兔脾脏成纤维型细胞RS-17的建系及RHDV SCH04株感染试验
发布时间：2021-09-30 05:19
兔病毒性出血症（Rabbit hemorrhagic disease,RHD）是由兔出血症病毒（Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV）引起的一种急性、高传染性和致死性兔病,该病主要以呼吸系统出血、实质器官淤血水肿、肝脏坏死、淤血及出血性变化为主要特征,严重危害着世界养兔业的发展。RHDV为单股正链RNA病毒,基因组全长约7.5kb。目前RHDV在体外尚无稳定分离培养的细胞系,严重影响着RHDV的细胞侵染机理和防控等方面的研究。为探索RHDV侵染机制,本研究通过酶消化法对乳兔脾脏原代细胞进行了分离培养与建系,并进行建系细胞的RHDV初步感染试验,具体内容如下:1、培养乳兔原代细胞的过程中,从脾脏组织中分离出一株成纤维型形态的细胞,命名为RS-17,通过对细胞传代培养条件优化、细胞标志性蛋白检测、细胞生长曲线、细胞核型以及细胞致瘤性等进行测定,以对细胞的生长特性以及生物学特性进行研究。结果显示RS-17细胞具有血清依懒性、成纤维细胞标志性蛋白检测阳性、具有正常的核型、无致瘤性,且目前细胞传至95代仍可稳定生长。这为RHDV感染机制相关研究提供了细胞材料...
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
脾脏原代细胞培养（100）
16E图 2-2 RS-17 细胞形态（100 ）A：20 代；B：30 代；C：50 代；D：80 代；E：95 代Fig.2-2 Micrograph of RS-17 （100 ）A: Passages 20; B: Passages 30; C: Passages 50; D: Passages 80; E: Passages 97 的冻存与复苏 细胞在经过逐渐降温法冻存于液氮后，第 3 天将其从液氮中取出过夜，细胞贴壁，生长状态良好，细胞呈长梭形，与未冻存细胞生铺满瓶底，且能稳定的继续传代培养。
懒性T 比色结果经统计学分析如图 2-3 所示，RS-17 细胞清的培养基中，细胞生长较缓慢，有血清培养基对细)，各血清含量的培养基对细胞的促进作用进行比较清培养基相比促进细胞增值作用无显著性的差异（ 3%相比有极显著促进作用（P 0.01），5%、15%、显著性差异（P 0.05），10%、15%、20%三者血清显著性差异（P 0.05）。根据各浓度血清的促生长作生长的最优血清浓度为 10%。
本文编号：3415206
【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
脾脏原代细胞培养（100）
16E图 2-2 RS-17 细胞形态（100 ）A：20 代；B：30 代；C：50 代；D：80 代；E：95 代Fig.2-2 Micrograph of RS-17 （100 ）A: Passages 20; B: Passages 30; C: Passages 50; D: Passages 80; E: Passages 97 的冻存与复苏 细胞在经过逐渐降温法冻存于液氮后，第 3 天将其从液氮中取出过夜，细胞贴壁，生长状态良好，细胞呈长梭形，与未冻存细胞生铺满瓶底，且能稳定的继续传代培养。
懒性T 比色结果经统计学分析如图 2-3 所示，RS-17 细胞清的培养基中，细胞生长较缓慢，有血清培养基对细)，各血清含量的培养基对细胞的促进作用进行比较清培养基相比促进细胞增值作用无显著性的差异（ 3%相比有极显著促进作用（P 0.01），5%、15%、显著性差异（P 0.05），10%、15%、20%三者血清显著性差异（P 0.05）。根据各浓度血清的促生长作生长的最优血清浓度为 10%。
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