3株芽孢杆菌益生特性的初步研究与鉴定
发布时间：2021-10-11 23:14
近年来,抗生素被普遍应用于养殖业中,用以治疗动物肠道致病菌的感染。但抗生素的长期过度使用常导致致病菌出现耐药性,这些耐药细菌会在动物之间传播并进入环境[1],造成环境污染并可通过食物链传播给人类,对人类的食品安全和健康构成一定的威胁。现在,越来越多的养殖人员和科研人员已经意识到抗生素的滥用带来的隐患,我国也进入了后抗生素时代,人们对安全有效抗菌制剂的需求也越来越强烈。益生菌制剂由于其有效、环保、绿色和健康的特点,有潜力成为代替抗生素的首选。本研究首先将实验室保存的植物源混合菌种通过分离纯化选出11株芽孢杆菌,再进行耐酸试验、耐胆盐试验、抗生素敏感试验和产酶定性试验,筛选出生物学特性优良的菌株,从生理生化特征和16S rDNA分子鉴定两方面进行菌种鉴定;最后进行果蝇体内抗氧化试验。主要结果如下:（1）菌种鉴定结果显示,513-A为短小芽孢杆菌,513-O为Bacillus gobiensis,513-N为枯草芽孢杆菌。三菌株均无耐药性,513-N对常见致病菌具有良好的抑菌能力。513-A、513-O和513-N菌株经pH值为2.0的HCl处理1 h存活率分别为70....
【文章来源】：山西大学山西省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 益生菌的研究概述
1.1.1 益生菌的定义
1.1.2 益生菌的生物特性
1.2 益生菌的种类
1.3 益生菌的应用
1.3.1 益生菌在养禽业中的应用
1.3.2 益生菌在畜牧业中的应用
1.3.3 益生菌在水产业中的应用
1.4 本实验研究目的及意义
第二章 芽孢杆菌的分离纯化
2.1 试验材料和试剂
2.1.1 试验材料
2.1.2 试验试剂和仪器
2.1.3 培养基的配制
2.2 试验方法
2.2.1 收集菌体
2.2.2 收集芽孢
2.2.3 芽孢复苏
2.2.4 菌种纯化和保存
2.2.5 菌落形态观察
2.2.6 革兰氏染色和显微镜观察
2.3 试验结果
2.3.1 菌种纯化结果
2.3.2 显微镜观察结果
2.4 讨论
第三章 芽孢杆菌生物学特性的研究
3.1 试验材料和试剂
3.1.1 试验材料
3.1.2 试验试剂和仪器
3.1.3 培养基的配制
3.2 试验方法
3.2.1 芽孢杆菌生长曲线的绘制
3.2.2 芽孢杆菌的耐酸性试验
3.2.3 芽孢杆菌的耐胆盐试验
3.2.4 芽孢杆菌的体外抑菌试验
3.2.5 芽孢杆菌的药敏试验
3.2.6 芽孢杆菌纤维素酶活力测定
3.2.7 芽孢杆菌蛋白酶活力测定
3.2.8 芽孢杆菌淀粉酶活力测定
3.3 试验结果
3.3.1 芽孢杆菌生长曲线
3.3.2 芽孢杆菌的耐酸性试验结果
3.3.3 芽孢杆菌的耐胆盐试验结果
3.3.4 芽孢杆菌的体外抑菌试验结果
3.3.5 芽孢杆菌的药敏性试验结果
3.3.6 芽孢杆菌纤维素酶活力试验结果
3.3.7 芽孢杆菌蛋白酶活力试验结果
3.3.8 芽孢杆菌淀粉酶活力试验结果
3.4 讨论
第四章 芽孢杆菌的分子鉴定
4.1 试验材料和试剂
4.1.1 试验材料
4.1.2 基础培养基
4.1.3 鉴定培养基
4.1.4 试验试剂及仪器
4.2 试验方法
4.2.1 生理生化特征鉴定
4.2.2 16 SrDNA分子生物学鉴定
4.3 试验结果
4.3.1 菌株生理生化特征鉴定
4.3.2 分子生物学鉴定
4.4 讨论
第五章 芽孢杆菌的果蝇体内抗氧化试验
5.1 试验材料和试剂
5.1.1 试验材料
5.1.2 果蝇基础培养基的配制
5.1.3 含芽孢杆菌果蝇培养基的配制
5.1.4 试验试剂和仪器
5.2 试验方法
5.2.1 牛血清蛋白标准曲线的绘制
5.2.2 果蝇的繁殖
5.2.3 果蝇抗氧化酶活力测定
5.3 试验结果
5.3.1 牛血清蛋白标准曲线的绘制
5.3.2 芽孢杆菌对雌果蝇体内抗氧化活性的影响
5.3.3 芽孢杆菌对雄性果蝇体内抗氧化活性的影响
5.4 讨论
参考文献
附录
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简介及联系方式
