抗牛支原体及巴氏杆菌性肺炎二联卵黄抗体的制备及应用效果研究

发布时间：2021-09-29 13:17

　　由牛支原体和多杀性巴氏杆菌混合感染引起的犊牛肺炎和关节炎，可导致大量犊牛的死亡及严重的经济损失。因国内尚无理想的疫苗对其进行有效的预防，抗菌药物易产生耐药性及效果不稳定。本研究旨在制备抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌的卵黄抗体并进行临床应用观察，为本病提供新的防治方法。研究结果如下：1、抗牛支原体高免卵黄抗体的制备：首免采用弗氏完全佐剂灭活苗免疫蛋鸡，剂量为0.5mg/只，首免后第15、30、45d采用弗氏不完全佐剂灭活苗进行加强免疫，剂量分别为1mg/只、1.5mg/只、2mg/只。通过间接ELISA的方法检测卵黄抗体效价，结果表明：在首免后第15d卵黄抗体效价不断增高，免疫后第60d达到高峰，效价为1:128000，并维持30d以上效价开始下降。2、抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体的制备：首免采用弗氏完全佐剂灭活苗免疫蛋鸡，剂量为15亿/只，首免后第10、20、30d采用弗氏不完全佐剂灭活苗加强免疫，剂量为30亿/只。采用已建立的IHA方法检测卵黄抗体效价，结果表明：在首免后第3周出现抗体并且效价不断增高，免疫后第7周抗体效价达到高峰，效价为1:1024，持续5周开始下降。3、抗牛支原体及... 

【文章来源】：石河子大学新疆维吾尔自治区 211工程院校

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
主要缩略词
前言
第一章 文献综述
    1 牛支原体的研究进展
        1.1 支原体的研究概述
        1.2 牛支原体的研究概述
    2 多杀性巴氏杆菌的研究进展
        2.1 多杀性巴氏杆菌的研究概述
        2.2 病原
        2.3 流行病学
        2.4 致病性
        2.5 牛多杀性巴氏杆菌的临床症状与病理变化
        2.6 诊断
        2.7 预防与治疗措施
    3 卵黄抗体的研究进展
        3.1 IgY 的形成
        3.2 IgY 的结构
        3.3 IgY 的稳定性
        3.4 IgY 的制备
        3.5 IgY 的展望
第二章 试验研究
    试验一 抗牛支原体高免卵黄抗体的制备
        1 材料
            1.1 试验动物
            1.2 试验菌株及药品试剂
            1.3 主要设备
            1.4 佐剂的制备
            1.5 间接 ELISA 检测所需试剂及其配置
            1.6 牛支原体培养基的配制
        2 方法
            2.1 牛支原体抗原的制备
            2.2 牛支原体疫苗的制备
            2.3 疫苗质量检测
            2.4 蛋鸡的免疫
            2.5 间接 ELISA 检测卵黄中抗体效价
            2.6 最佳包被抗原和卵黄上清的最佳稀释倍数的确定
            2.7 确定酶标二抗的最佳工作浓度
            2.8 临界值的确定
            2.9 免疫后卵黄抗体效价的变化规律
            2.10 分离卵黄抗体
            2.11 卵黄抗体的无菌与安全性检测
        3 结果
            3.1 疫苗质量检测
            3.2 最佳包被抗原浓度和卵黄上清的稀释倍数的确定
            3.3 酶标二抗最佳浓度的确定
            3.4 临界值的确定
            3.5 免疫后卵黄抗体水平的变化规律
            3.6 卵黄抗体的无菌及安全性检测
        4 讨论
    试验二 抗牛多杀性巴氏杆菌高免卵黄抗体的制备
        1 材料
            1.1 试验动物
            1.2 试验菌株及药品试剂
            1.3 主要设备
            1.4 佐剂的制备
            1.5 主要试剂溶液的配置
            1.6 牛多杀性巴氏杆菌液体培养基的制备
        2 方法
            2.1 抗原的制备
            2.2 牛多杀性巴氏杆菌疫苗的制备
            2.3 疫苗质量检测
            2.4 蛋鸡的免疫
            2.5 绵羊红细胞的制备
            2.6 绵羊红细胞的醛化
            2.7 醛化红细胞的鞣酸化
            2.8 抗原致敏醛化-鞣酸化红细胞
            2.9 IHA 检测卵黄中抗体效价
            2.10 免疫后卵黄抗体效价的变化规律
            2.11 分离卵黄抗体
            2.12 卵黄抗体的无菌与安全性检测
        3 结果
            3.1 疫苗质量检测
            3.2 最佳抗原浓度的选择
            3.3 免疫后卵黄抗体效价的变化规律
            3.4 卵黄抗体的无菌及安全性检测
        4 讨论
    试验三 抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联 IgY 的制备
        1 材料
            1.1 试验动物
            1.2 试验药品及试剂
            1.3 主要设备
            1.4 主要溶液的配置
        2 方法
            2.1 水稀释法提取 IgY
            2.2 氯仿法提取 IgY
            2.3 卡拉胶法提取 IgY
            2.4 透析袋的预处理
            2.5 透析
            2.6 透析后 IgY 的无菌与安全性检测
                2.6.1 无菌检测
                2.6.2 安全性检测
            2.7 效价的检测
        3 结果
            3.1 效价的检测
            3.2 透析后 IgY 的无菌与安全性检测
        4 讨论
    试验四 抗牛支原体及多杀性巴氏杆菌二联 IgY 的临床应用效果观察
        1 材料
            1.1 试验动物的选择
            1.2 实验药品
        2 方法
            2.1 预防及治疗最佳量的确定
            2.2 临床治疗效果判定指标
        3 结果
            3.1 最佳预防量的确定和预防结果
            3.2 最佳治疗量的确定和治疗结果
        4 讨论
第三章 全文结论
创新点
参考文献
致谢
作者简介
在学校期间主要参与的研究课题
在学期间发表文章情况
导师评阅表


