没食子酸调控断奶仔猪肠道炎症反应的分子机制
发布时间：2021-10-25 21:09
仔猪在断奶等因素影响下产生免疫应激,引发肠道炎症发生,从而导致出现腹泻等一系列健康问题,植物源生物活性物质可通过调节免疫信号通路来改善畜禽肠道健康。没食子酸（Gallic acid,GA）作为一种植物源生物活性物质的多酚类化合物具有抑菌、抗氧化和抗炎等多种生物功能。目前对没食子酸调控断奶仔猪肠道免疫功能的作用及其具体机制知之甚少。本研究拟通过体内动物试验、体外细胞培养试验相结合来探究没食子酸对仔猪肠道黏膜炎症反应的调控作用及其分子机制。本研究主要包括以下4个部分:（1）研究日粮中不同水平没食子酸添加量对断奶仔猪生长性能及腹泻率的影响。挑选96头初始体重相近的杜?长?大三元杂交断奶仔猪,随机分为4个处理:对照组（基础日粮）、GA 100组（基础日粮+100 mg/kg GA）、GA 200组（基础日粮+200mg/kg GA）、GA 400组（基础日粮+400 mg/kg GA）。每个处理设6个重复（栏）,每个栏放置4头仔猪。试验周期为21天。（2）研究日粮中不同水平没食子酸添加量对攻毒断奶仔猪抗氧化和免疫功能的影响。在动物试验第21天,每栏各选取1头体重中等的仔猪,腹腔注射脂多糖（LP...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
没食子酸的分子结构
中国农业科学院硕士学位论文第四章外源添加没食子酸对IPEC-J2细胞氧化还原及炎症反应的影响274.2.7细胞内基因表达测定将培养孔中培养基吸净，用预冷PBS洗涤2-3次，然后每孔加入1mL的TRIzol并反复吹打几次，然后在冰上静置反应3-5min。其他步骤参照章节3.2.7。4.2.8统计分析数据以平均数±标准误（Mean±SEM）表示，运用SAS9.2软件的One-wayANOVA进行显著性分析，并用Tukey方法进行多重比较，以P<0.05作为差异显著性判断标准。4.3结果4.3.1外源添加没食子酸对IPEC-J2细胞活性的影响细胞活性测定结果（图4-1）显示，当用没食子酸孵育IPEC-J2细胞6h时，浓度低于400μg/L对细胞活力没有明显影响（P>0.05）。当用没食子酸孵育24h时，与对照组相比，浓度高于200μg/L时，IPEC-J2的活力显著降低（P<0.05）。综合考虑孵育时间和没食子酸浓度的相互作用，在后续的试验中将没食子酸的工作浓度设为100μg/L。图4-1没食子酸对IPEC-J2细胞活性的影响Fig.4-1EffectofgallicacidontheviabilityofIPEC-J2cells4.3.2外源添加没食子酸对损伤IPEC-J2细胞中抗氧化酶含量的影响过氧化氢刺激后，IPEC-J2细胞中过氧化氢酶活性显著下降（P<0.05），而用没食子酸预培养则有一定的缓解趋势但差异不显著（P>0.05）（图4-2a）；过氧化氢和没食子酸处理对细胞内超氧化物氧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性无显著影响（P>0.05）。
中国农业科学院硕士学位论文第四章外源添加没食子酸对IPEC-J2细胞氧化还原及炎症反应的影响28图4-2没食子酸对H2O2诱导的抗氧化酶分泌的影响Fig.4-2EffectofgallicacidonH2O2-inducedantioxidantenzymesecretion4.3.3外源添加没食子酸对损伤IPEC-J2细胞中抗氧化酶基因表达的影响如图4-3所示，与单独用过氧化氢处理组的细胞相比，同时使用没食子酸处理组的细胞具有增加CAT相对基因表达的趋势（P>0.05）。此外，各组细胞之间SOD和GPX1基因的相对表达无显著差异（P>0.05），这与上述细胞内抗氧化酶活性水平结果基本一致。
