CLC对GV期冻融的猪卵母细胞质量及精卵结合的影响
发布时间：2021-10-05 02:29
卵母细胞冷冻保存是一种具有潜在价值的技术,也是辅助生殖领域最具发展的研究之一。猪卵母细胞的冷冻保存及体外培养对于胚胎干细胞研究有很大的医学价值,但目前对于冻融后猪卵母细胞的体外培养和胚胎生产仍然落后,可能是由于在冻存过程中低温对卵母细胞造成的冷冻损伤,影响卵母细胞的质量。本试验主要目的是探究在玻璃化冷冻液中添加冷冻保护剂CLC（甲基-β-环糊精）是否对冻融后的猪GV期卵母细胞成熟率,透明带硬化时间、凋亡蛋白表达量及精卵结合产生影响。将冻融后的GV期卵母细胞通过体外成熟培养、透明带热溶解、蛋白免疫印迹（WB）等试验检测猪卵母细胞质量。新鲜猪精液的常规检测是作为辅助检测精卵结合的重要过程。设置添加浓度为0 mg/ml CLC的空白对照组,和添加浓度为0.5mg/ml、5mg/ml、1 mg/ml CLC的处理组,冷冻保存两周后的GV期卵母细胞进行体外成熟培养,结果显示:1.添加浓度为5mg/ml CLC时卵母细胞成熟率最高（74.67±4.67%）,显著高于对照组（P<0.05）。添加浓度为5mg/ml CLC时透明带硬化时间最短,显著低于对照组（P<0.05）。2.添加浓度为...
【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１．不同浓度ＣＬＣ对ＧＶ期冻融后的猪卵母细胞体外成熟影响
中添加浓度为５?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ处理组的卵母细胞成熟率显著高于对照组和０．５??ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ?处理组（Ｐ＜０．０５）。??图３－１．不同浓度ＣＬＣ对ＧＶ期冻融后的猪卵母细胞体外成熟影响。??Ａ．Ｏ?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ?（对照组）：０．５?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ?处理组；５?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ?处理组：丨０?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ??处理组??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１．?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＬＣ?ｏｎ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ??ｏｏｃｙｔｅｓ?ａｆｔｅｒ?ＧＶ?ｆｒｅｅｚｉｎｇ?ａｎｄ?ｔｈａｗｉｎｇ??表３－１．不同浓度ＣＬＣ对ＧＶ期冻融后的猪卵母细胞体外成熟影响??Ｔａｂｌｅ?３－１．?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＬＣ?ｏｎ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ?ｏｏｃｙｔｅｓ??ａｆｔｅｒ?ＧＶ?ｆｒｅｅｚｉｎｇ?ａｎｄ?ｔｈａｗｉｎｇ??浓度（ｉｎｇ／ｍＬ）?卵母细胞数?成熟卵母细胞细胞数?卵母细胞成熟率（％）??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?Ｏｏｃｙｔｅｓ?（ｎ）?Ｍａｔｕｒｅ?ｏｏｃｙｔｅ?ｃｅｌｌ?ｎｕｍｂｅｒ?Ｏｏｃｙｔｅ?ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ?ｒａｔｅ??０?３００?１９６?６５．３３?±２．００ｈ??０．５?３００?２０２?６７．３３?±２．６７ｈ??５?３００?２２４?７４．６７?±４．６７ａ??１０?３００?２１５?７１．６７±５．０（）ａｂ??注：同列数据进行比较
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【参考文献】：
期刊论文
[1]程序性坏死与肿瘤研究进展[J]. 王贝,黄娜,魏明莉,张春露. 生命的化学. 2019(01)
[2]玻璃化冷冻保存技术对体外成熟卵母细胞发育潜能和转录组的影响[J]. 霍莹,覃清圆,卢翠玲,宋雪凌,郑晓英,于洋,闫丽盈,廉颖,刘平,李蓉,严杰,乔杰. 中华生殖与避孕杂志. 2018(10)
[3]Caspase家族与细胞凋亡的研究进展[J]. 杨涛,费振海,钟兴明. 浙江医学. 2018(18)
[4]介导细胞焦亡的杀手蛋白——Gasdermin D[J]. 李楚翎,邵晨烨,刘红兵,宋勇. 医学研究生学报. 2018(04)
本文编号：3418817
【文章来源】：延边大学吉林省 211工程院校
【文章页数】：45 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－１．不同浓度ＣＬＣ对ＧＶ期冻融后的猪卵母细胞体外成熟影响
中添加浓度为５?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ处理组的卵母细胞成熟率显著高于对照组和０．５??ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ?处理组（Ｐ＜０．０５）。??图３－１．不同浓度ＣＬＣ对ＧＶ期冻融后的猪卵母细胞体外成熟影响。??Ａ．Ｏ?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ?（对照组）：０．５?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ?处理组；５?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ?处理组：丨０?ｍｇ／ｍＬ?ＣＬＣ??处理组??Ｆｉｇｕｒｅ?３－１．?Ｔｈｅ?ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＬＣ?ｏｎ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ??ｏｏｃｙｔｅｓ?ａｆｔｅｒ?ＧＶ?ｆｒｅｅｚｉｎｇ?ａｎｄ?ｔｈａｗｉｎｇ??表３－１．不同浓度ＣＬＣ对ＧＶ期冻融后的猪卵母细胞体外成熟影响??Ｔａｂｌｅ?３－１．?Ｅｆｆｅｃｔｓ?ｏｆ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ?ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ?ｏｆ?ＣＬＣ?ｏｎ?ｉｎ?ｖｉｔｒｏ?ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｐｏｒｃｉｎｅ?ｏｏｃｙｔｅｓ??ａｆｔｅｒ?ＧＶ?ｆｒｅｅｚｉｎｇ?ａｎｄ?ｔｈａｗｉｎｇ??浓度（ｉｎｇ／ｍＬ）?卵母细胞数?成熟卵母细胞细胞数?卵母细胞成熟率（％）??Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?Ｏｏｃｙｔｅｓ?（ｎ）?Ｍａｔｕｒｅ?ｏｏｃｙｔｅ?ｃｅｌｌ?ｎｕｍｂｅｒ?Ｏｏｃｙｔｅ?ｍａｔｕｒａｔｉｏｎ?ｒａｔｅ??０?３００?１９６?６５．３３?±２．００ｈ??０．５?３００?２０２?６７．３３?±２．６７ｈ??５?３００?２２４?７４．６７?±４．６７ａ??１０?３００?２１５?７１．６７±５．０（）ａｂ??注：同列数据进行比较
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【参考文献】：
期刊论文
[1]程序性坏死与肿瘤研究进展[J]. 王贝,黄娜,魏明莉,张春露. 生命的化学. 2019(01)
[2]玻璃化冷冻保存技术对体外成熟卵母细胞发育潜能和转录组的影响[J]. 霍莹,覃清圆,卢翠玲,宋雪凌,郑晓英,于洋,闫丽盈,廉颖,刘平,李蓉,严杰,乔杰. 中华生殖与避孕杂志. 2018(10)
[3]Caspase家族与细胞凋亡的研究进展[J]. 杨涛,费振海,钟兴明. 浙江医学. 2018(18)
[4]介导细胞焦亡的杀手蛋白——Gasdermin D[J]. 李楚翎,邵晨烨,刘红兵,宋勇. 医学研究生学报. 2018(04)
本文编号：3418817
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