山羊C/EBPα、C/EBPβ和C/EBPδ基因克隆及表达模式研究

发布时间：2021-10-30 14:05

　　在克隆获得山羊C/EBPα、C/EBPβ和C/EBPδ基因序列基础上分析该家族成员序列特征,明确组织表达特性,并揭示3个基因在山羊肌内前体脂肪细胞分化过程中的表达情况。采用RT-PCR方法克隆山羊C/EBPα、C/EBPβ和C/EBPδ基因序列,利用相关的生物软件进行生物信息学分析,利用qPCR检测3个基因在山羊各组织及山羊肌内前体脂肪细胞成脂分化中的表达情况。克隆得到C/EBPα、C/EBPβ和C/EBPδ基因序列分别为1 062,1 056,873 bp,所编码的蛋白均为不稳定亲水碱性蛋白,均无信号肽和跨膜结构域。C/EBPα在皮下脂肪中表达水平最高,C/EBPβ和C/EBPδ均在肺中表达水平最高。在前体脂肪细胞分化过程中C/EBPα和C/EBPδ均在前体脂肪细胞分化前表达水平最高,随着分化时间的增加表达水平降低,C/EBPβ在肌内前体脂肪细胞中的表达随着诱导分化天数的增加而增加,在分化7 d时表达水平最高。基于以上研究,推测3个基因在山羊肌内脂肪细胞分化过程中发挥着重要作用。 

【文章来源】：华北农学报. 2020,35(05)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【部分图文】：

山羊C/EBPα (A)、C/EBPβ (B)和C/EBPδ (C)蛋白二级结构

C/EBPδ蛋白二级结构预测显示,有53.52%的氨基酸形成无规则卷曲,42.58%的氨基酸形成α-螺旋,剩余3.91%的氨基酸可能形成延伸链(图1-C)。该蛋白无信号肽结构,无跨膜结构域。该蛋白可能和C/EBPα、C/EBPβ、PPARG、SP1和MYC等蛋白存在相互作用(图2-C)。2.2.3 氨基酸序列的同源性比对及构建进化树

以皮下脂肪组织作为对照,分别对C/EBPα、C/EBPβ和C/EBPδ 3个基因的定量数据进行分析并绘制组织表达谱(图5)。qPCR结果显示3个基因的mRNA组织表达较为广泛,其中C/EBPα基因在皮下脂肪中表达水平最高,其次在肝中也有较高水平的表达;C/EBPβ和C/EBPδ在山羊组织的表达模式相似,均在肺中表达水平最高。图5 C/EBPα、C/EBPβ和C/EBPδ基因在山羊各组织中的相对表达

【参考文献】：
期刊论文
[1]山羊肌内前体脂肪细胞诱导分化过程中内参基因的表达稳定性分析[J]. 许晴,林森,朱江江,王永,林亚秋.  畜牧兽医学报. 2018(05)
[2]不同品种猪PPARγ和C/EBPα基因表达规律与肌内脂肪含量的相关[J]. 盘道兴,王振,杨茂林,廖乔平,杨昌平,吴宇萍,王金洲,刘若余.  中国农业科学. 2017(01)

硕士论文
[1]鸭C/EBPα，C/EBPβ和C/EBPδ基因的克隆及在脂肪组织中的发育性表达研究[D]. 王万霞.四川农业大学 2012
[2]鸡脂肪分化转录因子PPARγ和C/EBPα抗体制备及功能研究[D]. 王娉.新疆大学 2007



本文编号：3466863