藏药甘青虎耳草黄酮的提取及抗肿瘤作用研究
发布时间：2021-10-31 09:22
甘青虎耳草（Saxifraga tangutica Engl.）为常用藏药,生于青海、甘肃、西藏及四川等地海拔2900-4900m的针叶林灌丛中,味苦性凉,清泻肝胆,疗伤、治急性中耳炎、风热咳嗽。药理研究表明,甘青虎耳草具有抑菌、抗病毒、消炎和抗肿瘤作用。甘青虎耳草中富含黄酮、多糖等生物活性物质,具有较大的开发应用价值。本研究进行了:1.甘青虎耳草黄酮类物质的提取纯化。通过超声波辅助乙醇浸提法提取得到甘青虎耳草粗黄酮,再用乙酸乙酯萃取,萃取物中黄酮纯度为48.5%,然后将萃取物经NKA-Ⅱ大孔吸附树脂纯化,得到的黄酮纯度达到82.07%。以单因素试验为基础设计正交试验优化了甘青虎耳草黄酮提取工艺条件:乙醇80%,料液比1:25 g/mL,提取温度50℃,提取时间35min,提取次数4次。提取量可达81.73mg/g。2.甘青虎耳草黄酮乙酸乙酯部分抗肿瘤作用研究。甘青虎耳草黄酮乙酸乙酯部分与小鼠H22肝癌细胞共孵育,可诱导细胞凋亡,核酸电泳呈凋亡特征性梯状带;经流式细胞分析,凋亡率达31%。MTT法检测细胞抑制率与浓度和作用时间正相关（P<0.05）。小鼠肝脏注射H22细胞建立小鼠...
【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
芦丁标准曲线的建立Fig.2-1EstablishmentofstandardcurvebasedonRutin
藏药甘青虎耳草黄酮的提取及抗肿瘤作用研究27测定每支试管溶液中总黄酮的浓度。2.1.7.9甘青虎耳草黄酮乙酸乙酯部分纯化效果的考察收集所得到的洗脱液，旋蒸成浸膏状，冷冻干燥，称取10mg，用2.1.5.2的方法计算黄酮纯度。2.2结果2.2.1芦丁标准曲线的建立回归方程为：A＝10.858C+0.0016,r=0.9997,在0.011～0.088mg/mL范围内呈良好的线性关系。图2-1芦丁标准曲线的建立Fig.2-1EstablishmentofstandardcurvebasedonRutin2.2.2料液比对甘青虎耳草黄酮提取率的影响图2-2甘青虎耳草与乙醇比对甘青虎耳草黄酮提取率的影响Fig.2-2EffectsofSaxifragataugutica：ethanolratioontheextractionrateofflavonoidsfromSaxifragatauguticaabccbd
甘肃农业大学2020届博士学位论文28随甘青虎耳草与乙醇料液比的增加,提取率先升后降(图2-2)，影响显著(P＜0.05)。料液比1:25时总黄酮提取率最高，为62.75mg/g。2.2.3乙醇浓度对甘青虎耳草黄酮提取率的影响随乙醇浓度的增加（图2-3），提取率先上升后下降,影响显著(P＜0.05)。乙醇浓度为70%时总黄酮提取率最高，为60.28mg/g。图2-3乙醇浓度对甘青虎耳草黄酮提取率的影响Fig.2-3EffectofethanolconcentrationsontheextractionrateofflavonoidsfromSaxifragataugutica2.2.4乙醇浸提次数对甘青虎耳草黄酮提取率的影响随提取次数的增多，总黄酮提取率先上升后下降（图2-4），提取次数为3次时，黄酮提取率最高，为55.92mg/g，与其它各次的差异显著（P＜0.05）。图2-4乙醇浸提次数对甘青虎耳草黄酮提取率的影响Fig.2-4EffectofethanolextractiontimesontheextractionrateofflavonoidsfromSaxifragatauguticaabcdeabcdeefg
【参考文献】：
期刊论文
[1]藏药甘青虎耳草总黄酮对小鼠抗炎作用的研究[J]. 崔玮,曾巧英. 甘肃畜牧兽医. 2019(11)
[2]免疫细胞与肝细胞癌关系的研究进展[J]. 张景豪,郑超,周振华,朱晓骏,张鑫,孙学华,高月求. 中国医药导报. 2018(36)
[3]中药干预肿瘤调节性T细胞的作用及机制研究进展[J]. 张亚楠,季旭明,王世军. 医学研究杂志. 2018(10)
[4]原发性肝癌证型分布及用药分析[J]. 钱丽丽,赵向丽,冯晓军,黄雪,张树辉. 河南中医. 2018(08)
[5]层析技术在天然产物分离纯化中的应用[J]. 隋新,付东,黄波,杨帆. 黑龙江科学. 2018(09)
[6]具有抗肿瘤活性的槲皮素衍生物研究进展[J]. 杨扬,郭举. 中草药. 2018(06)
[7]3种虎耳草属药材提取物对CCl4致小鼠急性肝损伤防治作用的比较[J]. 王日康,杜小浪,慕泽泾,阳勇,钟国跃,任刚,蒋伟. 中成药. 2018(07)
[8]原发性肝癌中西医结合治疗进展[J]. 和瑞来,孙真真. 光明中医. 2017(11)
[9]肿瘤化疗药物应用中的不良反应及影响因素[J]. 苏海刚. 中国现代药物应用. 2017(09)
