上转发光免疫层析试纸条快速检测猪旋毛虫方法建立
发布时间：2021-10-14 17:04
旋毛虫病是由旋毛虫引起的人兽共患疾病,呈世界性分布。猪是旋毛虫主要宿主之一,生食或半生食感染旋毛虫的猪肉及其产品是人类感染旋毛虫的主要方式,旋毛虫病严重威胁人类健康和公共安全。目前旋毛虫检测方法无法满足现场快速检测旋毛虫病的要求。因此,开发适用于现场的高效、灵敏的旋毛虫检测方法,能有效地缩短旋毛虫的检验时间,并为旋毛虫病的诊断和检测提供强有力的技术支持。本研究基于上转发光免疫层析（up-converting phosphor technology-based lateral flow assay,UPT-LF）技术快速检测猪旋毛虫。通过抗原和检测模式筛选、层析条件优化,确定间接法制备试纸条。将山羊抗猪IgG与示踪物上转发光颗粒（up-converting phosphor particle,UCP）共价偶联,以旋毛虫肌幼虫丝氨酸蛋白酶抑制因子基因（WM5）表达的蛋白WM5（2 mg/mL）与兔抗山羊IgG（0.5 mg/mL）喷点于分析膜上作为检测带（T）与质控带（C）,并命名该试纸条为Tsp-UPT-LF。通过进一步优化确定Tsp-UPT-LF最佳血清稀释倍数（5倍）、最优样品处理液...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
上转发光过程
第一篇 文献综述成[94]，各组成部分（图 2.2）：（1）样品垫：被检样本滴加的部位；（：含有 UCP-抗原或抗体结合物的部位；（3）分析膜：层析试纸的核心和抗体分别固定于其上的某一位置作为检测带（T 带）与质控带（C 带）垫：通过虹吸作用，为整个检测过程提供动力，使样品流过整个试纸条底衬：各部分的载体。
1.1 三种蛋白的 SDS-PAGE 鉴；1.纯化后的 Zh68；2.纯化后的 WMig.1.1 SDS-PAGE of three prote Marker; 1. Purified Zh68; 2. Purified W、WM5 蛋白 Western blot 鉴定鉴定 ES 抗原、Zh68 和 WM5 均）识别，具有很好的抗原原性（纸条的备选抗原。
【参考文献】：
期刊论文
[1]全球人体旋毛虫病的暴发情况分析[J]. 翟铖铖,陈家旭,陈韶红,吴秀萍. 中国人兽共患病学报. 2017(11)
[2]旋毛虫病诊断方法研究综述[J]. 翟铖铖,陈家旭,陈韶红,吴秀萍. 中国动物检疫. 2017(06)
[3]旋毛虫LAMP检测方法的建立与应用[J]. 黄芸,徐立新,宋小凯,李祥瑞,严若峰. 中国兽医科学. 2017(04)
[4]猪旋毛虫病的检疫检验和防控[J]. 陈碧霞. 农技服务. 2017(01)
[5]蓖麻毒素单抗制备及上转发光免疫层析定量检测方法研究[J]. 王晓晨,周蕾,孙崇云,赵勇,王鑫蕊,张平平,杨瑞馥,马馨. 军事医学. 2016(08)
[6]上转发光技术快速检测尿液中氯胺酮[J]. 张凯,罗海峰,胡秋实,于莉,林长青,杨笑熳,周蕾. 刑事技术. 2016(02)
[7]免疫层析试纸条检测实验感染猪旋毛虫抗体的研究[J]. 李雁萍. 中国畜牧兽医文摘. 2016(04)
[8]西藏拉萨市旋毛虫病4例报告[J]. 扎西措姆,金峰,孙萍. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2015(04)
[9]消化法检验旋毛虫病最适条件的筛选[J]. 吴秀萍,王迪,李庶东,孙召金,刘明远. 中国动物检疫. 2015(03)
[10]基于上转换发光技术的尿液中吗啡及甲基苯丙胺快速定量检测方法研究[J]. 刘晓,林承喜,张平平,杨笑熳,赵勇,李春凤,孙崇云,邱景富,杨瑞馥,周蕾. 刑事技术. 2015(01)
博士论文
[1]环介导等温扩增（LAMP）技术检测旋毛虫DNA的研究[D]. 李雪莲.郑州大学 2016
[2]HBsAb快速定量检测上转发光免疫层析试纸的研制及临床应用[D]. 李鲁平.中国医科大学 2009
硕士论文
[1]旋毛虫免疫金标单克隆抗体试纸条的研制[D]. 于海波.东北农业大学 2016
[2]上转发光免疫层析法检测乙肝病毒外膜大蛋白在不同类型慢性肝病中的临床意义[D]. 王妙婵.浙江大学 2015