【参考文献】：
期刊论文
[1]牛巴氏杆菌病的研究进展[J]. 朱战波.  兽医导刊. 2012(08)
[2]牛巴氏杆菌病的诊断方法[J]. 李金岭,郭宏军,宋艳华.  兽医导刊. 2012(08)
[3]牛巴氏杆菌病的防制[J]. 朴范泽.  兽医导刊. 2012(08)
[4]肉牛牛支原体肺炎感染的细菌学研究[J]. 肖淦文,彭清洁,崔朋,胡长敏,陈颖钰,巴晓亮,陈焕春,郭爱珍.  中国牛业科学. 2012(03)
[5]致犊牛肺炎和关节炎牛支原体新疆株的分离与鉴定[J]. 姚永进,剡根强,王静梅,范伟兴,李岩.  中国畜牧兽医. 2011(12)
[6]一起多发性牛巴氏杆菌病的诊治报告[J]. 李旭蓉,何彦春.  中国牛业科学. 2011(05)
[7]3种ELISA试剂盒检测抗牛支原体抗体的比较[J]. 刘洋,陈维,宋志强,孙文静,李媛,邹小辉,辛九庆.  中国预防兽医学报. 2011(06)
[8]卵黄球蛋白Y的制备及应用[J]. 祝贵新.  养殖技术顾问. 2011(05)
[9]牛巴氏杆菌病的流行及诊治[J]. 郑再成,闫文广.  养殖技术顾问. 2011(03)
[10]浅析牛巴氏杆菌病的流行特点和预防[J]. 罗永锋.  中国畜禽种业. 2011(01)

硕士论文
[1]猪肺炎支原体MY-99株的培养特性、致病性及免疫原性研究[D]. 张莉.四川农业大学 2008
[2]绵羊肺炎支原体山东株的分离鉴定和标准株外膜蛋白特性研究[D]. 王建昌.山东农业大学 2007
[3]牛病毒性腹泻病毒（BVDV）抗原捕获ELISA检测试剂盒的标准化研究[D]. 邓宇.石河子大学 2006



本文编号：3413773