鸡白痢沙门菌LPS合成和生物被膜形成相关基因缺失株的构建及免疫效力评价
发布时间：2021-11-11 16:00
鸡白痢是由鸡白痢沙门菌引起的一种严重危害家禽生产的可经垂直传播的传染病。《国家中长期动物疫病防治规划（2012-2020年）》将其确定为优先防治病种,对种鸡群提出净化要求。在我国及其他发展中国家,常采用药物预防和控制该病,虽有一定的效果,但不能达到清除病原的目的,且长期使用抗生素会产生多重耐药性和药物残留等问题。疫苗免疫是防控该病的有效措施之一,常用疫苗为沙门菌减毒活疫苗。全血玻片凝集试验是养殖场检疫和淘汰阳性鸡的常用方法,但正常情况下无法区别自然感染动物和免疫动物（Differentiation of Infected and Vaccinated Animals,DIVA）,因此研制具有 DIVA 特性的疫苗对种群的净化具有积极作用。鸡白痢沙门菌LPS合成相关基因缺失株S6702△rfaL和S6702△rfaG由本实验室构建,具有致病力低、免疫原性高和DIVA等特性。生物被膜作为鸡白痢沙门菌对抗不良环境而形成的结构性细菌群落,可导致持续感染。为了进一步降低沙门菌的致病力、提高其安全性,本研究利用λ-Red同源重组技术在LPS合成相关基因缺失株的基础上,进一步构建鸡白痢沙门菌生物被膜...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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３．３．２生物被膜形成能力测定??结晶紫染色定量法测定生物被膜的形成能力，经０．４％的结晶紫染色２０ｍｉｎ，肉眼观察??单缺失株与野生株无差异，双基因缺失株和三基因缺失株均无生物被膜形成能力（图１－７??Ａ）。用新鲜的溶解液溶解后测定〇Ｄ５５〇值，野生株Ｓ６７０２的ＯＤ５５〇值为０．５６９?±?０，０３２，??阴对照ＯＤ５５〇的值为０．１２５?±０．０１２。与野生株相比，Ｓ６７０２Ａｒ／ａＬ生物形成能力显著减低??（尸＜０．０５）；?Ｓ６７０２Ａｒ／〇Ｇ的生物膜形成能力无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；双基因缺失株??Ｓ６７０２Ａ吻ＺＡｃｙｇ／４、和三基因缺失株?、??Ｓ６７０２Ａｒ／ａＧＡｃ艰４Ａｏ—ｉ？的生物被膜形成能力极显著降低（Ｐ＜０．０１）（图１－７Ｂ）。??（Ａ）??△挪?ＡｒｆｕＧ??Ａ?Ａｒｆｉｉｌ?ＡｃｓｇＡ?Ａｒｆｕ６＇?ＡｃｓｇＡ??Ｂｌａｎｋ?Ｓ６７０２?Ａｒ／ａＬ?Ａ〇ｍｐＲ?Ｂｌａｎｋ?Ｓ６７０２?Ａｒ／，Ｇ?＾?Ａ〇ｍｐＲ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]携带NDV HN基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌口服免疫原性研究[J]. 丁轲,余祖华,李蒙,郁川,尚珂,程相朝,陈桂华,廖成水,贾艳艳,汪洋,张春杰. 畜牧兽医学报. 2016(10)
[2]细菌生物膜的结构及形成机制的研究进展[J]. 祝司霞. 沈阳医学院学报. 2015(02)
[3]肉鸡产业链中沙门菌流行情况及其耐药性[J]. 谢懋英,赖婧,马立才,吴聪明,左之才. 中国兽医学报. 2014(11)
[4]细菌生物膜的基本特性研究进展[J]. 祝司霞. 科技视界. 2014(30)
[5]禽沙门菌疫苗的免疫保护机制研究进展[J]. Liliana Revolledo,钟蕾. 中国家禽. 2013(02)
[6]天然外膜蛋白A对鸡肠炎沙门菌无保护作用[J]. 朱静. 中国家禽. 2012(20)
[7]减毒鸡白痢沙门氏菌ΔcrpC79-13株的构建及其对雏鸡的免疫活性[J]. 程相朝,郁川,廖成水,赵战勤,张春杰,李银聚,吴庭才,李小康,李正. 中国兽医科学. 2012(01)
[8]鸡大肠埃希菌与沙门菌混合感染的病原分离鉴定及药敏试验[J]. 李卫,白家媛,蔡双双. 动物医学进展. 2011(01)
[9]肠炎沙门菌间接ELISA检测方法的建立[J]. 康孟佼,朱春红,蒋颖,姚丰华,吴娟,段小丽,朱国强. 中国家禽. 2010(15)
[10]沙门氏菌载体在疫苗应用中的研究进展[J]. 安芳兰,刘学荣,宋玉霞,武发菊,董文教,刘萍,牟克斌,黄银君,黄安仓. 中国畜牧兽医. 2010(06)