【参考文献】：
期刊论文
[1]枯草芽孢杆菌与锰协同对5～11周龄五龙鹅血清生化指标、抗氧化能力及胫骨发育的影响[J]. 葛文华,刁翠萍,任民,王宝维,张名爱,岳斌,郑惠文,张洋洋. 动物营养学报. 2017(08)
[2]猪沙门氏菌病的流行特点、临床症状及防治措施[J]. 赵英久,史娜. 现代畜牧科技. 2016(10)
[3]益生菌在畜禽生产中的作用及其研究进展[J]. 杨亚晋,张颖,李健坤,韩智杰,王奎. 科技视界. 2016(23)
[4]芽孢杆菌在畜禽生产上的应用[J]. 姜芬. 中国动物保健. 2016(04)
[5]益生菌对肉仔鸡生产性能、胴体性状、免疫功能和肉品质的影响[J]. 李可,罗建杰,孟昆,姚斌,刘国华,郑爱娟. 动物营养学报. 2015(09)
[6]动物免疫微生态制剂的研究进展[J]. 崔志伟. 中国畜禽种业. 2014(07)
[7]复合益生菌制剂对肉鸡生长性能、屠宰性能和肌肉品质的影响[J]. 黄金华,李泰佑,王士长,梁珠民. 畜牧与饲料科学. 2014(05)
[8]饲料中添加枯草芽孢杆菌对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、免疫力和抗氧化功能的影响[J]. 程远,黄凯,黄秀芸,钟灵香,武林华,黄清,唐丽宁. 动物营养学报. 2014(06)
[9]地衣芽孢杆菌对肉鸡生产性能、抗氧化及营养物质代谢的影响研究[J]. 杨家军,钱坤,章薇,许月英,陈胜,唐焰. 中国兽医学报. 2014(05)
[10]饲用鸡源芽孢杆菌的鉴定及环境耐受性研究[J]. 杨家军,许月英,章薇,陈胜. 中国家禽. 2014(06)
博士论文
[1]益生菌制剂研制及在肉鸡养殖中的应用效果评价[D]. 张曼.甘肃农业大学 2017
硕士论文
[1]两株鹿源芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究[D]. 张彤.沈阳农业大学 2017
[2]不同益生菌培养物对断奶仔猪生长性能、免疫功能及盲肠微生物区系的影响[D]. 杜泓明.吉林农业大学 2017
[3]三甲基氯化锡（TMT）对大鼠神经行为及氧化应激的影响[D]. 范攀.华中科技大学 2013
[4]17株芽孢杆菌产酶特性及益生特性的研究[D]. 陶荣霞.华中农业大学 2012
[5]复合芽孢杆菌制剂发酵工艺及其耐受性研究[D]. 张媛媛.东北林业大学 2012
[6]益生芽孢杆菌的筛选、鉴定及发酵条件优化的研究[D]. 曹晓敏.福建师范大学 2009
[7]一株益生芽孢杆菌的筛选及其肠道菌群调节作用研究[D]. 陈海华.第三军医大学 2005
本文编号：3431426
【文章来源】：山西大学山西省
【文章页数】：78 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文献综述
1.1 益生菌的研究概述
1.1.1 益生菌的定义
1.1.2 益生菌的生物特性
1.2 益生菌的种类
1.3 益生菌的应用
1.3.1 益生菌在养禽业中的应用
1.3.2 益生菌在畜牧业中的应用
1.3.3 益生菌在水产业中的应用
1.4 本实验研究目的及意义
第二章 芽孢杆菌的分离纯化
2.1 试验材料和试剂
2.1.1 试验材料
2.1.2 试验试剂和仪器
2.1.3 培养基的配制
2.2 试验方法
2.2.1 收集菌体
2.2.2 收集芽孢
2.2.3 芽孢复苏
2.2.4 菌种纯化和保存
2.2.5 菌落形态观察
2.2.6 革兰氏染色和显微镜观察
2.3 试验结果
2.3.1 菌种纯化结果
2.3.2 显微镜观察结果
2.4 讨论
第三章 芽孢杆菌生物学特性的研究
3.1 试验材料和试剂
3.1.1 试验材料
3.1.2 试验试剂和仪器
3.1.3 培养基的配制
3.2 试验方法
3.2.1 芽孢杆菌生长曲线的绘制
3.2.2 芽孢杆菌的耐酸性试验
3.2.3 芽孢杆菌的耐胆盐试验
3.2.4 芽孢杆菌的体外抑菌试验
3.2.5 芽孢杆菌的药敏试验
3.2.6 芽孢杆菌纤维素酶活力测定
3.2.7 芽孢杆菌蛋白酶活力测定
