鸭疫里默氏杆菌gldN和tbdR3基因缺失株的构建及其生物学特性分析
发布时间：2021-11-11 12:27
鸭疫里默氏杆菌（Riemerella anatipestifer,RA）是出现在鸭、鹅和火鸡等多种禽类的一种重要病原菌,其感染给养鸭业带来严重的经济损失。为了有效的防治鸭疫里默氏杆菌,我们从分子水平对其生物学机制进行研究。IX分泌系统（T9SS）,又称为Por分泌系统,是近年来鉴定的、目前仅发现于拟杆菌门中细菌的分泌系统。GenBank上已公布全基因组序列的所有8株鸭疫里默氏杆菌都携带13个编码T9SS核心组分的基因,提示此细菌有完整的IX型分泌系统。因此,T9SS作为鸭疫里默氏杆菌唯一已知的分泌系统,在该细菌与宿主的相互作用及细菌致病过程中作用就尤其值得关注。本研究将通过构建Yb2株gldN基因缺失株来分析其相关的功能。本研究先将gldN基因上下游同源臂连入自杀质粒313,通过接合转导的方法导入鸭疫里默氏杆菌Yb2株,构建获得gldN基因缺失突变株Yb2△gldN;然后将野生株Yb2株的gldN基因ORF连入大肠杆菌-鸭疫里默氏杆菌穿梭表达质粒pRES1,再通过接合转导的方法将重组质粒pRES1-gldN导入缺失株Yb2△gldN中,获得了其回复株cYb2△gldN。然后比较了野生株...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
革兰氏阴性菌分泌系统模型摘自文献(GreenandJoanMecsas.,2016)
农业科学院硕士学位论文 第一章 引蛋白质定位在细胞外膜上，而在其定位的过程中T9SS系统起着重要作用，而且这些蛋白质主过T9SS分泌释放出去(Shoji et al.,2011 ; Kondo et al.,2010)。各种细菌T9SS系统的研究越来越，针对鸭疫里默氏杆菌T9SS转运系统的研究近年来才刚刚开始，2013年，McBride通过研究PorSS分泌系统广泛存在于拟杆菌门中，包括鸭疫里默氏杆菌(McBride and Zhu.,2013)。随后研究证明鸭疫里默氏杆菌的毒力及明胶酶的分泌需要T9SS系统参与(Guo et al.,2017)。这为鸭默氏杆菌T9SS系统的研究奠定了基础。
硕士学位论文 第二章 鸭疫里默氏杆菌 gldN 基因缺失株的构建及其 后细菌在鸭血液和组织中定植数量分析：攻毒结束 24 h 后，分别的 14 只鸭子进行抽血解剖。所抽取的血液直接挂板，而解剖的肝组织放入研磨袋中并加入 3 mL 的无菌 PBS，用研磨仪对组织进行 进行涂布平板，血液以及组织研磨液均在含有卡那霉素（25 μg/m℃ 5%CO2恒温培养箱内培养长出单菌落，记录分析数据。 gldN 基因突变株的构建 gldN 基因左右两侧同源臂 DNA 片段的克隆稀释后的 Yb2 株基因组为模板，用 gldN-L F/R、gldN-R F/R 引物的同源臂片段 gldN-L（图 2-1，泳道 1）、gldN-R（图 2-1，泳道 3）化 E.coli 726 以便得到足量的目的片段进行后续试验，PCR 鉴定阳公司进行测序。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015～2016年山东、河北地区鸭疫里默氏杆菌流行病学调查[J]. 袁小远,王友令,王晓丽,亓丽红,邵桂宾,邵桂平,杨金兴,艾武,王永明. 中国家禽. 2017(04)
[2]鸭疫里默氏杆菌研究概况[J]. 元丽花. 农技服务. 2017(04)
[3]鸭疫里默氏杆菌CH3株tonB1或tonB2基因缺失对生物被膜形成的影响[J]. 孙冰清,苗双,姜盼,崔俊生,陶敏捷,薛亚飞,丁云竹,吴金节,胡青海. 中国预防兽医学报. 2016(03)
[4]鸭疫里默氏杆菌病防治技术进展[J]. 李华坤,孙朋. 今日畜牧兽医. 2014(11)
[5]信阳地区肉鸭场鸭疫里默杆菌流行病学调查[J]. 陈宏智,刘涛,王瑞,曲哲会,刘琨,马超峰. 黑龙江畜牧兽医. 2014(05)
[6]一株鸭疫里默氏杆菌自然弱毒株的鉴定[J]. 苗双,卢凤英,屠晶,倪欣涛,胡青海. 中国兽医科学. 2013(07)
[7]鸭疫里默氏杆菌病的病原及发病特点[J]. 李雪岚,王静,闫丽辉,鞠妍,朱庆虎. 畜牧兽医科技信息. 2013(03)
[8]徐州地区鸭疫里默氏杆菌病的流行病学调查[J]. 钱学智. 中国畜禽种业. 2011(11)
[9]桂林市鸭疫里默氏杆菌的血清型鉴定及耐药性研究[J]. 阳艳洁,蒋福信,王星,曾维军,秦斌,唐前勇,何广,周丽珍. 养禽与禽病防治. 2011(11)
[10]近年我国部分地区鸭疫里默氏杆菌耐药性分析[J]. 孙静,郭浩,王秀玲,常维山. 山东畜牧兽医. 2011(05)
硕士论文
[1]RA CH3株ompA基因缺失株的构建及其部分生物学特性的研究[D]. 崔俊生.安徽农业大学 2016
