硒对铅引起鸡心脏氧化应激和免疫毒性的缓解作用
发布时间：2021-09-27 23:19
铅（lead,Pb）是一种有毒重金属,可损害人和动物的健康。硒（selenium,Se）是人和动物必需的微量元素之一,能够缓解重金属的毒性作用。国内外已经有关于动物铅中毒的研究,但是,硒缓解铅引起的鸡心脏氧化应激和免疫毒性的机制尚不清楚。因此,本研究建立了鸡铅硒模型。通过对鸡心脏组织显微结构观察和超微结构观察,以及对氧化应激相关因子、NO、iNOS、细胞因子和热休克蛋白水平的检测,探讨硒缓解铅引起的鸡心脏氧化应激和免疫毒性的机制。180只7日龄海兰蛋公鸡被随机分成对照组、Se组、Pb+Se组和Pb组,每组45只鸡。对照组饲喂标准商品日粮（Se含量为0.49 mg/kg）和饮用水;Se组饲喂添加亚硒酸钠的标准商品日粮（Se含量为1 mg/kg）和饮用水;Pb+Se组饲喂添加亚硒酸钠的标准商品日粮（Se含量为1 mg/kg）和添加醋酸铅的饮用水（Pb含量为350 mg/L）;Pb组饲喂标准商品日粮和添加醋酸铅的饮用水（Pb含量为350 mg/L）。在试验的第30天、60天和90天,分别从每组随机取15只鸡处死,并采集心脏组织样品。检测指标如下:显微结构和超微结构,氧化应激相关因子（GPx、...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
鸡心脏显微结构（苏木精和伊红染色×400）
图 3-2 鸡心脏的超微结构Fig. 3-2 Ultrastructure of chicken hearts3.3 总 RNA 和 PCR 产物的鉴定总 RNA 的 OD260/OD280 比值在 1.9-2.1。结果说明总 RNA 的纯度合格。且总 RNA 琼脂糖凝胶电泳条带清晰见附录 B（图 B1）。溶解曲线单峰，引物具有特异性，没有出现二聚体。Ct 值满足 20 到 30 之间见附录 C。PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳分析，没有多余条带，与预期大小一致见附录 B（图 B2 和图 B3）。3.4 氧化应激相关因子的结果我们检测了试验第 30 天、60 天和 90 天 3 个时间点的鸡心脏 GPx（图 3-3（a））、GST（图 3-3（b））和 SOD（图 3-3（c））活性，GSH（图 3-3（d））和 MDA（图 3-3（e））含量如图 3-3 所示。在试验的 3 个时间点，GPx、GST 和 SOD 活性，以及 GSH 和 MDA 含量在对照组和 Se 组之间差异不显著（P > 0.05）。在试验的 3 个时间点，Pb+Se 组 GPx、GST和 SOD 活性，以及 GSH 含量显著低于（P < 0.05）对照组和 Se 组。在试验的 3 个时间点，Pb+Se 组 MDA 含量显著高于（P < 0.05）对照组和 Se 组。在试验的 3 个时间点，Pb 组 GPx、
图 3-3 鸡心脏 GPx、GST 和 SOD 活性，GSH 和 MDA 含量Fig. 3-3 GPx, GST, and SOD activities, GSH and MDA contents in chicken hearts.3.5 NO 含量、iNOS 活性、iNOS mRNA 和蛋白表达我们检测了试验第 30 天、60 天和 90 天这 3 个时间点的鸡心脏 NO 含量（图 3-4（a））、iNOS 活性（图 3-4（b））和 iNOS mRNA 表达（图 3-4（c）），以及试验第 90 天的 iNOS的蛋白表达（图 3-4（d））见图 3-4。在试验的 3 个时间点，NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA表达在对照组和 Se 组之间差异不显著（P > 0.05）。在试验的 3 个时间点，Pb+Se 组 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表达显著高于（P < 0.05）对照组和 Se 组。在试验 3 个时间点，Pb 组 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表达显著高于（P < 0.05）对照组、Se 组和 Pb+Se组。在试验第 90 天的 iNOS 蛋白表达在对照组和 Se 组之间差异不显著（P > 0.05）。在试验第 90 天，Pb+Se 组的 iNOS 蛋白表达显著高于（P < 0.05）对照组和 Se 组。在试验第 90 天，Pb 组的 iNOS 蛋白表达显著高于（P < 0.05）对照组、Se 组和 Pb+Se 组。对照组和 Se 组 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表达在试验的第 30 天、60 天和 90天之间差异不显著（P > 0.05）。Pb+Se 组 NO 含量和 iNOS 活性在 90 天显著高于（P < 0.05）30 天和 60 天。Pb+Se 组 iNOS mRNA 表达随着时间增加而显著增加(P < 0.05)。Pb 组的 NO含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表达随着时间增加而显著增加(P < 0.05)。