3.2.8 芽孢杆菌淀粉酶活力测定
3.3 试验结果
3.3.1 芽孢杆菌生长曲线
3.3.2 芽孢杆菌的耐酸性试验结果
3.3.3 芽孢杆菌的耐胆盐试验结果
3.3.4 芽孢杆菌的体外抑菌试验结果
3.3.5 芽孢杆菌的药敏性试验结果
3.3.6 芽孢杆菌纤维素酶活力试验结果
3.3.7 芽孢杆菌蛋白酶活力试验结果
3.3.8 芽孢杆菌淀粉酶活力试验结果
3.4 讨论
第四章 芽孢杆菌的分子鉴定
4.1 试验材料和试剂
4.1.1 试验材料
4.1.2 基础培养基
4.1.3 鉴定培养基
4.1.4 试验试剂及仪器
4.2 试验方法
4.2.1 生理生化特征鉴定
4.2.2 16 SrDNA分子生物学鉴定
4.3 试验结果
4.3.1 菌株生理生化特征鉴定
4.3.2 分子生物学鉴定
4.4 讨论
第五章 芽孢杆菌的果蝇体内抗氧化试验
5.1 试验材料和试剂
5.1.1 试验材料
5.1.2 果蝇基础培养基的配制
5.1.3 含芽孢杆菌果蝇培养基的配制
5.1.4 试验试剂和仪器
5.2 试验方法
5.2.1 牛血清蛋白标准曲线的绘制
5.2.2 果蝇的繁殖
5.2.3 果蝇抗氧化酶活力测定
5.3 试验结果
5.3.1 牛血清蛋白标准曲线的绘制
5.3.2 芽孢杆菌对雌果蝇体内抗氧化活性的影响
5.3.3 芽孢杆菌对雄性果蝇体内抗氧化活性的影响
5.4 讨论
参考文献
附录
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简介及联系方式
【参考文献】：
期刊论文
[1]枯草芽孢杆菌与锰协同对5～11周龄五龙鹅血清生化指标、抗氧化能力及胫骨发育的影响[J]. 葛文华,刁翠萍,任民,王宝维,张名爱,岳斌,郑惠文,张洋洋. 动物营养学报. 2017(08)
[2]猪沙门氏菌病的流行特点、临床症状及防治措施[J]. 赵英久,史娜. 现代畜牧科技. 2016(10)
[3]益生菌在畜禽生产中的作用及其研究进展[J]. 杨亚晋,张颖,李健坤,韩智杰,王奎. 科技视界. 2016(23)
[4]芽孢杆菌在畜禽生产上的应用[J]. 姜芬. 中国动物保健. 2016(04)
[5]益生菌对肉仔鸡生产性能、胴体性状、免疫功能和肉品质的影响[J]. 李可,罗建杰,孟昆,姚斌,刘国华,郑爱娟. 动物营养学报. 2015(09)
[6]动物免疫微生态制剂的研究进展[J]. 崔志伟. 中国畜禽种业. 2014(07)
[7]复合益生菌制剂对肉鸡生长性能、屠宰性能和肌肉品质的影响[J]. 黄金华,李泰佑,王士长,梁珠民. 畜牧与饲料科学. 2014(05)
[8]饲料中添加枯草芽孢杆菌对吉富罗非鱼幼鱼生长性能、免疫力和抗氧化功能的影响[J]. 程远,黄凯,黄秀芸,钟灵香,武林华,黄清,唐丽宁. 动物营养学报. 2014(06)
[9]地衣芽孢杆菌对肉鸡生产性能、抗氧化及营养物质代谢的影响研究[J]. 杨家军,钱坤,章薇,许月英,陈胜,唐焰. 中国兽医学报. 2014(05)
[10]饲用鸡源芽孢杆菌的鉴定及环境耐受性研究[J]. 杨家军,许月英,章薇,陈胜. 中国家禽. 2014(06)
博士论文
[1]益生菌制剂研制及在肉鸡养殖中的应用效果评价[D]. 张曼.甘肃农业大学 2017
硕士论文
[1]两株鹿源芽孢杆菌的分离鉴定及生物学特性研究[D]. 张彤.沈阳农业大学 2017
[2]不同益生菌培养物对断奶仔猪生长性能、免疫功能及盲肠微生物区系的影响[D]. 杜泓明.吉林农业大学 2017
[3]三甲基氯化锡（TMT）对大鼠神经行为及氧化应激的影响[D]. 范攀.华中科技大学 2013
[4]17株芽孢杆菌产酶特性及益生特性的研究[D]. 陶荣霞.华中农业大学 2012
[5]复合芽孢杆菌制剂发酵工艺及其耐受性研究[D]. 张媛媛.东北林业大学 2012
[6]益生芽孢杆菌的筛选、鉴定及发酵条件优化的研究[D]. 曹晓敏.福建师范大学 2009
[7]一株益生芽孢杆菌的筛选及其肠道菌群调节作用研究[D]. 陈海华.第三军医大学 2005
本文编号：3431426
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