【参考文献】：
期刊论文
[1]头花蓼有效组分中没食子酸、原儿茶酸在模式生物斑马鱼中的代谢研究[J]. 孙慧园,覃小丽,梅朝叶,李勇军,郑林,黄勇. 中国药理学通报. 2017(03)
[2]内毒素对猪的危害及其控制[J]. 汪志,董国忠,吴剑波. 动物营养学报. 2017(02)
[3]没食子酸和原儿茶酸在大鼠肠道菌群中的代谢研究[J]. 罗媛,杨武,孙慧园,孙佳,董莉,陈思颖,黄勇. 沈阳药科大学学报. 2017(01)
[4]没食子酸通过拮抗脂多糖诱导的TLR4/NF-κB活化抑制RAW264.7巨噬细胞炎性反应[J]. 黄丽华,侯林,薛海南,王纯洁. 细胞与分子免疫学杂志. 2016(12)
[5]没食子酸的药理作用及其药物代谢动力学研究进展[J]. 高雅,李骅,王四旺,谢艳华,杨倩,张邦乐. 西北药学杂志. 2014(04)
[6]葡萄籽原花青素及维生素E对氧化应激仔猪生长性能、血清氧化还原状态和肝脏氧化损伤的影响[J]. 赵娇,周招洪,梁小芳,毛湘冰,陈代文,余冰. 中国农业科学. 2013(19)
[7]五倍子没食子酸研究进展[J]. 张雅丽,李建科,刘柳,于振,马倩倩,李梦颖. 食品工业科技. 2013(10)
[8]自由基清除剂对仔猪生长及血液氧化代谢相关指标的影响[J]. 韩国清,朱晓彤,束刚,王松波,王丽娜,高萍,江青艳. 畜牧与兽医. 2012(S1)
[9]没食子酸的研究进展[J]. 柯发敏,张开莲. 泸州医学院学报. 2011(04)
[10]没食子酸体外抗氧化作用研究[J]. 谢晓艳,刘洪涛,张吉,李秀英,李文明,于超. 重庆医科大学学报. 2011(03)
博士论文
[1]日粮纤维对仔猪肠道屏障功能的影响及调控机制的研究[D]. 张莉.中国农业科学院 2018
[2]没食子酸和缩合单宁对体外瘤胃发酵及肉牛营养物质消化、甲烷产量和氮代谢影响的研究[D]. 魏晨.中国农业大学 2017
硕士论文
[1]五倍子没食子酸的制备、抑菌作用及机理研究[D]. 张雅丽.陕西师范大学 2013
[2]五倍子没食子酸的提取、纯化及抑菌效果研究[D]. 王广娟.河北农业大学 2010
本文编号：3458168
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
没食子酸的分子结构
中国农业科学院硕士学位论文第四章外源添加没食子酸对IPEC-J2细胞氧化还原及炎症反应的影响274.2.7细胞内基因表达测定将培养孔中培养基吸净，用预冷PBS洗涤2-3次，然后每孔加入1mL的TRIzol并反复吹打几次，然后在冰上静置反应3-5min。其他步骤参照章节3.2.7。4.2.8统计分析数据以平均数±标准误（Mean±SEM）表示，运用SAS9.2软件的One-wayANOVA进行显著性分析，并用Tukey方法进行多重比较，以P<0.05作为差异显著性判断标准。4.3结果4.3.1外源添加没食子酸对IPEC-J2细胞活性的影响细胞活性测定结果（图4-1）显示，当用没食子酸孵育IPEC-J2细胞6h时，浓度低于400μg/L对细胞活力没有明显影响（P>0.05）。当用没食子酸孵育24h时，与对照组相比，浓度高于200μg/L时，IPEC-J2的活力显著降低（P<0.05）。综合考虑孵育时间和没食子酸浓度的相互作用，在后续的试验中将没食子酸的工作浓度设为100μg/L。