[2]广东省鸭疫里氏杆菌耐药性调查及floR传播分子特征研究[D]. 张亚楠.华南农业大学 2016
[3]鸭疫里默氏杆菌红霉素耐药机制的研究[D]. 邢林林.山东农业大学 2015
[4]鸭疫里默氏杆菌TonB1和TonB2基因缺失株的构建[D]. 苗双.中国农业科学院 2013
[5]鸭疫里默氏杆菌免疫蛋白质组学及载铁体相互作用蛋白基因缺失株的构建[D]. 屠晶.中国农业科学院 2012
[6]兖州地区鸭传染性浆膜炎流行病学调查及防治[D]. 王振.山东农业大学 2011
本文编号：3488855
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：66 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
革兰氏阴性菌分泌系统模型摘自文献(GreenandJoanMecsas.,2016)
农业科学院硕士学位论文 第一章 引蛋白质定位在细胞外膜上，而在其定位的过程中T9SS系统起着重要作用，而且这些蛋白质主过T9SS分泌释放出去(Shoji et al.,2011 ; Kondo et al.,2010)。各种细菌T9SS系统的研究越来越，针对鸭疫里默氏杆菌T9SS转运系统的研究近年来才刚刚开始，2013年，McBride通过研究PorSS分泌系统广泛存在于拟杆菌门中，包括鸭疫里默氏杆菌(McBride and Zhu.,2013)。随后研究证明鸭疫里默氏杆菌的毒力及明胶酶的分泌需要T9SS系统参与(Guo et al.,2017)。这为鸭默氏杆菌T9SS系统的研究奠定了基础。
硕士学位论文 第二章 鸭疫里默氏杆菌 gldN 基因缺失株的构建及其 后细菌在鸭血液和组织中定植数量分析：攻毒结束 24 h 后，分别的 14 只鸭子进行抽血解剖。所抽取的血液直接挂板，而解剖的肝组织放入研磨袋中并加入 3 mL 的无菌 PBS，用研磨仪对组织进行 进行涂布平板，血液以及组织研磨液均在含有卡那霉素（25 μg/m℃ 5%CO2恒温培养箱内培养长出单菌落，记录分析数据。 gldN 基因突变株的构建 gldN 基因左右两侧同源臂 DNA 片段的克隆稀释后的 Yb2 株基因组为模板，用 gldN-L F/R、gldN-R F/R 引物的同源臂片段 gldN-L（图 2-1，泳道 1）、gldN-R（图 2-1，泳道 3）化 E.coli 726 以便得到足量的目的片段进行后续试验，PCR 鉴定阳公司进行测序。
【参考文献】：
期刊论文
[1]2015～2016年山东、河北地区鸭疫里默氏杆菌流行病学调查[J]. 袁小远,王友令,王晓丽,亓丽红,邵桂宾,邵桂平,杨金兴,艾武,王永明. 中国家禽. 2017(04)
[2]鸭疫里默氏杆菌研究概况[J]. 元丽花. 农技服务. 2017(04)
[3]鸭疫里默氏杆菌CH3株tonB1或tonB2基因缺失对生物被膜形成的影响[J]. 孙冰清,苗双,姜盼,崔俊生,陶敏捷,薛亚飞,丁云竹,吴金节,胡青海. 中国预防兽医学报. 2016(03)
[4]鸭疫里默氏杆菌病防治技术进展[J]. 李华坤,孙朋. 今日畜牧兽医. 2014(11)
[5]信阳地区肉鸭场鸭疫里默杆菌流行病学调查[J]. 陈宏智,刘涛,王瑞,曲哲会,刘琨,马超峰. 黑龙江畜牧兽医. 2014(05)
[6]一株鸭疫里默氏杆菌自然弱毒株的鉴定[J]. 苗双,卢凤英,屠晶,倪欣涛,胡青海. 中国兽医科学. 2013(07)
[7]鸭疫里默氏杆菌病的病原及发病特点[J]. 李雪岚,王静,闫丽辉,鞠妍,朱庆虎. 畜牧兽医科技信息. 2013(03)
[8]徐州地区鸭疫里默氏杆菌病的流行病学调查[J]. 钱学智. 中国畜禽种业. 2011(11)
[9]桂林市鸭疫里默氏杆菌的血清型鉴定及耐药性研究[J]. 阳艳洁,蒋福信,王星,曾维军,秦斌,唐前勇,何广,周丽珍. 养禽与禽病防治. 2011(11)
[10]近年我国部分地区鸭疫里默氏杆菌耐药性分析[J]. 孙静,郭浩,王秀玲,常维山. 山东畜牧兽医. 2011(05)
硕士论文
[1]RA CH3株ompA基因缺失株的构建及其部分生物学特性的研究[D]. 崔俊生.安徽农业大学 2016
[2]广东省鸭疫里氏杆菌耐药性调查及floR传播分子特征研究[D]. 张亚楠.华南农业大学 2016
[3]鸭疫里默氏杆菌红霉素耐药机制的研究[D]. 邢林林.山东农业大学 2015
[4]鸭疫里默氏杆菌TonB1和TonB2基因缺失株的构建[D]. 苗双.中国农业科学院 2013
[5]鸭疫里默氏杆菌免疫蛋白质组学及载铁体相互作用蛋白基因缺失株的构建[D]. 屠晶.中国农业科学院 2012
[6]兖州地区鸭传染性浆膜炎流行病学调查及防治[D]. 王振.山东农业大学 2011
本文编号：3488855
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