牦牛EPF基因克隆及其在配种后血液中的含量分析

发布时间：2021-10-04 21:46

　　早孕因子（early pregnancy factor, EPF）是最早从妊娠期哺乳动物血清中分离中的一种生物活性蛋白,可通过调控妊娠诱导的免疫抑制反应阻止母体对胎儿的排斥作用。为了分析牦牛（Bos grunniens）EPF基因生物学特性及其在妊娠后血液中的变化规律,了解EPF与妊娠的相关性,本研究从牦牛卵巢组织中提取RNA并反转录为cDNA模板,RT-PCR扩增EPF基因并测序;利用生物信息学相关软件对牦牛EPF蛋白的理化性质以及结构预测分析。采集69头牦牛人工授精（artificial insemination, AI） 20～40 d后牦牛血液样品,运用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immuno sorbent assay, ELISA）测定EPF水平。本研究克隆获得了牦牛EPF基因完整的编码序列（coding sequence, CDS）区序列（GenBank No. MK992914）,其开放阅读框长度为207 bp,编码69个氨基酸残基的可溶性非跨膜蛋白。ELISA结果显示,牦牛配种后20～40 d血液中EPF含量与妊娠状态密切相关。妊娠组从20 d开始,血... 

【文章来源】：农业生物技术学报. 2020,28(06)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【部分图文】：

牦牛EPF基因与其他物种同源性比对

对32头妊娠牦牛直肠检查表明，孕侧卵巢上有突出黄体，长约为2.8～3.2 cm，宽约为2.5～3.0cm，厚约为2.0～2.5 cm，孕侧卵巢体积比空侧大；子宫颈变化：子宫颈较硬，直径约为2.5～3.7 cm，子宫体位置较深；子宫角变化：子宫角不对称，孕角较柔软，较粗，直径约为4.5～7.0 cm，位置较靠后。图4 蛋白的二级结构预测

蛋白的二级结构预测

【参考文献】：
期刊论文
[1]早孕因子及其临床应用研究进展[J]. 张诗萌,佟翠,李鹏,龙淼,李林,杨淑华,何剑斌.  黑龙江畜牧兽医. 2019(05)
[2]Artemin在牦牛主要生殖器官和孤雌激活胚胎中的表达及定位[J]. 王靖雷,王萌,潘阳阳,李秦,何翃闳,胡学权,韩小红,樊江峰,崔燕,余四九.  农业生物技术学报. 2019(03)
[3]妊娠期和分娩前后牦牛胎盘组织形态学变化及细胞凋亡的研究[J]. 韩小红,樊江峰,于艺腾,何翃闳,马悦,余四九,崔燕.  农业生物技术学报. 2018(10)
[4]FSH对牦牛卵母细胞EGF、EGFR表达及其细胞凋亡的影响[J]. 何翃闳,潘阳阳,张慧珠,李秦,王萌,崔燕,樊江峰,余四九.  畜牧兽医学报. 2018(09)
[5]孕牛血清早孕因子的研究进展[J]. 王晓姗.  中国牛业科学. 2018(03)
[6]孕牛血清中早孕因子的分离纯化与鉴定[J]. 王晓姗,陈树林,张文华,张宏刚.  中国牛业科学. 2018(02)
[7]Oct 4在牦牛卵母细胞及早期胚胎发育过程中的表达[J]. 赵天,李谷月,潘阳阳,李月琴,陈平,温泽星,崔燕,余四九.  畜牧兽医学报. 2017(03)
[8]奶牛早期妊娠诊断几种方法的比较[J]. 刘水喜.  畜禽业. 2016(12)
[9]奶牛的早期妊娠诊断研究进展[J]. 包凯,曹宇,刘光磊,安朋朋,孙先枝,黄健,李福全.  现代畜牧兽医. 2016(08)
[10]PAG ELISA早孕检测试剂盒对奶牛繁殖效率的影响[J]. 李艳艳,卜建华,雷静,脱征军,温万,梁小军.  黑龙江畜牧兽医. 2016(14)

硕士论文
[1]基于EPF检测的奶牛早期妊娠诊断方法的研究[D]. 孙培培.石河子大学 2017
[2]肉用母牛发情周期体内生殖激素变化规律与早期妊娠诊断技术的研究[D]. 王宏娟.吉林大学 2012
[3]肉牛早孕因子（EPF）的活性检测及分离纯化[D]. 贺加双.山东农业大学 2011



本文编号：3418389