鸡传染性支气管炎病毒弱毒株的筛选
发布时间：2021-10-05 02:21
鸡传染性支气管炎（Infectious Bronchitis,IB）是一种传染性极高的急性呼吸道疾病，它的病原是鸡传染性支气管炎病毒（Infectious Bronchitis Virus,IBV），临床主要症状为喘气、气管啰音、咳嗽、流鼻液。IB对不同日龄的鸡均易感，而目前生产中使用的疫苗因为不同血清型IBV的交叉保护差，常常达不到保护的作用，给家禽养殖带来严重的经济损失。本课题对某地区IBV流行毒株进行优势毒株的筛选，然后对其致弱，进而对致弱毒株的S1基因、N基因序列进行分析比较，对研制新型弱毒疫苗具有十分重要的现实意义。本研究首先挑选5个地方分离株（GY毒株、HQ毒株、DP毒株、FJW毒株、WT毒株）和H120疫苗株，选择气管环组织作为培养系统，对病毒效价TOC-ID50进行测定。计算结果，得出GY、HQ、DP、FJW、WT毒株的TOC-ID50分别为10-5.5/mL、10-6.54/mL、10-4.69/mL、10-5.33/mL、10...
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
IBV病毒粒子结构图
停止、上皮组织脱落、萎缩等[22]。近年有研究发现，用鸡气管黏膜上皮细胞来研究和增殖 IBV 可以大大缩短病毒适应时间并且可以获得较高的病毒滴度[23]。3 IBV 的基因组特点及功能蛋白3.1 IBV 基因组IBV 基因组为不分节段的单股正链 RNA，大小约为 27.4～27.7Kb，不同毒株的长度可能略有差别。病毒核酸本身具有侵染性，前 2/3 的基因组编码具有活性的复制酶（见图 1-2），余下基因组编码结构蛋白和一小组可读框（ORF）[24]。IBV 基因组可分为 6 个区域，有 10 个明显的 ORF，顺序为 5′-1a-1b-S-3a-3b-E-M-5a-5b-N-3′[25]。IBV 为套式病毒，这类病毒有一种独特的不连续转录方式，在感染细胞中可转录出一组嵌套的基因组和 6 种亚基因组 mRNA，所有 mRNA包括基因组 5′端都具有一个 64bp 的前导序列， 3′端具有相同的末端结构[26]。
图 2-1 正常气管环（10×） 图 2-2 病变后的气管环（10×）Fig.2-1 The normal tracheal ring Fig.2-2 The lesions of tracheal ring3.1.1 GY 分离株 TOC-ID50的测定表 2-2 GY 分离株 TOC-ID50的测定Table.2-2 The determination of GY isolate’s TOC-ID50病毒稀释倍数气管环观察结果 累计和病变比例 百分比病变 正常 病变 正常10-26 0 24 0 24/24 100.00%10-36 0 18 0 18/18 100.00%10-45 1 12 1 12/13 92.31%10-53 3 7 4 7/11 63.64%10-63 3 4 7 4/11 36.36%10-71 5 1 12 1/13 7.69%10-80 6 0 18 0/18 0.00%TOC-ID50=10-5.5/mL3.1.2 WT 分离株 TOC-ID50的测定表 2-3 WT 分离株 TOC-ID的测定
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡传染性支气管炎病毒广西分离毒株抗原相关性的研究[J]. 王秀英,李孟,韦平,陈秋英,韦正吉,磨美兰,韦天超. 病毒学报. 2012(06)
[2]63株IBV分离株M基因的遗传变异与系统进化分析[J]. 郑俏伟,龚军,刘大伟,何琴,王建华,郭露铰,徐成刚,廖明,任涛. 中国畜牧兽医. 2012(01)
[3]鸡传染性支气管炎病毒基因型与血清型相关性初步研究[J]. 汪洋,李俊平,杨承槐,李启红,黄建华,于静,夏业才. 中国预防兽医学报. 2011(11)
[4]广西不同时期IBV分离株S1基因高变区Ⅰ的遗传变异分析[J]. 韦正吉,韦平,磨美兰,李孟,韦天超,李康然. 病毒学报. 2008(02)
[5]传染性支气管炎病毒的分离及其S1基因高变区Ⅰ的遗传变异性分析[J]. 磨美兰,韦正吉,韦平,仇兴华,陈秋英,张胜斌,黄百花,韦天超. 中国兽医杂志. 2006(08)
[6]RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究[J]. 磨美兰,李康然,韦平. 中国预防兽医学报. 2001(04)
[7]传染性腺胃炎病毒ZJ971株的一些生物学特性[J]. 周继勇. 畜牧兽医学报. 2000(03)
[8]腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定[J]. 荣骏弓,康丽娟,谷守林,吴东来,尹训南,王云峰,江国托,褚桂芳. 中国预防兽医学报. 1999(02)
[9]鸡腺胃型传染性支气管炎病毒（QX IBV）的分离和鉴定[J]. 王玉东,王永玲,张子春,范根成,蒋贻海,刘相娥,丁江,王树双. 中国动物检疫. 1998(01)
[10]鸡腺胃型传染性支气管炎[J]. 王玉东,张子春,王永玲,范根成,蒋贻海,刘相娥,丁江. 山东家禽. 1997(05)
博士论文
[1]鸡气管黏膜上皮细胞共培养体系的建立及IBV致细胞病变作用的研究[D]. 孙裴.西北农林科技大学 2008
硕士论文
