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PEDV感染介导Vero E6细胞差异表达蛋白筛选及功能解析

发布时间:2021-11-12 06:20
  猪流行性腹泻(porcine epidemic diarrhea, PED)是由猪流行性腹泻病毒(porcineepidemic diarrhea virus, PEDV)引起的以腹泻、呕吐、脱水为主要特征的一种肠道传染病,对哺乳仔猪致死率可达90%。近年来,PEDV的感染呈现明显抬头趋势。开展PEDV致病机理相关的基础研究具有现实意义和紧迫性。本研究中,我们使用等重同位素多标签相对定量蛋白质组学(iTRAQ)技术对PEDV感染的Vero E6细胞(V组,3个生物重复)和PEDV未感染的Vero E6细胞(C组,3个生物重复)差异表达的蛋白进行了筛选和功能解析。结果显示,在V组和C组中,鉴定肽段总数为15564个,鉴定蛋白数为3178个,有定量信息的蛋白数为3171个。在V组和C组之间,一共存在126个差异表达的蛋白(p<0.05;V/C或C/V>1.2),其中表达水平上调的蛋白数为58个,表达水平下调蛋白数为68个。GO分析结果显示,126个差异表达蛋白的分子功能主要为结合作用和催化活性。KEGG Pathways分析结果表明,126个差异表达蛋白主要参与代谢、有机体系统... 

【文章来源】:黑龙江八一农垦大学黑龙江省

【文章页数】:79 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

PEDV感染介导Vero E6细胞差异表达蛋白筛选及功能解析


iTRAQ技术实验操作流程

PEDV感染介导Vero E6细胞差异表达蛋白筛选及功能解析


感染PEDV的VeroE6细胞的制备:VeroE6细胞PEDV感染组为V1-V3(三个生物学重复);对照组为C1-C3(三个生物学重复)

PEDV感染介导Vero E6细胞差异表达蛋白筛选及功能解析


PEDV在VeroE6细胞上的繁殖Westernblot鉴定:对照组为C1-C3(三个生物学重复);VeroE6细胞PEDV感染组为V1-V3(三个生物学重复)

【参考文献】:
期刊论文
[1]猪流行性腹泻病毒N蛋白与Vero E6核仁蛋白Fibrillarin的亚细胞定位分析[J]. 石达,陈建飞,时洪艳,张志榜,冯力.  中国预防兽医学报. 2011(11)
[2]2010—2011年仔猪腹泻的病因分析和防控措施[J]. 陈建飞,刘孝珍,时洪艳,仇华吉,刘长明,冯力.  养猪. 2011(05)
[3]流行性腹泻病毒E基因与pSFV重组RNA的构建[J]. 余丽芸,侯喜林.  黑龙江八一农垦大学学报. 2005(01)
[4]差异蛋白质组学及其应用[J]. 何大澄,肖雪媛.  北京师范大学学报(自然科学版). 2002(04)
[5]Vero细胞培养特性的研究[J]. 房廉洁,吕晓萍,董丽华.  白求恩医科大学学报. 2000(03)
[6]猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻病毒的免疫电镜诊断的研究[J]. 王继科,刘长明,马思奇,王明,魏凤祥,于文涛,周金法.  中国畜禽传染病. 1991(02)
[7]应用猪胎肠单层细胞培养猪流行性腹泻病毒的研究[J]. 宣华,邢德坤,王殿瀛,朱维正,赵凤玉,巩怀俊,费思阁.  兽医大学学报. 1984(03)
[8]免疫酶技术证实:国内的猪传染性胃肠炎病毒与比利时的CLV在血清学上相一致[J]. 钱永清,王兆久,刘洪云,唐骐骏,严仲烈.  兽医科技杂志. 1981(08)
[9]吉林省“猪传染性胃肠炎”疫情调查、人工感染传代和病毒分离试验[J]. 李佑民,柳桂信,朱维正,邢德坤,李忠来,武云莲,钱顺生.  家畜传染病. 1981(01)
[10]猪传染性胃肠炎荧光抗体诊断法的研究——国内毒株(吉毒)芡光抗体的制备和应用[J]. 朱维正,李佑民,邢德坤.  家畜传染病. 1980(04)



本文编号:3490340

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