[10]4种药用石斛对增强小鼠免疫功能效果的比较研究[J]. 余琪,毛培江,姜建民,金祖汉. 中国现代应用药学. 2017(02)
博士论文
[1]香菇多糖的结构鉴定及抗肿瘤作用机制研究[D]. 张琪琳.华中科技大学 2015
硕士论文
[1]虎耳草及其主要活性成分以及对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抗肿瘤作用[D]. 刘东.苏州大学 2017
本文编号：3467871
【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省
【文章页数】：80 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
芦丁标准曲线的建立Fig.2-1EstablishmentofstandardcurvebasedonRutin
藏药甘青虎耳草黄酮的提取及抗肿瘤作用研究27测定每支试管溶液中总黄酮的浓度。2.1.7.9甘青虎耳草黄酮乙酸乙酯部分纯化效果的考察收集所得到的洗脱液，旋蒸成浸膏状，冷冻干燥，称取10mg，用2.1.5.2的方法计算黄酮纯度。2.2结果2.2.1芦丁标准曲线的建立回归方程为：A＝10.858C+0.0016,r=0.9997,在0.011～0.088mg/mL范围内呈良好的线性关系。图2-1芦丁标准曲线的建立Fig.2-1EstablishmentofstandardcurvebasedonRutin2.2.2料液比对甘青虎耳草黄酮提取率的影响图2-2甘青虎耳草与乙醇比对甘青虎耳草黄酮提取率的影响Fig.2-2EffectsofSaxifragataugutica：ethanolratioontheextractionrateofflavonoidsfromSaxifragatauguticaabccbd
甘肃农业大学2020届博士学位论文28随甘青虎耳草与乙醇料液比的增加,提取率先升后降(图2-2)，影响显著(P＜0.05)。料液比1:25时总黄酮提取率最高，为62.75mg/g。2.2.3乙醇浓度对甘青虎耳草黄酮提取率的影响随乙醇浓度的增加（图2-3），提取率先上升后下降,影响显著(P＜0.05)。乙醇浓度为70%时总黄酮提取率最高，为60.28mg/g。图2-3乙醇浓度对甘青虎耳草黄酮提取率的影响Fig.2-3EffectofethanolconcentrationsontheextractionrateofflavonoidsfromSaxifragataugutica2.2.4乙醇浸提次数对甘青虎耳草黄酮提取率的影响随提取次数的增多，总黄酮提取率先上升后下降（图2-4），提取次数为3次时，黄酮提取率最高，为55.92mg/g，与其它各次的差异显著（P＜0.05）。图2-4乙醇浸提次数对甘青虎耳草黄酮提取率的影响Fig.2-4EffectofethanolextractiontimesontheextractionrateofflavonoidsfromSaxifragatauguticaabcdeabcdeefg
【参考文献】：
期刊论文
[1]藏药甘青虎耳草总黄酮对小鼠抗炎作用的研究[J]. 崔玮,曾巧英. 甘肃畜牧兽医. 2019(11)
[2]免疫细胞与肝细胞癌关系的研究进展[J]. 张景豪,郑超,周振华,朱晓骏,张鑫,孙学华,高月求. 中国医药导报. 2018(36)
[3]中药干预肿瘤调节性T细胞的作用及机制研究进展[J]. 张亚楠,季旭明,王世军. 医学研究杂志. 2018(10)
[4]原发性肝癌证型分布及用药分析[J]. 钱丽丽,赵向丽,冯晓军,黄雪,张树辉. 河南中医. 2018(08)
[5]层析技术在天然产物分离纯化中的应用[J]. 隋新,付东,黄波,杨帆. 黑龙江科学. 2018(09)
[6]具有抗肿瘤活性的槲皮素衍生物研究进展[J]. 杨扬,郭举. 中草药. 2018(06)
[7]3种虎耳草属药材提取物对CCl4致小鼠急性肝损伤防治作用的比较[J]. 王日康,杜小浪,慕泽泾,阳勇,钟国跃,任刚,蒋伟. 中成药. 2018(07)
[8]原发性肝癌中西医结合治疗进展[J]. 和瑞来,孙真真. 光明中医. 2017(11)
[9]肿瘤化疗药物应用中的不良反应及影响因素[J]. 苏海刚. 中国现代药物应用. 2017(09)
[10]4种药用石斛对增强小鼠免疫功能效果的比较研究[J]. 余琪,毛培江,姜建民,金祖汉. 中国现代应用药学. 2017(02)
博士论文
[1]香菇多糖的结构鉴定及抗肿瘤作用机制研究[D]. 张琪琳.华中科技大学 2015
硕士论文
[1]虎耳草及其主要活性成分以及对小鼠Lewis肺癌移植瘤的抗肿瘤作用[D]. 刘东.苏州大学 2017
本文编号：3467871
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