不同细胞唾液酸受体类型及唾液酸转移酶与流感病毒敏感性的研究

发布时间：2021-09-29 13:24

　　为研究人/禽流感病毒对细胞的敏感性差异,本研究选取9种常用细胞,分别以10⁵ TCID₅₀的人源甲型流感病毒（IAV）CA04株与禽流感病毒（AIV）Y280株感染不同细胞,检测不同细胞中流感病毒的增殖水平;利用免疫荧光试验检测细胞表面唾液酸（SA）受体类型及其与流感病毒的结合能力;采用流式细胞术定量检测每种细胞表面的SA类型及含量;通过RT-PCR方法检测唾液酸转移酶（ST）（ST3GAL4、ST6GAL1）基因mRNA的转录水平。结果显示,感染CA04株后,MDCK、16HBE、 DF-1和A549检测到了病毒滴度,但病毒低度较低为:3.2×10² TCID₅₀/0.1 mL～0.95×10¹ TCID₅₀/0.1mL。感染Y280株后,病毒滴度从高到低依次为MDCK、DF-1、Vero、293T、CHO-k1、Hep-2、A549、16HBE和BHK,病毒滴度为6.3×10³ TCID₅₀/0.1 mL～9... 

【文章来源】：中国预防兽医学报. 2020,42(10)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

图1 两株流感病毒在不同细胞中的复制能力的检测结果

将9种细胞分别加入FITC标记的植物凝集素SNA和MAA I后，采用流式细胞技术检测细胞表面被标记的唾液酸受体的荧光强度，并采用Flow Jo V10软件分析各细胞表面的MFI即SA的含量。结果显示，SNA标记的DF-1细胞的荧光强度显著高于其它细胞（p<0.05),MDCK的荧光强度显著高于293T、Hep-2、A549、16HBE、和BHK(p<0.05）（图3A),MDCK的荧光强度与CHO-k1、Vero无统计学差异（p>0.05）（图3A);MAA I标记的各细胞之间的荧光强度差异不显著（图3B）。表明9种细胞中MDCK和DF-1细胞表面SAα（2-6)Gal糖链结构最为丰富，其结合人流感病毒CA04株的能力较强；而SAα（2-3)Gal糖链结构在细胞之间差异不大，其结合AIV Y280株的能力无显著差异，与2.1的结果基本一致。同时进一步表明，SA糖链含量与流感病毒的敏感性呈正相关。图3 各细胞表面SA的定量检测结果

各细胞表面SA的定量检测结果

【参考文献】：
期刊论文
[1]HA 226/228双位点突变对H5N1禽流感病毒受体结合特异性和致病性的影响[J]. 谷春阳,张乾义,孔晖晖,张莹,姜永萍,关云涛,胡永浩,陈化兰.  中国预防兽医学报. 2014(08)
[2]唾液酸受体并非流感病毒各亚型在雪貂组织中播散分布的决定因子[J]. 占玲俊,邓巍,鲍琳琳,吕琦,李枫棣,马春梅,许黎黎,秦川.  中国比较医学杂志. 2012(04)



本文编号：3413782