日本血吸虫3天童虫蛋白质组学分析及SjPHB的生物学特性研究
发布时间：2021-09-23 15:28
日本血吸虫病是流行广泛、危害严重的人畜共患寄生虫病。肺期童虫体小且结构简单,是血吸虫在终末宿主体内发育的早期阶段,和在移行过程中虫体数量减少的最主要阶段。因此,肺期童虫被视作宿主免疫系统攻击的重要靶标。1.日本血吸虫3d肺期童虫蛋白质组分析利用非标记定量蛋白质组学比较分析了日本血吸虫3 d童虫与42 d成虫的蛋白组成和表达差异,结果显示3d虫体上调差异表达蛋白194个、下调差异435个。选取C1LVH1、Q86E32等19个差异表达蛋白进行PRM验证,结果与非标记定量蛋白质组学结果一致。GO分析显示,差异表达蛋白主要参与大分子复合物组装、ATP依赖性微管马达的调节、ATP活性的正调节及ATP依赖性微管正调控等生物学过程。2.日本血吸虫Prohibitin 1（SjPHB1）和Prohibitin 2（SjPHB2）的克隆表达及动物免疫保护效果评估利用PCR和RACE分别扩增获得SjPHB1和SjPHB2的基因片段。序列分析表明,SjPHB1含825bp的ORF,编码274个氨基酸,无信号肽和跨膜区;SjPHB2含900bp的ORF,编码299个氨基酸,无信号肽,具有1个跨膜结构区。成功...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
d肺期童虫的观察Figure2-1Observationof3dlung-stageschistosomula
中国农业科学院硕士学位论文第二章日本血吸虫3d肺期童虫蛋白质组学分析11图2-13d肺期童虫的观察Figure2-1Observationof3dlung-stageschistosomula2.4.23d童虫和42d成虫蛋白PAGE比较和质谱分析SDS-PAGE电泳（图2-2）结果显示3d童虫和42d成虫提取的蛋白样品正常且两组样品间存在明显差异。3d童虫蛋白浓度为3.81μg/μL,42d成虫蛋白浓度为8.10μg/μL，样品可以满足进行后续labelfree和PRM实验的要求。利用Label-free非标记定量蛋白质组学技术共鉴定到3121个蛋白质，鉴定到的肽段总数为16593，鉴定到的唯一肽段总数是14374个，对鉴定到蛋白质进行筛选后，其中3d肺期童虫蛋白有2102个，42d成虫蛋白有3102个。图2-2SDS-PAGE分析3d童虫和42d成虫蛋白Figure2-2SDS-PAGEanalysisofproteinsamplesof3dlung-stageschistosomulaand42dadultworms2.4.3筛选3d童虫和42d成虫差异表达蛋白3d童虫与42d成虫的差异表达蛋白质总数为629个，其中上调差异表达蛋白有194个，下调差异表达蛋白有435个，见表2-3。特殊差异蛋白质结果见表2-4，其中3d童虫鉴定到
中国农业科学院硕士学位论文第二章日本血吸虫3d肺期童虫蛋白质组学分析12而42d成虫未鉴定到的蛋白质有19个，而42d成虫鉴定到3d童虫却未鉴定到的蛋白有751个。比较组3dVS42d倍数差异表达蛋白质筛选结果如图2-3所示。表2-3各比较组差异表达蛋白质数量Table2-3NumberofdifferentiallyexpressedproteinsineachcomparisongroupComparisonsUpDownAll3dVS42d194435629表2-43d与42d特殊差异蛋白质分析结果统计Table2-4Specialstatisticaldifferencesinproteinanalysisresults类别蛋白质数量3d+42d-193d-42d+751“+”表示在对应的组中有鉴定到；“-”表示在对应的组中没有鉴定到图2-3比较组3dVS42d火山图Figure2-3Comparisonof3dvs42dvolcano2.4.43d童虫和42d成虫差异表达蛋白聚类分析采用层次聚类算法对3d童虫和42d成虫的差异表达蛋白质采取聚类分析，数据采用热图(Heatmap)形式展示，如图2-4表明。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2018年全国血吸虫病疫情通报[J]. 张利娟,徐志敏,郭婧怡,戴思敏,党辉,吕山,许静,李石柱,周晓农. 中国血吸虫病防治杂志. 2019(06)
[2]日本血吸虫DNA疫苗联合免疫的研究进展[J]. 冯其梅,张树菊,汪世平. 中国人兽共患病学报. 2012(07)
[3]血吸虫与宿主相互关系的研究进展[J]. 唐春莲,熊涛,蒋明森,董惠芬. 国际医学寄生虫病杂志. 2012 (03)
[4]山丘区流域治理与兴林抑螺[J]. 费世民,蒋俊明,刘国华,黄明忠. 湿地科学与管理. 2008(01)
[5]吡喹酮对血吸虫电压门控Ca2+通道作用的研究进展[J]. 张玲,周晓农. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2008(01)
[6]日本血吸虫候选疫苗研究现状与展望[J]. 闻礼永,吴观陵. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2007(05)
[7]中国血吸虫病综合治理的历史与现状[J]. 郭家钢. 中华预防医学杂志. 2006(04)
[8]我国血吸虫病防治研究现状与对策[J]. 杨哲,赵慧芬. 中国现代医学杂志. 2004(01)
[9]血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅶ曼氏血吸虫吡喹酮抗性株与敏感株某些生物学特性[J]. 梁幼生,戴建荣,朱荫昌,李洪军,徐明,司进,许永良,杭盘宇,G.C.Coles,M.J.Doenhoff. 中国血吸虫病防治杂志. 2003(06)
