苏北及周边地区水禽致病性大肠杆菌的分离鉴定及耐药性分析

发布时间：2021-10-21 19:46

　　为研究近年来禽致病性大肠杆菌（APEC）的耐药性,本研究室于2018年～2019年对江苏北部及周边地区228份水禽组织病料样品（鸭头、鸭肝样品;鹅头、鹅肝样品）进行了细菌分离培养和APEC的PCR鉴定。对分离到的APEC菌株采用K-B纸片法进行药敏试验;同时对其碳青霉烯类、β-内酰胺类、氨基糖苷类、磺胺类、粘菌素类、喹诺酮类、四环素类7大类共计16种耐药基因进行了PCR检测。结果显示,在分离到的细菌中,共鉴定出50株APEC菌株。药敏试验结果显示,APEC分离菌株对四环素、氨苄西林、氟苯尼考耐药性较强,耐药菌株分别占100%、96%、86%;对头孢噻肟、恩诺沙星、链霉素、氧氟沙星中等耐药,耐药菌株分别占76%、70%、58%、36%;对美罗培南、呋喃妥因、丁胺卡那霉素的耐药性较低,耐药菌株仅分别占4%、4%、6%。其中多重耐药性较严重,耐4、5、6、7种抗生素的现象较普遍。在对其β-内酰胺类的耐药基因检测中,CTX-M、TEM、SHV的检出率分别为60%、58%、20%;氨基糖苷类:ant（3’’）-I a、aac（3’）-I b的检出率分别为0,50%（25/50）;磺胺类sul I... 

【文章来源】：中国预防兽医学报. 2020,42(05)北大核心CSCD

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【部分图文】：

图1 分离菌株的革兰氏染色结果（1 000×)

对分离菌株的耐药基因进行PCR检测，结果显示，碳青霉烯类耐药基因NDM的检出率为4%(2/50），未检出KPC、GES、SME、IMI基因；β-内酰胺类：TEM的检出率为58%(29/50),CTX-M的检出率为60%(30/50),SHV的检出率为20%(10/50）；氨基糖苷类：ant(3"")-Ia）的检出率为0,aac(3")-Ib的检出率为50%(25/50）；磺胺类：sul I的检出率为82%(41/50）；粘菌素类：mcr-1的检出率为6%(3/50）；喹诺酮类：qnrB的检出率为68%(34/50),parC的检出率为98%(49/50）；四环素类：tetA的检出率为66%(33/50),tetB的检出率为10%(5/50）。表明分离的APEC对parC、sul I、qnrB、CTX-M的耐药基因检出率较高，且其对美罗培南、头孢噻肟、四环素的耐药表型与其耐药基因均存在相关性。2.4 分离APEC的改良Hoge试验结果

在2.2的药敏试验中发现了2株对碳青霉烯类抗生素美罗培南耐药的APEC，且该两株APEC均携带碳青霉烯类耐药基因NDM，将其命名为EC162、EC171。经改良Hoge试验结果显示，平板中的抑菌圈出现了类似苹果蒂样的形状，是由于EC162和EC171产生的碳青霉烯酶扩散到了美罗培南产生的抑菌圈区域中水解了该抗生素，使得该该区域中没有足够的美罗培南抑制大肠杆菌ATCC25922，使ATCC25922出现了类似苹果蒂样形状的增强性生长（图3）。确认2株菌均产碳青霉烯酶，可以水解碳青霉烯类抗生素，所以其对碳青霉烯类抗生素菌耐药。3 讨论

【参考文献】：
期刊论文
[1]致蛋鸡卵黄性腹膜炎大肠杆菌分子分群、耐药表型及耐药基因型检测与分析[J]. 张召兴,李佩国,李蕴玉,贾青辉,张香斋,吴同垒,张志强.  中国预防兽医学报. 2019(09)
[2]大肠埃希菌PCR检测方法的建立及应用[J]. 赵凤菊,顾贵波,李井春,王竹.  动物医学进展. 2016(08)

博士论文
[1]畜禽源碳青霉烯耐药菌新型金属β-内酰胺酶变异体耐药机制研究[D]. 刘志海.中国农业大学 2018

硕士论文
[1]革兰阴性杆菌耐碳青霉烯药物机制研究[D]. 代志峰.郑州大学 2015



本文编号：3449612