干扰素诱导的2’-5’寡腺苷酸合成酶样蛋白通过增强MDA5介导的Ⅰ型干扰素信号通路抑制猪瘟病毒复制

发布时间：2021-09-25 01:48

　　猪瘟是由猪瘟病毒（CSFV）引起的一种严重危害养猪业的烈性动物传染病。天然免疫系统是机体抵抗病毒感染的第一道防线,其中干扰素（IFN）和干扰素刺激基因（ISGs）在宿主抗病毒防御过程中发挥着关键作用。猪瘟病毒（CSFV）感染宿主后,激活I型IFN信号通路,诱导其下游的ISGs转录表达,进而发挥抗CSFV作用。实验室前期实验筛选到猪源2’-5’寡腺苷酸合成酶样蛋白（pOASL）为潜在的抗CSFV ISG分子,但其抗病毒分子机制尚不清楚。本研究旨在证实pOASL的抗CSFV活性,并解析其抑制CSFV复制的分子机制。我们构建了过表达pOASL的PK-15细胞系（PK-pOASL）和对照细胞系PK-EGFP,将CSFVShimen株感染过表达细胞系,从CSFV滴度、基因组拷贝数及非结构蛋白Npro表达水平三个方面评价CSFV的复制水平,结果表明过表达pOASL抑制CSFV复制;相反,利用siRNA下调PK-15细胞中的内源性OASL蛋白后,感染rCSFV-Fluc或CSFV-SM株,证实下调内源性OASL促进CSFV复制。过表达及下调pOASL试验均证实pOASL是一种抗CSFV ISG分子。... 

【文章来源】：中国农业科学院北京市

【文章页数】：53 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

干扰索信号转导通路(改编自Scttneideretal.,2014)

２００９）。人源ＯＡＳＬ?（ｈＯＡＳＬ）发挥抗病毒作用依赖于其Ｃ末端泛素样区域（与泛??素同源），而不依赖ＲＮａｓｅＬ系统。ｈＯＡＳＬ利用其泛素样区域与ＲＩＧ－Ｉ相互作用，??进而激活Ｉ型ＩＦＮ信号发挥抗病毒效应（图３）。例如，ｈＯＡＳＬ能够抑制脑心肌炎??病毒（ＥＭＣＶ）的复制（Ｍａｒｑｕｅｓｅｔａｌ．，２００８）。然而猪源?ＯＡＳＬ?（ｐＯＡＳＬ）基因存??在一个提前终止密码子，表达缺少Ｃ末端泛素样区域的截短型ＯＡＳＬ蛋白。???ｍ???ｒ??ｎ－??＾?＾?＆?｜?ＲＩＧ－Ｉ?ｉｎａｃｔｉｖｅ??．，?ＲＮａｓｅ?Ｌ??ｉｎａｃｔｉｖｅ?１ＭＤＡ５?ＲＩＣ－Ｉ?ｈＯＡＳＬ??ＡＴＰ?２’－５’??ＲＮａＳｅ?Ｌ?Ｃ?ｌｅｗｅｄ??ｄｓＫＮＡ??ａｃｌｉ＇ｃ?．?ｉ??＾?ＩＲＦ７?ＩＲＦ３??Ｊｎ０ＡＳＬ，?Ｊ?１ＲＦ７??ＩＲＦ７ｍＫＮＡ?Ｔｒａｎｓｌａｔｉｏｎ??一匕￣；?「＂、??＞－Ｐ，ＲＦ７?．ＲＦ７?，ＫＫ３?）??ｌ，Ｙ＇?，Ｖ、?，Ｙ、??＾?＾?ｗ??ｙ?ｙ?、人?乂?、人?＞／?ｖ?ｖ??图３?ＯＡＳ家族蛋白抗病毒通路（改编自Ｃｈｏｉ?ｅｔａｌ．

Ｆｉｇ．?４?Ｓｃｒｅｅｎｉｎｇ?ｏｆ?ｔｈｅ?ａｎｔｉ－ＣＳＦＶ?ＩＳＧｓ．?（Ｌｉ?ｅｔ?ａｌ．，?２０１６）??１．３研宄目的及意义??猪瘟严重危害我国养猪业，目前对猪瘟的防控以接种疫苗为主。先天免疫是宿??主防御病毒入侵的第一道防线，ＩＳＧｓ是［ＦＮ诱导宿主产生的发挥抗病毒作用的效应??分子，因此，研究宿主ＩＳＧｓ分子抗猪瘟病毒机制具有重要的现实意义和应用价值。??在前期筛选抗ＣＳＦＶ特异性ＩＳＧｓ分子研宄中，发现ｐＯＡＳＬ为潜在的抗ＣＳＦＶ??ＩＳＧｓ分子（Ｌｉｅｔａｌ．，２０１６）。本研究旨在鉴定ｐＯＡＳＬ的抗ＣＳＦＶ活性，并深入解??析ｐＯＡＳＬ抗ＣＳＦＶ的分子机制，为抗ＣＳＦＶ制剂的研发提供可能，为黄病毒科其??他成员的抗病毒ＩＳＧｓ研究提供参考。此外，阐明ｐＯＡＳＬ的抗病毒机制，为丰富不??同物种ＯＡＳＬ的抗病毒机制提供参考，因此，本研究既具有突出的科学意义，又具??有潜在的应用价值。??


本文编号：3408849