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羊口疮病毒编码的锚蛋白抑制NF-κB信号通路的分子机制研究

发布时间:2021-10-26 18:04
  目的:羊传染性脓疱(CE)是由山羊或绵羊感染羊口疮病毒(ORFV)而引起的一种急性、高度接触性传染病,同时该病毒可感染人类,引起高传染性的人畜共患病。ORFV是痘病毒科脊椎动物痘病毒亚科副痘病毒属的主要成员。大多数的痘病毒为保证自身在宿主细胞中的正常复制,针对NF-κB信号通路进化出了独特的调节宿主免疫应答的能力。由多拷贝的锚蛋白重复(ANK)基序组成的锚蛋白,作为痘病毒蛋白中最大的家族,在病毒逃避宿主免疫应答中发挥重要作用。目前关于痘病毒锚蛋白调节宿主NF-κB信号通路的研究已有很多,但有关副痘病毒属锚蛋白与NF-κB信号通路互作关系的研究却较少。本研究为系统探讨副痘病毒属ORFV编码的五种锚蛋白ORF008、ORF123、ORF126、ORF128、ORF129对NF-κB信号通路的调节作用机制,首先验证ORFV编码的五种锚蛋白是否可在293T细胞中正确表达,并探讨锚蛋白对宿主细胞核因子κB(NF-κB)信号通路的调节作用;其次研究ORFV编码的锚蛋白ORF128蛋白调节宿主NF-κB信号通路的作用机制;同时,初步构建ORFV-?ORF123重组病毒,为进一步深入研究ORFV编码锚... 

【文章来源】:兰州大学甘肃省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:59 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

羊口疮病毒编码的锚蛋白抑制NF-κB信号通路的分子机制研究


ORFV锚蛋白重组质粒在293T细胞中的表达

示意图,生物信息学分析


图 3-1 ORF128 生物信息学分析A:基于 ORF128 基因序列构建的系统进化树;B:ORF128 一级结构预测示意图2 ORF128 蛋白影响 NF-κB-p65 核位移NF-κB-p65 从细胞质进入细胞核是 NF-κB 信号通路激活的重要标志。RF128 下调 NF-κB 信号通路活性的机制,通过 Western-blot 分别检测细胞核中 NF-κB-p65 的蛋白表达量。结果显示,TNF-α 刺激 60min 后,F128 蛋白的细胞与对照组相比,其 NF-κB-p65 的核移位蛋白量相对减少在细胞质中 NF-κB-p65 的量多于对照组(图 3-2)。

示意图,蛋白核,细胞质,信号通路


图 3-1 ORF128 生物信息学分析A:基于 ORF128 基因序列构建的系统进化树;B:ORF128 一级结构预测示意图3.3.2 ORF128 蛋白影响 NF-κB-p65 核位移NF-κB-p65 从细胞质进入细胞核是 NF-κB 信号通路激活的重要标志。为探讨 ORF128 下调 NF-κB 信号通路活性的机制,通过 Western-blot 分别检测细胞质和细胞核中 NF-κB-p65 的蛋白表达量。结果显示,TNF-α 刺激 60min 后,表达ORF128 蛋白的细胞与对照组相比,其 NF-κB-p65 的核移位蛋白量相对减少,而滞留在细胞质中 NF-κB-p65 的量多于对照组(图 3-2)。

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]山羊痘病毒N1L基因缺失重组毒株的构建及其生物特性研究[D]. 曹慧慧.广西大学 2016



本文编号:3459958

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