伪狂犬病病毒野毒株新型可视化环介导等温扩增检测方法的建立

发布时间：2021-10-25 22:51

　　利用环介导等温扩增（LAMP）与pH指示剂结合的方式建立伪狂犬病病毒（PRV）野毒株的快速检测方法,并优化反应体系。结果显示,该方法特异性良好、敏感性较高,检测限达100.5TCID50,与荧光定量PCR的敏感性一致。对52份临床样品进行检测,用荧光定量PCR检测出30份阳性样品,LAMP检测出27份阳性样品,二者的符合率为94.2%。结果表明,PRV野毒株新型可视化LAMP检测方法操作简便、结果判别明显、检测成本低,可预期应用于PRV带毒猪的快速筛查,这对于猪伪狂犬病的净化具有重要意义。 

【文章来源】：中国兽医科学. 2020,50(08)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

LAMP的扩增结果

LAMP的特异性试验

显。本研究中建立的新型可视化LAMP检测方法的阳性结果为黄色，阴性结果为紫红色，检测结果直观且容易分辨。其灵敏度和荧光定量PCR一致，检测限可以达到100.5TCID50。采用本研究中建立的方法与荧光定量PCR分别对52份临床样品进行检测，二者的符合率为94.2％。其中，LAMP检测结果为假阴性的样品的Ct值分别为37.43、37.19、37.67，这3个样品属于弱阳性。本研究中建立的猪伪狂犬病病毒野毒株新型可视化LAMP快速检测方法可预期应用于PRV带毒猪的快速筛查，这对于猪伪狂犬病的净化具有重要意义。12345678图3LAMP的敏感性试验Figure3ThesensitivitytestofLAMP1～7：105.5、104.5、103.5、102.5、101.5、100.5、10-0.5TCID50；8：阴性对照。1—7：105.5，104.5，103.5，102.5，101.5，100.5，10-0.5TCID50；8：Negativecontrol.10.2649.2648.2647.2646.2645.2644.2643.2642.2641.2640.264荧光强度Fluorescence（533-580）12345651015202530354045循环数Cycles78检测结果ResultLAMP荧光定量PCRQuantitativePCR阳性数Positivecounts1720阴性数Negativecounts3532总计Total5252参考文献（References）［1］高泽文，范桂芳，赵婷婷，等.猪伪狂犬病病毒流行株遗传进化及序列比对分析［J］.中国兽医学报，2018，38（1）：1-10.GAOZe-wen，FANGui-fang，ZHAOTing-ting，etal.Phy-logeneticandsequencealignmentanalysisofepi-demicswinepseudorabiesvirus［J］.ChineseJournalofVeterinaryScience，2018，38（1）：1-10.（inChi-nese）［2］龙晓婷，刘俊磊，郭洪，等.

【参考文献】：
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本文编号：3458312