-rAd5。病毒增殖稳定后,]Ad5-Cap与wt-rAd5滴度可达到1085TCID50/mL左右；一步增殖实验... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
目录
前言
第一篇 文献综述
    第一章 猪圆环病毒2型研究进展
        1.1 PCV-2分子生物学
        1.2 PCV-2流行病学
        1.3 PCV-2感染相关疾病(PCVAD)
        1.4 PCV-2诊断技术
        1.5 PCV-2疫苗研究
    第二章 腺病毒载体的研究进展
        2.1 腺病毒载体的种类及构建策略
        2.2 腺病毒载体的应用
    第三章 研究的目的和意义
第二篇 研究内容
    第一章 PCV-2 Cap蛋白重组复制缺陷型人5型腺病毒的构建
        1.1 材料与方法
        1.2 结果
        1.3 讨论
        1.4 小结
    第二章 重组腺病毒rAd5-Cap的生物学特性鉴定
        2.1 材料与方法
        2.2 结果
        2.3 讨论
        2.4 小结
    第三章 重组腺病毒rAd5-Cap的免疫原性分析
        3.1 材料与方法
        3.2 结果
        3.3 讨论
        3.4 小结
结论
参考文献
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]狂犬病病毒SRV9株糖蛋白333位氨基酸变异对其免疫原性的影响[J]. 孙程龙,杨洋,王颖,宫婷,刘祥义,陈奇,王景龙,刘晔,张守峰,扈荣良.  中国生物制品学杂志. 2012(05)
[2]狂犬病病毒糖蛋白重组人腺病毒的构建及免疫效果的初步研究[J]. 王颖,张守峰,刘晔,张菲,张锦霞,扈荣良.  病毒学报. 2011(05)
[3]我国部分地区猪圆环病毒2型分离株的遗传变异分析[J]. 郭龙军,陆月华,危艳武,黄立平,刘长明.  中国预防兽医学报. 2009(11)
[4]猪圆环病毒感染诊断方法研究进展[J]. 张琦,李书华,王淑杰,蔡雪辉.  动物医学进展. 2008(06)
[5]猪圆环病毒病实验室检验技术研究进展[J]. 慕泽鑫,刘珊,张社民,高英杰,刘国文,赵建增,仝利剑.  中国畜牧兽医. 2008(06)
[6]腺病毒表达载体研究进展[J]. 丁长根,刘惠莉.  动物医学进展. 2007(10)
[7]猪圆环病毒2型免疫过氧化物酶单层细胞试验抗体检测试剂盒的研制及应用[J]. 刘长明,张超范,危艳武,张朝霞,袁婧.  中国预防兽医学报. 2007(08)
[8]第三代腺病毒载体的研究进展[J]. 徐学武,俞卫锋.  生物技术. 2005(03)



本文编号：3401688