[1]鸡传染性支气管炎病毒的分离及N基因、S1基因的序列分析[D]. 何锡栋.福建农林大学 2012
[2]鸡传染性支气管炎病毒CK/CH/LHLJ/04V株鸡胚传代致弱及其免疫效力的初步评价[D]. 龚利洋.中国农业科学院 2007
[3]鸡传染性支气管炎病毒tl/CH/LDT3/03的鸡胚传代致弱及其免疫效力的初步评价[D]. 聂磊.东北农业大学 2007
本文编号：3418808
【文章来源】：福建农林大学福建省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
IBV病毒粒子结构图
停止、上皮组织脱落、萎缩等[22]。近年有研究发现，用鸡气管黏膜上皮细胞来研究和增殖 IBV 可以大大缩短病毒适应时间并且可以获得较高的病毒滴度[23]。3 IBV 的基因组特点及功能蛋白3.1 IBV 基因组IBV 基因组为不分节段的单股正链 RNA，大小约为 27.4～27.7Kb，不同毒株的长度可能略有差别。病毒核酸本身具有侵染性，前 2/3 的基因组编码具有活性的复制酶（见图 1-2），余下基因组编码结构蛋白和一小组可读框（ORF）[24]。IBV 基因组可分为 6 个区域，有 10 个明显的 ORF，顺序为 5′-1a-1b-S-3a-3b-E-M-5a-5b-N-3′[25]。IBV 为套式病毒，这类病毒有一种独特的不连续转录方式，在感染细胞中可转录出一组嵌套的基因组和 6 种亚基因组 mRNA，所有 mRNA包括基因组 5′端都具有一个 64bp 的前导序列， 3′端具有相同的末端结构[26]。
图 2-1 正常气管环（10×） 图 2-2 病变后的气管环（10×）Fig.2-1 The normal tracheal ring Fig.2-2 The lesions of tracheal ring3.1.1 GY 分离株 TOC-ID50的测定表 2-2 GY 分离株 TOC-ID50的测定Table.2-2 The determination of GY isolate’s TOC-ID50病毒稀释倍数气管环观察结果 累计和病变比例 百分比病变 正常 病变 正常10-26 0 24 0 24/24 100.00%10-36 0 18 0 18/18 100.00%10-45 1 12 1 12/13 92.31%10-53 3 7 4 7/11 63.64%10-63 3 4 7 4/11 36.36%10-71 5 1 12 1/13 7.69%10-80 6 0 18 0/18 0.00%TOC-ID50=10-5.5/mL3.1.2 WT 分离株 TOC-ID50的测定表 2-3 WT 分离株 TOC-ID的测定
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸡传染性支气管炎病毒广西分离毒株抗原相关性的研究[J]. 王秀英,李孟,韦平,陈秋英,韦正吉,磨美兰,韦天超. 病毒学报. 2012(06)
[2]63株IBV分离株M基因的遗传变异与系统进化分析[J]. 郑俏伟,龚军,刘大伟,何琴,王建华,郭露铰,徐成刚,廖明,任涛. 中国畜牧兽医. 2012(01)
[3]鸡传染性支气管炎病毒基因型与血清型相关性初步研究[J]. 汪洋,李俊平,杨承槐,李启红,黄建华,于静,夏业才. 中国预防兽医学报. 2011(11)
[4]广西不同时期IBV分离株S1基因高变区Ⅰ的遗传变异分析[J]. 韦正吉,韦平,磨美兰,李孟,韦天超,李康然. 病毒学报. 2008(02)
[5]传染性支气管炎病毒的分离及其S1基因高变区Ⅰ的遗传变异性分析[J]. 磨美兰,韦正吉,韦平,仇兴华,陈秋英,张胜斌,黄百花,韦天超. 中国兽医杂志. 2006(08)
[6]RT-PCR及RFLP分析技术对鸡传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因分型的研究[J]. 磨美兰,李康然,韦平. 中国预防兽医学报. 2001(04)
[7]传染性腺胃炎病毒ZJ971株的一些生物学特性[J]. 周继勇. 畜牧兽医学报. 2000(03)
[8]腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定[J]. 荣骏弓,康丽娟,谷守林,吴东来,尹训南,王云峰,江国托,褚桂芳. 中国预防兽医学报. 1999(02)
[9]鸡腺胃型传染性支气管炎病毒（QX IBV）的分离和鉴定[J]. 王玉东,王永玲,张子春,范根成,蒋贻海,刘相娥,丁江,王树双. 中国动物检疫. 1998(01)
[10]鸡腺胃型传染性支气管炎[J]. 王玉东,张子春,王永玲,范根成,蒋贻海,刘相娥,丁江. 山东家禽. 1997(05)
博士论文
[1]鸡气管黏膜上皮细胞共培养体系的建立及IBV致细胞病变作用的研究[D]. 孙裴.西北农林科技大学 2008
硕士论文
[1]鸡传染性支气管炎病毒的分离及N基因、S1基因的序列分析[D]. 何锡栋.福建农林大学 2012
[2]鸡传染性支气管炎病毒CK/CH/LHLJ/04V株鸡胚传代致弱及其免疫效力的初步评价[D]. 龚利洋.中国农业科学院 2007
[3]鸡传染性支气管炎病毒tl/CH/LDT3/03的鸡胚传代致弱及其免疫效力的初步评价[D]. 聂磊.东北农业大学 2007
本文编号：3418808
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