苜蓿皂苷粗提物对胆固醇代谢相关基因表达调控的研究

发布时间：2021-10-23 20:09

　　为了研究苜蓿皂苷粗提物对蛋鸡胆固醇代谢相关基因的影响,并初步探讨其分子机理。本文通过测定不同水平的苜蓿皂苷粗提物对产蛋鸡胆固醇代谢相关基因mRNA表达的影响,观察基因表达的变化与规律,并通过凝胶阻滞实验研究苜蓿皂苷粗提物对相关基因表达的调控,探讨苜蓿皂苷降低胆固醇的作用机理。结果如下：试验一：苜蓿皂苷粗提物对产蛋鸡胆固醇代谢基因mRNA表达的影响。选取150只190日龄海蓝褐壳蛋鸡,随机分为5个处理,每个处理5个重复,每个重复6只鸡,试验期77d。对照组饲喂基础日粮,处理A、B、C、D组在基础日粮中分别添加60mg/kg、120mg/kg、 240mg/kg、480mg/kg的苜蓿皂苷粗提物。结果表明：（1）苜蓿皂苷粗提物可以呈二次效应降低蛋鸡卵巢VLDLR mRNA表达量,各处理组VLDLR mRNA表达量极显著低于对照组。（2）苜蓿皂苷粗提物呈极显著二次效应促进蛋鸡肝脏CYP7A1mRNA的表达（P）<0.01),处理A、B、C组的CYP7A1 mRNA表达量极显著高于对照组和处理D组（P<0.01）。（3）苜蓿皂苷粗提物对蛋鸡胆固醇代谢基因apoVLDL-Ⅱ、SREB... 

【文章来源】：河南农业大学河南省

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
致谢
摘要
1 文献综述
    1.1 苜蓿皂苷的应用
        1.1.1 苜蓿皂苷定义
        1.1.2 苜蓿皂苷应用
    1.2 蛋鸡鸡蛋的胆固醇沉积原理
        1.2.1 蛋黄前体的合成
        1.2.2 蛋黄胆固醇的沉积
        1.2.3 蛋黄胆固醇代谢的调控
    1.3 苜蓿皂苷降低胆固醇以及对胆固醇代谢基因表达的影响
        1.3.1 胆固醇代谢关键基因及关键蛋白
        1.3.2 逆转运与非受体途径
        1.3.3 基因表达调控
    1.4 展望
2 引言
3 试验一 苜蓿皂苷对蛋鸡胆固醇代谢相关基因表达的影响
    3.1 材料与方法
        3.1.1 试验材料与试验设计
        3.1.2 试验主要仪器与试剂配制
    3.2 试验方法
        3.2.1 引物设计
        3.2.2 肝脏总RNA的提取过程
        3.2.3 RNA质量鉴定与浓度鉴定
        3.2.4 RNA提取中注意要点
        3.2.5 RNA反转录过程
        3.2.6 PCR扩增反应
        3.2.7 PCR产物的切胶回收与连接转化
        3.2.8 荧光定量PCR
        3.2.9 统计分析
    3.3 试验结果
        3.3.1 苜蓿皂苷粗提物对肝脏LDLR基因mRNA表达的影响
        3.3.2 苜蓿皂苷粗提物对卵巢VLDLR基因mRNA表达的影响
        3.3.3 苜蓿皂苷粗提物对肝脏SREBP-2基因mRNA表达的影响
        3.3.4 苜蓿皂苷粗提物对肝脏ApoB100基因mRNA表达的影响
        3.3.5 苜蓿皂苷粗提物对卵巢Apo-VLDL-Ⅱ基因mRNA表达的影响
        3.3.6 苜蓿皂苷粗提物对肝脏CYP7A1基因mRNA表达的影响
        3.3.7 苜蓿皂苷粗提物对肝脏HMGCR基因mRNA表达的影响
    3.4 讨论
    3.5 小结
4 试验二 苜蓿皂苷粗提物对蛋鸡肝脏胆固醇代谢基因表达调控的试验方法探索
    4.1 材料方法
        4.1.1 试验材料
        4.1.2 试验主要仪器设备与试剂配制
    4.2 试验方法
        4.2.1 蛋鸡肝脏DNA的提取
        4.2.2 核蛋白的提取
        4.2.3 探针准备及标记
        4.2.4 探针标记效率检测
        4.2.5 凝胶阻滞实验蛋白与探针孵育阶段
        4.2.6 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳
        4.2.7 电转移印记
        4.2.8 化学荧光信号检测
    4.3 结果
        4.3.1 基因克隆-引物片段化分析
        4.3.2 标记效率检测
        4.3.3 核蛋白提取
    4.4 讨论
    4.5 小结
5 结论与展望
    5.1 结论
    5.2 展望
参考文献
英文摘要


【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3453833