图4-1没食子酸对IPEC-J2细胞活性的影响Fig.4-1EffectofgallicacidontheviabilityofIPEC-J2cells4.3.2外源添加没食子酸对损伤IPEC-J2细胞中抗氧化酶含量的影响过氧化氢刺激后，IPEC-J2细胞中过氧化氢酶活性显著下降（P<0.05），而用没食子酸预培养则有一定的缓解趋势但差异不显著（P>0.05）（图4-2a）；过氧化氢和没食子酸处理对细胞内超氧化物氧化酶及谷胱甘肽过氧化物酶活性无显著影响（P>0.05）。
中国农业科学院硕士学位论文第四章外源添加没食子酸对IPEC-J2细胞氧化还原及炎症反应的影响28图4-2没食子酸对H2O2诱导的抗氧化酶分泌的影响Fig.4-2EffectofgallicacidonH2O2-inducedantioxidantenzymesecretion4.3.3外源添加没食子酸对损伤IPEC-J2细胞中抗氧化酶基因表达的影响如图4-3所示，与单独用过氧化氢处理组的细胞相比，同时使用没食子酸处理组的细胞具有增加CAT相对基因表达的趋势（P>0.05）。此外，各组细胞之间SOD和GPX1基因的相对表达无显著差异（P>0.05），这与上述细胞内抗氧化酶活性水平结果基本一致。
【参考文献】：
期刊论文
[1]头花蓼有效组分中没食子酸、原儿茶酸在模式生物斑马鱼中的代谢研究[J]. 孙慧园,覃小丽,梅朝叶,李勇军,郑林,黄勇. 中国药理学通报. 2017(03)
[2]内毒素对猪的危害及其控制[J]. 汪志,董国忠,吴剑波. 动物营养学报. 2017(02)
[3]没食子酸和原儿茶酸在大鼠肠道菌群中的代谢研究[J]. 罗媛,杨武,孙慧园,孙佳,董莉,陈思颖,黄勇. 沈阳药科大学学报. 2017(01)
[4]没食子酸通过拮抗脂多糖诱导的TLR4/NF-κB活化抑制RAW264.7巨噬细胞炎性反应[J]. 黄丽华,侯林,薛海南,王纯洁. 细胞与分子免疫学杂志. 2016(12)
[5]没食子酸的药理作用及其药物代谢动力学研究进展[J]. 高雅,李骅,王四旺,谢艳华,杨倩,张邦乐. 西北药学杂志. 2014(04)
[6]葡萄籽原花青素及维生素E对氧化应激仔猪生长性能、血清氧化还原状态和肝脏氧化损伤的影响[J]. 赵娇,周招洪,梁小芳,毛湘冰,陈代文,余冰. 中国农业科学. 2013(19)
[7]五倍子没食子酸研究进展[J]. 张雅丽,李建科,刘柳,于振,马倩倩,李梦颖. 食品工业科技. 2013(10)
[8]自由基清除剂对仔猪生长及血液氧化代谢相关指标的影响[J]. 韩国清,朱晓彤,束刚,王松波,王丽娜,高萍,江青艳. 畜牧与兽医. 2012(S1)
[9]没食子酸的研究进展[J]. 柯发敏,张开莲. 泸州医学院学报. 2011(04)
[10]没食子酸体外抗氧化作用研究[J]. 谢晓艳,刘洪涛,张吉,李秀英,李文明,于超. 重庆医科大学学报. 2011(03)
博士论文
[1]日粮纤维对仔猪肠道屏障功能的影响及调控机制的研究[D]. 张莉.中国农业科学院 2018
[2]没食子酸和缩合单宁对体外瘤胃发酵及肉牛营养物质消化、甲烷产量和氮代谢影响的研究[D]. 魏晨.中国农业大学 2017
硕士论文
[1]五倍子没食子酸的制备、抑菌作用及机理研究[D]. 张雅丽.陕西师范大学 2013
[2]五倍子没食子酸的提取、纯化及抑菌效果研究[D]. 王广娟.河北农业大学 2010
本文编号：3458168
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