本文编号：3410802
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：59 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
鸡心脏显微结构（苏木精和伊红染色×400）
图 3-2 鸡心脏的超微结构Fig. 3-2 Ultrastructure of chicken hearts3.3 总 RNA 和 PCR 产物的鉴定总 RNA 的 OD260/OD280 比值在 1.9-2.1。结果说明总 RNA 的纯度合格。且总 RNA 琼脂糖凝胶电泳条带清晰见附录 B（图 B1）。溶解曲线单峰，引物具有特异性，没有出现二聚体。Ct 值满足 20 到 30 之间见附录 C。PCR 产物经琼脂糖凝胶电泳分析，没有多余条带，与预期大小一致见附录 B（图 B2 和图 B3）。3.4 氧化应激相关因子的结果我们检测了试验第 30 天、60 天和 90 天 3 个时间点的鸡心脏 GPx（图 3-3（a））、GST（图 3-3（b））和 SOD（图 3-3（c））活性，GSH（图 3-3（d））和 MDA（图 3-3（e））含量如图 3-3 所示。在试验的 3 个时间点，GPx、GST 和 SOD 活性，以及 GSH 和 MDA 含量在对照组和 Se 组之间差异不显著（P > 0.05）。在试验的 3 个时间点，Pb+Se 组 GPx、GST和 SOD 活性，以及 GSH 含量显著低于（P < 0.05）对照组和 Se 组。在试验的 3 个时间点，Pb+Se 组 MDA 含量显著高于（P < 0.05）对照组和 Se 组。在试验的 3 个时间点，Pb 组 GPx、
图 3-3 鸡心脏 GPx、GST 和 SOD 活性，GSH 和 MDA 含量Fig. 3-3 GPx, GST, and SOD activities, GSH and MDA contents in chicken hearts.3.5 NO 含量、iNOS 活性、iNOS mRNA 和蛋白表达我们检测了试验第 30 天、60 天和 90 天这 3 个时间点的鸡心脏 NO 含量（图 3-4（a））、iNOS 活性（图 3-4（b））和 iNOS mRNA 表达（图 3-4（c）），以及试验第 90 天的 iNOS的蛋白表达（图 3-4（d））见图 3-4。在试验的 3 个时间点，NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA表达在对照组和 Se 组之间差异不显著（P > 0.05）。在试验的 3 个时间点，Pb+Se 组 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表达显著高于（P < 0.05）对照组和 Se 组。在试验 3 个时间点，Pb 组 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表达显著高于（P < 0.05）对照组、Se 组和 Pb+Se组。在试验第 90 天的 iNOS 蛋白表达在对照组和 Se 组之间差异不显著（P > 0.05）。在试验第 90 天，Pb+Se 组的 iNOS 蛋白表达显著高于（P < 0.05）对照组和 Se 组。在试验第 90 天，Pb 组的 iNOS 蛋白表达显著高于（P < 0.05）对照组、Se 组和 Pb+Se 组。对照组和 Se 组 NO 含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表达在试验的第 30 天、60 天和 90天之间差异不显著（P > 0.05）。Pb+Se 组 NO 含量和 iNOS 活性在 90 天显著高于（P < 0.05）30 天和 60 天。Pb+Se 组 iNOS mRNA 表达随着时间增加而显著增加(P < 0.05)。Pb 组的 NO含量、iNOS 活性和 iNOS mRNA 表达随着时间增加而显著增加(P < 0.05)。
本文编号：3410802
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