博士论文
[1]肠炎沙门氏菌生物被膜形成相关基因鉴定、缺失株构建及生物学特性研究[D]. 董洪燕.扬州大学 2011
硕士论文
[1]鸡白痢沙门菌LPS合成相关基因缺失株的构建及免疫效力评价[D]. 吴白.扬州大学 2016
[2]沙门菌多重PCR检测方法的建立及鸡白痢沙门菌aroA缺失株的构建[D]. 杨林.扬州大学 2014
[3]沙门氏菌分离鉴定、生物被膜形成相关基因缺失突变株的构建及生物学特性研究[D]. 孙化露.扬州大学 2012
本文编号：3489142
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：69 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
6702ArfaGACagA构建策略Fig.l-1Thesimpleoftargetgene:咖GandesgAgenedisnaptionstrategy
３．３．２生物被膜形成能力测定??结晶紫染色定量法测定生物被膜的形成能力，经０．４％的结晶紫染色２０ｍｉｎ，肉眼观察??单缺失株与野生株无差异，双基因缺失株和三基因缺失株均无生物被膜形成能力（图１－７??Ａ）。用新鲜的溶解液溶解后测定〇Ｄ５５〇值，野生株Ｓ６７０２的ＯＤ５５〇值为０．５６９?±?０，０３２，??阴对照ＯＤ５５〇的值为０．１２５?±０．０１２。与野生株相比，Ｓ６７０２Ａｒ／ａＬ生物形成能力显著减低??（尸＜０．０５）；?Ｓ６７０２Ａｒ／〇Ｇ的生物膜形成能力无显著性差异（Ｐ＞０．０５）；双基因缺失株??Ｓ６７０２Ａ吻ＺＡｃｙｇ／４、和三基因缺失株?、??Ｓ６７０２Ａｒ／ａＧＡｃ艰４Ａｏ—ｉ？的生物被膜形成能力极显著降低（Ｐ＜０．０１）（图１－７Ｂ）。??（Ａ）??△挪?ＡｒｆｕＧ??Ａ?Ａｒｆｉｉｌ?ＡｃｓｇＡ?Ａｒｆｕ６＇?ＡｃｓｇＡ??Ｂｌａｎｋ?Ｓ６７０２?Ａｒ／ａＬ?Ａ〇ｍｐＲ?Ｂｌａｎｋ?Ｓ６７０２?Ａｒ／，Ｇ?＾?Ａ〇ｍｐＲ??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]携带NDV HN基因疫苗的重组减毒鸡白痢沙门菌口服免疫原性研究[J]. 丁轲,余祖华,李蒙,郁川,尚珂,程相朝,陈桂华,廖成水,贾艳艳,汪洋,张春杰. 畜牧兽医学报. 2016(10)
[2]细菌生物膜的结构及形成机制的研究进展[J]. 祝司霞. 沈阳医学院学报. 2015(02)
[3]肉鸡产业链中沙门菌流行情况及其耐药性[J]. 谢懋英,赖婧,马立才,吴聪明,左之才. 中国兽医学报. 2014(11)
[4]细菌生物膜的基本特性研究进展[J]. 祝司霞. 科技视界. 2014(30)
[5]禽沙门菌疫苗的免疫保护机制研究进展[J]. Liliana Revolledo,钟蕾. 中国家禽. 2013(02)
[6]天然外膜蛋白A对鸡肠炎沙门菌无保护作用[J]. 朱静. 中国家禽. 2012(20)
[7]减毒鸡白痢沙门氏菌ΔcrpC79-13株的构建及其对雏鸡的免疫活性[J]. 程相朝,郁川,廖成水,赵战勤,张春杰,李银聚,吴庭才,李小康,李正. 中国兽医科学. 2012(01)
[8]鸡大肠埃希菌与沙门菌混合感染的病原分离鉴定及药敏试验[J]. 李卫,白家媛,蔡双双. 动物医学进展. 2011(01)
[9]肠炎沙门菌间接ELISA检测方法的建立[J]. 康孟佼,朱春红,蒋颖,姚丰华,吴娟,段小丽,朱国强. 中国家禽. 2010(15)
[10]沙门氏菌载体在疫苗应用中的研究进展[J]. 安芳兰,刘学荣,宋玉霞,武发菊,董文教,刘萍,牟克斌,黄银君,黄安仓. 中国畜牧兽医. 2010(06)
博士论文
[1]肠炎沙门氏菌生物被膜形成相关基因鉴定、缺失株构建及生物学特性研究[D]. 董洪燕.扬州大学 2011
硕士论文
[1]鸡白痢沙门菌LPS合成相关基因缺失株的构建及免疫效力评价[D]. 吴白.扬州大学 2016
[2]沙门菌多重PCR检测方法的建立及鸡白痢沙门菌aroA缺失株的构建[D]. 杨林.扬州大学 2014
[3]沙门氏菌分离鉴定、生物被膜形成相关基因缺失突变株的构建及生物学特性研究[D]. 孙化露.扬州大学 2012
本文编号：3489142
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