DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞生物学特性的影响及其调节睾酮合成机制的研究

发布时间：2021-11-10 04:43

　　脱氢表雄酮（Dehydroepiandrosterone,DHEA）作为胆固醇代谢途径中的重要中间产物,是机体中各种类固醇激素合成的重要前体。已有研究表明,DHEA在调节机体神经系统、免疫系统、骨质代谢、脂肪代谢等方面都发挥着重要作用。目前,大多数学者认为,DHEA主要是在外周靶组织/靶细胞中转化为睾酮或雌二醇而发挥其特有的生物学功能。睾丸间质细胞分布于睾丸曲精小管间的疏松结缔组织,其主要功能是合成和分泌睾酮,血浆睾酮的95%由睾丸间质细胞分泌。本实验室前期研究结果表明,外源性添加DHEA可促进不同生理期实验大鼠血清中睾酮和雌二醇的分泌；在TM-3细胞（小鼠睾丸间质细胞系）上证实,DHEA处理可显著抑制TM-3细胞的增殖,但却能够显著增强TM-3细胞线粒体的功能；同时发现DHEA在TM-3细胞内主要向睾酮和雌二醇进行转化,但其具体机制还不是很清楚。因此,本试验在分离、纯化和鉴定原代大鼠睾丸间质细胞的基础之上,探讨DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞增殖、细胞周期、线粒体膜电位等生物学特性的影响；在证实DHEA影响原代大鼠睾丸间质细胞合成睾酮的基础之上,重点从蛋白水平上检测DHEA对类固醇激素... 

【文章来源】：南京农业大学江苏省 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：104 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
目录
摘要
ABSTRACT
本文部分缩写中英文对照
引言
第一篇 文献综述
    第一章 脱氢表雄酮生物学作用研究进展
        1 DHEA的合成、代谢与分布
        2 DHEA的生物学功能
            2.1 DHEA对神经系统的影响
            2.2 DHEA对免疫系统的影响
            2.3 DHEA的抗氧化作用
            2.4 DHEA对心血管系统的影响
            2.5 DHEA对骨质代谢的影响
        3 DHEA调节机体生理功能的作用机制
            3.1 DHEA的激素样效应
            3.2 DHEA的非激素样效应
        参考文献
    第二章 睾酮的生物合成及其调控机制
        1 睾酮的生物合成
        2 睾酮合成途径中关键因子
            2.1 3β-羟基类固醇脱氢酶
            2.2 17β-羟基类固醇脱氢酶
            2.3 芳香化酶
        3 MAPK-ERK信号通路
        4 类固醇激素与MAPK-ERK信号通路间的关系
        参考文献
第二篇 试验研究
    第三章 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞增殖特性的影响
        摘要
        1 材料和方法
            1.1 主要试剂和仪器
            1.2 原代大鼠睾丸间质细胞的分离、培养和鉴定
            1.3 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞增殖的形态学观察
            1.4 EdU法检测DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞增殖的影响
            1.5 流式细胞术检测DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞周期的影响
            1.6 Real-time PCR法检测细胞周期蛋白mRNA表达水平
            1.7 数据统计分析
        2 结果与分析
            2.1 原代大鼠睾丸间质细胞的分离、培养和鉴定
            2.2 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞增殖的影响
            2.3 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞周期的影响
            2.4 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞周期相关因子mRNA表达的影响
        3 讨论与小结
            3.1 讨论
            3.2 小结
        Abstract
        参考文献
    第四章 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞线粒体功能的影响
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 主要试剂和仪器
            1.2 细胞活力测定
            1.3 电镜样品制备
            1.4 线粒体膜电位(△Ψm)测定
            1.5 线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的检测
            1.6 数据统计分析
        2 结果与分析
            2.1 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞活力的影响
            2.2 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞线粒体超微结构的影响
            2.3 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞线粒体膜电位(△Ψm)的影响
            2.4 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞琥珀酸脱氢酶(SDH)活性的影响
        3 讨论与小结
            3.1 讨论
            3.2 小结
        Abstract
        参考文献
    第五章 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞睾酮合成及关键酶表达的影响
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 主要试剂和仪器
            1.2 放射免疫法检测DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响
            1.3 DHEA对睾酮合成关键酶mRNA表达的影响
            1.4 DHEA对睾酮合成关键酶蛋白表达的影响
            1.5 数据统计分析
        2 结果与分析
            2.1 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞睾酮合成的影响
            2.2 DHEA对睾酮合成关键酶mRNA表达的影响
            2.3 DHEA对睾酮合成关键酶蛋白表达的影响
        3 讨论与小结
            3.1 讨论
            3.2 小结
        Abstract
        参考文献
    第六章 DHEA调节原代大鼠睾丸间质细胞睾酮合成相关信号通路的研究
        摘要
        1 材料与方法
            1.1 主要试剂和仪器
            1.2 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞ERK和p-ERK蛋白表达的影响
            1.3 ERK通路在调节原代大鼠睾丸间质细胞睾酮合成中的作用研究
            1.4 ERK通路对原代大鼠睾丸间质细胞中睾酮合成关键酶蛋白表达的影响
            1.5 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞CREB和p-CREB蛋白表达的影响
            1.6 数据统计分析
        2 结果与分析
            2.1 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞ERK和p-ERK蛋白表达的影响
            2.2 ERK通路在调节原代大鼠睾丸间质细胞睾酮合成中的作用研究
            2.3 ERK通路对原代大鼠睾丸间质细胞中睾酮合成关键酶蛋白表达的影响
            2.4 DHEA对原代大鼠睾丸间质细胞CREB和p-CREB蛋白表达的影响
        3 讨论与小结
            3.1 讨论
            3.2 小结
        Abstract
        参考文献
全文结论
本文创新点
致谢
攻读硕士学位期间论文发表情况


【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]去氢表雄酮抑制肿瘤细胞增殖及其分子机制的研究[D]. 姜艳芳.吉林大学 2005



本文编号：3486599