荧光定量RT-PCR和RT-LAMP检测BVDV方法的建立及应用比较

发布时间：2021-09-29 18:10

　　为建立一种快速、灵敏诊断牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）的方法,试验采用RT-LAMP和荧光定量RT-PCR两种检测方法,与通用RT-PCR方法在特异性、灵敏性、样品检出率、试验设计复杂程度、扩增反应效率、使用仪器简单程度和检测成本高低七个方面对BVDV进行了综合性比较分析。结果表明:试验建立的RT-LAMP方法与荧光定量RT-PCR、通用RTPCR方法相比具有特异性强、灵敏度高、样品检出率和扩增反应效率高、操作简便快速、低成本等特点。说明RT-LAMP方法对快速、灵敏诊断牛病毒性腹泻病、防止疫情的扩散具有重要意义。 

【文章来源】：黑龙江畜牧兽医. 2017,(19)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 毒株与病料
    1.2 主要仪器和试剂
    1.3 引物的设计和合成
2 方法
    2.1 病毒RNA提取和模板制备
    2.2 通用RT-PCR
    2.3 荧光定量RT-PCR反应条件的优化
    2.4 RT-LAMP反应条件的优化
    2.5 通用RT-PCR、荧光定量RT-PCR和RT-LAMP特异性比较试验
    2.6 通用RT-PCR、实时定量RT-PCR和RT-LAMP灵敏性比较试验
    2.7 通用RT-PCR、荧光定量RT-PCR和RT-LAMP样品检出率比较试验
    2.8 通用RT-PCR、荧光定量RT-PCR和RT-LAMP检测方法综合比较
3 结果与分析
    3.1 通用RT-PCR
    3.2 荧光定量RT-PCR反应条件的优化
    3.3 RT-LAMP反应条件的优化
    3.4 通用RT-PCR、荧光定量RT-PCR和RT-LAMP特异性比较试验
    3.5 通用RT-PCR、荧光定量RT-PCR和RT-LAMP灵敏性比较试验
    3.6 通用RT-PCR、荧光定量RT-PCR和RT-LAMP样品检出率比较试验
    3.7 通用RT-PCR、荧光定量RT-PCR和RT-LAMP检测方法综合比较
4 讨论
5 小结


【参考文献】：
期刊论文
[1]牛病毒性腹泻-黏膜病病毒分离鉴定及生物学特性研究[J]. 包振中,雷程红,蔡元庆,高窦,卞赛赛,葛婷.  中国畜牧兽医. 2015(09)
[2]牛病毒性腹泻病毒一步RT-LAMP快速检测方法的建立[J]. 袁万哲,王腾,王建昌,李丽敏,张秀媛,孙继国.  Agricultural Science & Technology. 2014(10)
[3]河北省奶牛牛病毒性腹泻/粘膜病病毒的分离鉴定[J]. 赵月兰,杨汉春,左玉柱,秦建华,刘占民,范京惠,张宁.  中国动物检疫. 2006(11)
[4]我国规模化肉牛场牛病毒性腹泻-粘膜病流行状况监测[J]. 邱昌庆,高双娣,周继章,程淑敏,李英才,陈桂华,杨学礼.  中国兽医科技. 1998(08)
[5]用琼脂扩散试验检测牛血清BVD／MD抗体[J]. 陈茂盛,寇改霞.  中国兽医杂志. 1994(01)
[6]牛睾丸原代细胞在牛病毒性腹泻/粘膜病中和试验上的应用[J]. 严爱莲,霍燕琼,吴时清.  动物检疫. 1988(01)



本文编号：3414206