[10]血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅵ 吡喹酮对曼氏血吸虫吡喹酮抗性株和敏感株虫卵肉芽肿形成的影响[J]. 梁幼生,戴建荣,朱荫昌,李洪军,徐明,司进,许永良,杭盘宇,G.C.Coles,M.J.Doenhoff. 中国血吸虫病防治杂志. 2003(05)
本文编号：3405958
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：87 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
d肺期童虫的观察Figure2-1Observationof3dlung-stageschistosomula
中国农业科学院硕士学位论文第二章日本血吸虫3d肺期童虫蛋白质组学分析11图2-13d肺期童虫的观察Figure2-1Observationof3dlung-stageschistosomula2.4.23d童虫和42d成虫蛋白PAGE比较和质谱分析SDS-PAGE电泳（图2-2）结果显示3d童虫和42d成虫提取的蛋白样品正常且两组样品间存在明显差异。3d童虫蛋白浓度为3.81μg/μL,42d成虫蛋白浓度为8.10μg/μL，样品可以满足进行后续labelfree和PRM实验的要求。利用Label-free非标记定量蛋白质组学技术共鉴定到3121个蛋白质，鉴定到的肽段总数为16593，鉴定到的唯一肽段总数是14374个，对鉴定到蛋白质进行筛选后，其中3d肺期童虫蛋白有2102个，42d成虫蛋白有3102个。图2-2SDS-PAGE分析3d童虫和42d成虫蛋白Figure2-2SDS-PAGEanalysisofproteinsamplesof3dlung-stageschistosomulaand42dadultworms2.4.3筛选3d童虫和42d成虫差异表达蛋白3d童虫与42d成虫的差异表达蛋白质总数为629个，其中上调差异表达蛋白有194个，下调差异表达蛋白有435个，见表2-3。特殊差异蛋白质结果见表2-4，其中3d童虫鉴定到
中国农业科学院硕士学位论文第二章日本血吸虫3d肺期童虫蛋白质组学分析12而42d成虫未鉴定到的蛋白质有19个，而42d成虫鉴定到3d童虫却未鉴定到的蛋白有751个。比较组3dVS42d倍数差异表达蛋白质筛选结果如图2-3所示。表2-3各比较组差异表达蛋白质数量Table2-3NumberofdifferentiallyexpressedproteinsineachcomparisongroupComparisonsUpDownAll3dVS42d194435629表2-43d与42d特殊差异蛋白质分析结果统计Table2-4Specialstatisticaldifferencesinproteinanalysisresults类别蛋白质数量3d+42d-193d-42d+751“+”表示在对应的组中有鉴定到；“-”表示在对应的组中没有鉴定到图2-3比较组3dVS42d火山图Figure2-3Comparisonof3dvs42dvolcano2.4.43d童虫和42d成虫差异表达蛋白聚类分析采用层次聚类算法对3d童虫和42d成虫的差异表达蛋白质采取聚类分析，数据采用热图(Heatmap)形式展示，如图2-4表明。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2018年全国血吸虫病疫情通报[J]. 张利娟,徐志敏,郭婧怡,戴思敏,党辉,吕山,许静,李石柱,周晓农. 中国血吸虫病防治杂志. 2019(06)
[2]日本血吸虫DNA疫苗联合免疫的研究进展[J]. 冯其梅,张树菊,汪世平. 中国人兽共患病学报. 2012(07)
[3]血吸虫与宿主相互关系的研究进展[J]. 唐春莲,熊涛,蒋明森,董惠芬. 国际医学寄生虫病杂志. 2012 (03)
[4]山丘区流域治理与兴林抑螺[J]. 费世民,蒋俊明,刘国华,黄明忠. 湿地科学与管理. 2008(01)
[5]吡喹酮对血吸虫电压门控Ca2+通道作用的研究进展[J]. 张玲,周晓农. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2008(01)
[6]日本血吸虫候选疫苗研究现状与展望[J]. 闻礼永,吴观陵. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2007(05)
[7]中国血吸虫病综合治理的历史与现状[J]. 郭家钢. 中华预防医学杂志. 2006(04)
[8]我国血吸虫病防治研究现状与对策[J]. 杨哲,赵慧芬. 中国现代医学杂志. 2004(01)
[9]血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅶ曼氏血吸虫吡喹酮抗性株与敏感株某些生物学特性[J]. 梁幼生,戴建荣,朱荫昌,李洪军,徐明,司进,许永良,杭盘宇,G.C.Coles,M.J.Doenhoff. 中国血吸虫病防治杂志. 2003(06)
[10]血吸虫对吡喹酮抗药性的研究 Ⅵ 吡喹酮对曼氏血吸虫吡喹酮抗性株和敏感株虫卵肉芽肿形成的影响[J]. 梁幼生,戴建荣,朱荫昌,李洪军,徐明,司进,许永良,杭盘宇,G.C.Coles,M.J.Doenhoff. 中国血吸虫病防治杂志. 2003(05)
本文编号：3405958
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