降解黄曲霉毒素M1细菌菌株的研究

发布时间：2021-11-02 00:20

　　黄曲霉毒素（Aflatoxin，AF）是一种由寄生曲霉、黄曲霉、赭曲霉等真菌产生的次级代谢产物，具有高致癌、高致畸和高致突变性，1993年被世界卫生组织划定为I类致癌物质。其中黄曲霉毒素M1（Aflatoxin，AFM1）主要存在于动物的肉、蛋、奶中。目前控制黄曲霉毒素M1的方法只是通过控制它的前体物质黄曲霉毒素B1在饲料中的含量，减少转化来防止黄曲霉毒素M1对奶制品的污染，而当奶制品中已经出现了黄曲霉毒素M1时却没有有效的办法来去除。近年来生物降解的方法越来越受到人们的关注，它具有高效，副作用少，对食品营养损失小甚至可以增加食品营养成分等优点。本试验则秉承这一理念筛选出一株能够降解黄曲霉毒素M1的细菌菌株，并优化了菌株的发酵条件，研究了菌株降解黄曲霉毒素的机理，对起降解作用的活性物质进行了初步分离提取，主要研究结果如下：（1）降解黄曲霉毒素AFM1菌株的筛选：实验共采集38种动物粪便样本，1个污水处理厂活性污泥样本；3种花生地土壤样本，以香豆素为唯一的碳源和能源进行目的菌株的初步筛选，共筛选出50株菌。然后以菌株对黄曲霉毒素M1的降解率作为筛选指标，筛选出10株降解率在60%以上的菌... 

【文章来源】：河北农业大学河北省

【文章页数】：68 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
Abstract
第一章 引言
    1.1 研究背景
        1.1.1 黄曲霉毒素理化性质
        1.1.2 黄曲霉毒素生物合成途径
        1.1.3 影响黄曲霉毒素产生的因素
        1.1.4 黄曲霉毒素危害
        1.1.5 黄曲霉毒素 M1 检测方法
        1.1.6 黄曲霉毒素去毒方法
    1.2 本研究的目的及意义
    1.3 本研究的主要内容
        1.3.1 降解黄曲霉毒素 M1 菌株的筛选
        1.3.2 降解黄曲霉毒素 M1 菌株的鉴定
        1.3.3 对菌株降解黄曲霉毒素 M1 条件进行优化
        1.3.4 对菌株降解黄曲霉毒素的机理进行研究
第二章 降解黄曲霉毒素 M1 菌株的筛选
    2.1 试验材料
        2.1.1 试验样品
        2.1.2 培养基
        2.1.3 主要仪器设备
        2.1.4 主要化学试剂
    2.2 试验方法
        2.2.1 样本采集
        2.2.2 菌株筛选流程
        2.2.3 菌株初筛
        2.2.4 菌株复筛
        2.2.5 AFM1 提取与测定
        2.2.6 AFM1 标准曲线绘制
        2.2.7 菌株生长曲线测定
    2.3 试验结果
        2.3.1 标准曲线绘制结果
        2.3.2 初筛结果
        2.3.3 复筛结果
        2.3.4 生长曲线测定
    2.4 讨论
    2.5 结论
第三章 降解黄曲霉毒素 M1 菌株的鉴定
    3.1 试验材料
        3.1.1 试验菌株
        3.1.2 培养基
        3.1.3 主要仪器设备
        3.1.4 主要化学试剂
    3.2 试验方法
        3.2.1 菌落形态观察
        3.2.2 菌体形态观察
        3.2.3 Biolog 细菌鉴定
        3.2.4 16SrDNA 分子鉴定及系统发育树构建
    3.3 试验结果
        3.3.1 菌落及菌体形态
        3.3.2 Biolog 生理生化鉴定结果
        3.3.3 16SrDNA 分子鉴定及发育树构建结果
    3.4 讨论
    3.5 结论
第四章 芽孢杆菌 E-1-1-1 降解黄曲霉毒素 M1 条件优化
    4.1 试验材料和方法
        4.1.1 试验菌株
        4.1.2 培养基
        4.1.3 试验仪器
        4.1.4 试验试剂
        4.1.5 菌株培养
    4.2 结果与分析
        4.2.1 营养条件单因素
        4.2.2 培养条件单因素
        4.2.3 正交试验结果
    4.3 结论
第五章 芽孢杆菌 E-1-1-1 降解黄曲霉毒素 M1 机理研究
    5.1 试验材料
        5.1.1 试验菌株
        5.1.2 培养基
        5.1.3 试验仪器
        5.1.4 试验试剂
    5.2 试验方法
        5.2.1 菌株降解曲线测定
        5.2.2 细菌去除 AFM1 机理为降解或吸附的区分
        5.2.3 活性物质属胞内胞外物质的确定
        5.2.4 硫酸铵分级沉淀法提取纯化活性物质
        5.2.5 超滤法分离提取活性物质
        5.2.6 AFM1 提取与测定
    5.3 试验结果
        5.3.1 菌株 E-1-1-1 降解 AFM1 曲线
        5.3.2 菌株去毒方式确定
        5.3.3 菌株 E-1-1-1 降解 AFM1 活性物质位置确定
        5.3.4 硫酸铵分级沉淀法提取纯化活性物质[79]
        5.3.5 超滤所得组分降解率测定
    5.4 讨论
    5.5 结论
第六章 结论
    6.1 本试验主要结论
    6.2 本研究创新点
    6.3 展望
参考文献
在读期间发表的学术论文
作者简介
致谢


【参考文献】：
期刊论文
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[3]黄曲霉毒素生物降解的研究进展[J]. 孙玲玉,柴同杰.  山东农业大学学报(自然科学版). 2012(04)
[4]黄曲霉毒素B1降解菌的分离鉴定及其降解特性[J]. 李超波,李文明,杨文华,李海星,刘晓华,曹郁生.  微生物学报. 2012(09)
[5]乳与乳制品中黄曲霉毒素检测的研究[J]. 吴双明,张海华.  中国乳业. 2012(06)
[6]黄曲霉毒素及其危害[J]. 朱辉.  品牌与标准化. 2012(12)
[7]微生物细胞壁结构及结合真菌毒素的研究进展[J]. 韩鹏飞,贺稚非,李洪军,邹忠义,唐偲雨.  食品科学. 2012(11)
[8]降解黄曲霉毒素微生物筛选中降解与吸附结合作用的区分[J]. 李超波,李文明,杨文华,杨小龙,曹郁生.  食品与发酵工业. 2012(05)
[9]降解黄曲霉毒素枯草芽孢杆菌的解毒性、抗菌性及抗逆性研究[J]. 雷元培,赵丽红,马秋刚,郑文革,高欣,计成.  饲料工业. 2011(24)
[10]黄曲霉毒素生物防治的研究进展[J]. 郝莹,宫小明,董静,孙军.  粮食与饲料工业. 2011(11)

硕士论文
[1]黄曲霉毒素降解酶对饲喂含AFB1日粮肉仔鸡生长性能及健康的影响[D]. 王勇.河北农业大学 2010



本文编号：3470968