SPOP通过降解MyD88负反馈调节先天免疫的分子机制
发布时间：2021-10-07 09:46
TLR是宿主识别细菌、病毒和真菌并激发机体免疫反应的主要模式识别受体。大多数TLR识别病原后,其信号传导均需接头蛋白MyD88的参与。MyD88蛋白水平的稳态决定着病原感染时细胞产生免疫反应的能力。泛素化介导的降解是机体调控蛋白水平的重要方式。SPOP是Rbx1-Cul3-SPOP泛素连接酶复合物中的适配蛋白,决定着该复合物的底物特异性。SPOP在肌肉发育、细胞周期调控、癌症发生等方面有重要的调控作用,目前SPOP对先天免疫是否有影响尚未见报道。本研究旨在解析SPOP调控MyD88蛋白稳态和机体抗感染能力的分子机制,为动物抗病育种提供理论依据,主要结论如下:1.SPOP和MyD88存在蛋白间的相互作用。利用免疫共沉淀和western blot证实鸡成纤维细胞（DF1）中二者外源表达和内源表达后均存在互作,其中SPOP的MATH结构域和MyD88的INT结构域介导二者的互作;免疫荧光显示二者在细胞中存在共定位。此外,这种互作在人宫颈癌细胞（Hela）和中国仓鼠卵巢细胞（CHO）中均能检测到,说明二者互作在不同物种间具有保守性。2.SPOP通过泛素-蛋白酶体通路调控MyD88的降解。DF1...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：97 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
中性粒细胞/异噬性粒细胞杀灭病原微生物的机制（KOLACZKOWSKAandKUBES,2013）
中国农业科学院博士学位论文第一章绪论6图1-2脊椎动物先天免疫系统的示意图（RIERAROMOetal.,2016）Fig.1-2Schematicillustrationofvertebrateinnateimmunity注：病原入侵机体后，生理状态下先天免疫中的物理屏障、免疫分子和免疫细胞协同作用，清除病原菌。1.2模式识别受体种类及其识别配体为了快速对病原菌的感染做出反应，病原菌的识别是先天免疫应答的前提，这主要依赖固有免疫系统识别病原的特殊分子——模式识别受体（Patternrecognitionreceptors，PRRs）。PRRs能够识别病原微生物中一些保守且必需的特殊结构——病原相关分子模式（Pathogenassociatedmolecularpatterns，PAMPs）（JANEWAYandMEDZHITOV,2002;TAKEUCHIandAKIRA,2010），如糖脂、脂蛋白和核酸，从而诱导细胞表达炎症因子、I型干扰素、抗菌物质以及调节PRRs信号通路的蛋白，启动宿主免疫应答。PRRs具有以下特点：由胚系基因编码，广泛表达于所有细胞，不具有免疫记忆；不同的PRRs识别不同的PAMPs，从而激活不同的信号通路，引发特异性的抗病原反应；在宿主中组成性地表达，与宿主的生命周期无关（AKIRAetal.,2006）。机体中PRRs主要有4类，包括Toll样受体、NOD样受体、RIG样受体和C型凝集素受体，其中TLRs和CLRs是跨膜蛋白，其余两种是胞质蛋白（TAKEUCHIandAKIRA,2010）。这些受体互相影响，选择性地激活不同的信号通路，诱导特异性的免疫应答（IPetal.,2009;NEWTONandDIXIT,2012）。
中国农业科学院博士学位论文第一章绪论8图1-3RLRs识别RNA病毒的信号通路图（TAKEUCHIandAKIRA,2010）Fig.1-3SignalpathwayofRLRsaftertherecognitionofRNAViruses1.2.2NOD样受体（NOD-likereceptor,NLRs）该家族蛋白是一类位于胞质中的PRRs，主要参与细菌的识别。该类蛋白主要由N端的蛋白互作结构域如CARD结构域和热蛋白结构域、中间核苷酸绑定结构域（centralnucleotide-bindingdomain，NOD）和C端富含亮氨酸重复单元结构域组成（C-terminalleucine-richrepeatsdomain，LRR）（INOHARAetal.,2005）。根据N端结构域的类别，该家族可分为5个亚科单元：NLRA、NLRB、NLRC、NLRP和NLRX，目前已经发现人类NLRs基因有23个，鼠科动物34个，但大多数的NLR功能尚不明确（TINGetal.,2008）。当C端LRR结构域与相应配体结合后，引起NOD结构域构象改变和蛋白低聚化，暴露出N端蛋白结合结构域，招募含有同型结构域的效应分子，从而激活各种信号通路。该家族中研究较多的是NOD1和NOD2，二者主要识别细菌中的肽聚糖。NOD1和NOD2与相应配体结合后，CARD招募含有该结构域的蛋白RIP2，通过降解NF-κB抑制剂，使NF-κB与其抑制剂解离，激活NF-κB信号通路，促进炎症因子的表达（KUFERetal.,2005）。此外，二者还能招募自噬相关蛋白参与自噬作用（TRAVASSOSetal.,2010）。除了参与抗菌感染外，最近研究发现NOD2还参与三磷酸RNA诱导的I型干扰素产生和宿主抗呼吸道合胞病毒的感染（SABBAHetal.,2009）。NOD1参与沙门氏菌感染后机体的免疫应答：沙门氏菌刺激后，小鼠中
