稳定表达乙型脑炎病毒NS2B/NS4B细胞系的构建及其在筛选互作蛋白中的初步应用

发布时间：2021-09-28 14:04

　　日本乙型脑炎病毒（Japanese Encephalitis Virus,JEV）属于黄病毒科（Flaviviridae）黄病毒属,是一种典型的嗜神经病毒。该病毒主要经蚊虫传播,并严重危害人、畜健康。人类发病后死亡率高,且治愈后往往留下神经学后遗症。在猪群中,该病毒主要引起妊娠母猪流产、产死胎或木乃伊胎,公猪发生睾丸炎,育肥猪持续高热等,给养猪业造成巨大的经济损失。NS2B和NS4B蛋白是JEV的2个重要的非结构蛋白,它们的功能尚待解答。本研究旨在构建能稳定表达NS2B和NS4B蛋白的细胞系,并在此基础上,通过串联亲和层析（Tandem Affinity Purification,TAP）与质谱（Mass spectrometry analysis,MS）技术,筛选可能与它们相互作用的宿主蛋白,从而为深入阐明NS2B和NS4B的功能及其与宿主细胞相互作用机制的研究奠定基础。具体研究内容如下:1.构建细胞系利用RT-PCR方法扩增JEV NS2B和NS4B基因,并将之克隆至带嘌呤霉素（Puromycin）抗性基因的载体Psin-EF2-MCS-Pur中。然后利用慢病毒载体包装系统,与ps... 

【文章来源】：华中农业大学湖北省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

图1.日本乙型脑炎分布图

JEV的流行周期Fig.2LifecycleofJapaneseencephalitisvirus

黄病毒科的分类Fig.3ClassificationofFlavivirus

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3412040