[3]基于上转发光免疫层析技术快速定量检测类鼻疽伯克霍尔德菌与土拉弗朗西斯菌的方法研究[D]. 华菲.泰山医学院 2014
[4]应用免疫胶体金技术对猪旋毛虫病诊断方法的研究[D]. 任科研.吉林大学 2012
[5]布鲁氏菌抗原快速检测UPT免疫层析试纸的研制[D]. 赵瑾.中国人民解放军军事医学科学院 2009
[6]旋毛虫肌幼虫WM5抗原基因的克隆、表达及鉴定[D]. 夏慧卿.吉林大学 2007
[7]基于上转换发光技术生物传感器的研制[D]. 周蕾.中国人民解放军军事医学科学院 2004
本文编号：3436516
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：75 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
上转发光过程
第一篇 文献综述成[94]，各组成部分（图 2.2）：（1）样品垫：被检样本滴加的部位；（：含有 UCP-抗原或抗体结合物的部位；（3）分析膜：层析试纸的核心和抗体分别固定于其上的某一位置作为检测带（T 带）与质控带（C 带）垫：通过虹吸作用，为整个检测过程提供动力，使样品流过整个试纸条底衬：各部分的载体。
1.1 三种蛋白的 SDS-PAGE 鉴；1.纯化后的 Zh68；2.纯化后的 WMig.1.1 SDS-PAGE of three prote Marker; 1. Purified Zh68; 2. Purified W、WM5 蛋白 Western blot 鉴定鉴定 ES 抗原、Zh68 和 WM5 均）识别，具有很好的抗原原性（纸条的备选抗原。
【参考文献】：
期刊论文
[1]全球人体旋毛虫病的暴发情况分析[J]. 翟铖铖,陈家旭,陈韶红,吴秀萍. 中国人兽共患病学报. 2017(11)
[2]旋毛虫病诊断方法研究综述[J]. 翟铖铖,陈家旭,陈韶红,吴秀萍. 中国动物检疫. 2017(06)
[3]旋毛虫LAMP检测方法的建立与应用[J]. 黄芸,徐立新,宋小凯,李祥瑞,严若峰. 中国兽医科学. 2017(04)
[4]猪旋毛虫病的检疫检验和防控[J]. 陈碧霞. 农技服务. 2017(01)
[5]蓖麻毒素单抗制备及上转发光免疫层析定量检测方法研究[J]. 王晓晨,周蕾,孙崇云,赵勇,王鑫蕊,张平平,杨瑞馥,马馨. 军事医学. 2016(08)
[6]上转发光技术快速检测尿液中氯胺酮[J]. 张凯,罗海峰,胡秋实,于莉,林长青,杨笑熳,周蕾. 刑事技术. 2016(02)
[7]免疫层析试纸条检测实验感染猪旋毛虫抗体的研究[J]. 李雁萍. 中国畜牧兽医文摘. 2016(04)
[8]西藏拉萨市旋毛虫病4例报告[J]. 扎西措姆,金峰,孙萍. 中国寄生虫学与寄生虫病杂志. 2015(04)
[9]消化法检验旋毛虫病最适条件的筛选[J]. 吴秀萍,王迪,李庶东,孙召金,刘明远. 中国动物检疫. 2015(03)
[10]基于上转换发光技术的尿液中吗啡及甲基苯丙胺快速定量检测方法研究[J]. 刘晓,林承喜,张平平,杨笑熳,赵勇,李春凤,孙崇云,邱景富,杨瑞馥,周蕾. 刑事技术. 2015(01)
博士论文
[1]环介导等温扩增（LAMP）技术检测旋毛虫DNA的研究[D]. 李雪莲.郑州大学 2016
[2]HBsAb快速定量检测上转发光免疫层析试纸的研制及临床应用[D]. 李鲁平.中国医科大学 2009
硕士论文
[1]旋毛虫免疫金标单克隆抗体试纸条的研制[D]. 于海波.东北农业大学 2016
[2]上转发光免疫层析法检测乙肝病毒外膜大蛋白在不同类型慢性肝病中的临床意义[D]. 王妙婵.浙江大学 2015
[3]基于上转发光免疫层析技术快速定量检测类鼻疽伯克霍尔德菌与土拉弗朗西斯菌的方法研究[D]. 华菲.泰山医学院 2014
[4]应用免疫胶体金技术对猪旋毛虫病诊断方法的研究[D]. 任科研.吉林大学 2012
[5]布鲁氏菌抗原快速检测UPT免疫层析试纸的研制[D]. 赵瑾.中国人民解放军军事医学科学院 2009
[6]旋毛虫肌幼虫WM5抗原基因的克隆、表达及鉴定[D]. 夏慧卿.吉林大学 2007
[7]基于上转换发光技术生物传感器的研制[D]. 周蕾.中国人民解放军军事医学科学院 2004
本文编号：3436516
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