本文编号：3421813
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：97 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
中性粒细胞/异噬性粒细胞杀灭病原微生物的机制（KOLACZKOWSKAandKUBES,2013）
中国农业科学院博士学位论文第一章绪论6图1-2脊椎动物先天免疫系统的示意图（RIERAROMOetal.,2016）Fig.1-2Schematicillustrationofvertebrateinnateimmunity注：病原入侵机体后，生理状态下先天免疫中的物理屏障、免疫分子和免疫细胞协同作用，清除病原菌。1.2模式识别受体种类及其识别配体为了快速对病原菌的感染做出反应，病原菌的识别是先天免疫应答的前提，这主要依赖固有免疫系统识别病原的特殊分子——模式识别受体（Patternrecognitionreceptors，PRRs）。PRRs能够识别病原微生物中一些保守且必需的特殊结构——病原相关分子模式（Pathogenassociatedmolecularpatterns，PAMPs）（JANEWAYandMEDZHITOV,2002;TAKEUCHIandAKIRA,2010），如糖脂、脂蛋白和核酸，从而诱导细胞表达炎症因子、I型干扰素、抗菌物质以及调节PRRs信号通路的蛋白，启动宿主免疫应答。PRRs具有以下特点：由胚系基因编码，广泛表达于所有细胞，不具有免疫记忆；不同的PRRs识别不同的PAMPs，从而激活不同的信号通路，引发特异性的抗病原反应；在宿主中组成性地表达，与宿主的生命周期无关（AKIRAetal.,2006）。机体中PRRs主要有4类，包括Toll样受体、NOD样受体、RIG样受体和C型凝集素受体，其中TLRs和CLRs是跨膜蛋白，其余两种是胞质蛋白（TAKEUCHIandAKIRA,2010）。这些受体互相影响，选择性地激活不同的信号通路，诱导特异性的免疫应答（IPetal.,2009;NEWTONandDIXIT,2012）。
中国农业科学院博士学位论文第一章绪论8图1-3RLRs识别RNA病毒的信号通路图（TAKEUCHIandAKIRA,2010）Fig.1-3SignalpathwayofRLRsaftertherecognitionofRNAViruses1.2.2NOD样受体（NOD-likereceptor,NLRs）该家族蛋白是一类位于胞质中的PRRs，主要参与细菌的识别。该类蛋白主要由N端的蛋白互作结构域如CARD结构域和热蛋白结构域、中间核苷酸绑定结构域（centralnucleotide-bindingdomain，NOD）和C端富含亮氨酸重复单元结构域组成（C-terminalleucine-richrepeatsdomain，LRR）（INOHARAetal.,2005）。根据N端结构域的类别，该家族可分为5个亚科单元：NLRA、NLRB、NLRC、NLRP和NLRX，目前已经发现人类NLRs基因有23个，鼠科动物34个，但大多数的NLR功能尚不明确（TINGetal.,2008）。当C端LRR结构域与相应配体结合后，引起NOD结构域构象改变和蛋白低聚化，暴露出N端蛋白结合结构域，招募含有同型结构域的效应分子，从而激活各种信号通路。该家族中研究较多的是NOD1和NOD2，二者主要识别细菌中的肽聚糖。NOD1和NOD2与相应配体结合后，CARD招募含有该结构域的蛋白RIP2，通过降解NF-κB抑制剂，使NF-κB与其抑制剂解离，激活NF-κB信号通路，促进炎症因子的表达（KUFERetal.,2005）。此外，二者还能招募自噬相关蛋白参与自噬作用（TRAVASSOSetal.,2010）。除了参与抗菌感染外，最近研究发现NOD2还参与三磷酸RNA诱导的I型干扰素产生和宿主抗呼吸道合胞病毒的感染（SABBAHetal.,2009）。NOD1参与沙门氏菌感染后机体的免疫应答：沙门氏菌刺激后，小鼠中
本文编号：3421813
本文链接：https://www.wllwen.com/yixuelunwen/dongwuyixue/3421813.html
