对转基因克隆牛乳脂肪球膜蛋白质及四种牛奶蛋白质组学研究
发布时间：2021-09-23 19:19
作为牛奶中蛋白质的重要组成部分乳脂肪球膜蛋白质具有多种重要的生理功能,由于其来源于乳腺上皮细胞膜及内质网,对其研究不仅是对转基因克隆牛奶蛋白质安全性评估的重要组成,而且可以从侧面反映产奶牛本身乳腺的健康状况。围绕不同奶牛品种或品系（包括美国荷斯坦牛、中国荷斯坦牛、娟珊牛及水牛）乳品性状的差异,建立牛乳清蛋白差异表达谱、乳脂肪球膜差异蛋白质表达谱,挖掘与乳品质改良相关的功能性蛋白,揭示不同奶牛品种乳蛋白质合成、分泌信号传导通路的差异,为牛奶品质的改良提供素材,同时通过牛奶蛋白质组技术平台和牛奶蛋白质数据库的建立,进行转基因牛奶蛋白质表达差异的食品安全研究。在本论文中,我们分别对在乳腺中特异表达人溶菌酶（TC-LZ）、人α-乳清蛋白（TC-LA）和人乳铁蛋白（TC-LF）的三个转基因克隆牛品系共17头健康的转基因克隆牛、3头健康的克隆牛和9头健康的普通对照牛的初乳和常乳的乳脂肪球膜蛋白质进行了全面系统的分析。利用液质联用对各组中初乳和常乳乳脂肪球膜蛋白质表达谱进行了鉴定和分析。我们在五组样品中共鉴定到蛋白质1225种,在TC-LA组中有166种特异表达的蛋白质,在TC-LF组中有265种特...
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
转基因克隆组蛋白表达谱中特异表达蛋白功能的富集结果
2.3.2利用2D-PAGE对转基因克隆MFGM蛋白质的鉴定利！^^双向电泳的方法，我们对三组转基因克隆MFGM蛋内质、一组克隆牛MFGM蛋内质、一组齊通牛MFGM蛋内质初乳及常乳的样品进行了鉴定。由丁-人姓的MFGM蛋白质属丁?跨膜型大分子量蛋白质，并且大量蛋白质高度糖基化，利用齊通考马斯亮蓝染色无法将所存的蛋白质着色，闪此我们采)与质谱兼容的银染能够更好的显示山大W的低丰度蛋白质。与考马斯亮蓝染色乳清蛋白质相比，银染的MFGM蛋白胶图显示出了更多的蛋ft质，组成可以明显的看出与乳清蛋A组成的差异（图2-3)，可以看出采用氯仿/甲醇沉淀的方法可以有效的收集到MFGM蛋內质。在利用2D-电泳结合高灵敏度银染的方法，获得了蛋內质差异谱与LC-MS/MS的结果相比，一些差异点并没有在银染胶图上表现出来，说明在这些差异点的蛋白质浓度远远低丁?银染的鉴定线，属丁-极低丰度蛋白质。利用图像分析软件对各个牛MFGM组内初乳和常乳差异表的蛋白质进行搜寻，并利MALDl-TOF-MS的方法进行鉴定（图2-4)。除了儿种抗体之外，我们还发现了 33种蛋白质在初乳中的表达呈要远远高丁?常乳MFGM。通过对其功能的研究，去除一些未知功能的蛋内质，人量的蛋白质都与免疫相关，这些蛋内质在新生儿获得性免疫方面具有重耍的作HJ。
利用图像分析软件对各个牛MFGM组内初乳和常乳差异表的蛋白质进行搜寻，并利MALDl-TOF-MS的方法进行鉴定（图2-4)。除了儿种抗体之外，我们还发现了 33种蛋白质在初乳中的表达呈要远远高丁?常乳MFGM。通过对其功能的研究，去除一些未知功能的蛋内质，人量的蛋白质都与免疫相关，这些蛋内质在新生儿获得性免疫方面具有重耍的作HJ。图2-3银染MFGM蛋白质胶图（左）与考马斯亮蓝染色乳清蛋白质胶图（右）比较。Figure 2-3 comparison gel from MFGM proteinsof silver stain (left) and from milk whey proteinsof coomassiebrilliant blue staining (right).44
本文编号：3406267
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：116 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
转基因克隆组蛋白表达谱中特异表达蛋白功能的富集结果
2.3.2利用2D-PAGE对转基因克隆MFGM蛋白质的鉴定利！^^双向电泳的方法，我们对三组转基因克隆MFGM蛋内质、一组克隆牛MFGM蛋内质、一组齊通牛MFGM蛋内质初乳及常乳的样品进行了鉴定。由丁-人姓的MFGM蛋白质属丁?跨膜型大分子量蛋白质，并且大量蛋白质高度糖基化，利用齊通考马斯亮蓝染色无法将所存的蛋白质着色，闪此我们采)与质谱兼容的银染能够更好的显示山大W的低丰度蛋白质。与考马斯亮蓝染色乳清蛋白质相比，银染的MFGM蛋白胶图显示出了更多的蛋ft质，组成可以明显的看出与乳清蛋A组成的差异（图2-3)，可以看出采用氯仿/甲醇沉淀的方法可以有效的收集到MFGM蛋內质。在利用2D-电泳结合高灵敏度银染的方法，获得了蛋內质差异谱与LC-MS/MS的结果相比，一些差异点并没有在银染胶图上表现出来，说明在这些差异点的蛋白质浓度远远低丁?银染的鉴定线，属丁-极低丰度蛋白质。利用图像分析软件对各个牛MFGM组内初乳和常乳差异表的蛋白质进行搜寻，并利MALDl-TOF-MS的方法进行鉴定（图2-4)。除了儿种抗体之外，我们还发现了 33种蛋白质在初乳中的表达呈要远远高丁?常乳MFGM。通过对其功能的研究，去除一些未知功能的蛋内质，人量的蛋白质都与免疫相关，这些蛋内质在新生儿获得性免疫方面具有重耍的作HJ。
利用图像分析软件对各个牛MFGM组内初乳和常乳差异表的蛋白质进行搜寻，并利MALDl-TOF-MS的方法进行鉴定（图2-4)。除了儿种抗体之外，我们还发现了 33种蛋白质在初乳中的表达呈要远远高丁?常乳MFGM。通过对其功能的研究，去除一些未知功能的蛋内质，人量的蛋白质都与免疫相关，这些蛋内质在新生儿获得性免疫方面具有重耍的作HJ。图2-3银染MFGM蛋白质胶图（左）与考马斯亮蓝染色乳清蛋白质胶图（右）比较。Figure 2-3 comparison gel from MFGM proteinsof silver stain (left) and from milk whey proteinsof coomassiebrilliant blue staining (right).44
本文编号：3406267
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3406267.html
