抑制素在牛体外有腔卵泡中的表达规律及其对牛卵泡颗粒细胞增殖的影响
发布时间：2021-11-14 12:07
抑制素A能通过垂体-性腺轴负反馈调节垂体合成和分泌的促卵泡素（Follicle-stimulating Hormone,FSH）,进而调节卵泡的发育。因此,抑制素在调控卵泡发育、生殖激素合成与分泌以及调节细胞增殖等方面具有重要调控作用。以往关于抑制素的研究主要集中在抑制素对FSH分泌的调节作用,但是外源FSH处理对牛卵巢抑制素合成和分泌的影响尚不清楚。因此,本试验一通过牛体外有腔卵泡培养模型,研究不同直径卵泡中抑制素基因的表达规律以及不同浓度梯度FSH处理对牛卵巢抑制素合成和分泌的影响。此外,曾有研究报道,抑制素在调节猪卵泡颗粒细胞增殖方面也发挥着至关重要的作用,但是抑制素对牛卵泡颗粒细胞增殖的作用尚不清楚。因此,试验二通过不同浓度梯度抑制素A体外处理牛卵泡颗粒细胞,研究其对颗粒细胞增殖的影响。试验研究内容和结果如下:试验按照卵泡直径分离获得屠宰场卵巢的大中小（9-11、5-8、≤4 mm）有腔卵泡,体外采集其颗粒细胞和卵泡液,分别通过荧光定量PCR和酶联免疫吸附实验（ELISA）检测了不同直径卵泡颗粒细胞中抑制素基因的表达水平和卵泡液中促性腺激素（FSH和LH）的浓度。荧光定量PCR...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
抑制素的分子结构
中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论2图1-1抑制素的分子结构Fig.1-1Subunitsofinhibin1.2.2抑制素与雌性动物生殖生理1.2.2.1抑制素与激素分泌（1）对Activin的影响ACT、INH和骨形态发生蛋白（Bonemorphogeneticprotein,BMP）（TAKEDAetal.,2007）均属于TGF-β超家族，其中ACT和INH共用同结构的β亚基。研究发现，ACT的合成与分泌受INH等多种内源性抑制剂的调节（DEKRETSERetal.,2002），INH可竞争性结合β亚基，从而调节ACT的合成与分泌（WIJAYARATHNAandKRETSER,2016）。（2）对FSH合成的影响FSH合成与分泌的主要调节方式包括两种：一是通过下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH），进而引起腺垂体促性腺激素的节律性释放。二是性腺激素的调节，性腺除了产生雄激素、雌激素和孕激素等类固醇激素参与生殖功能的调节外，还发现了INH、卵泡抑素（Follistatin）、ACT等激素。（EZRAandWYLIE,2003;BERNARDetal.,2001）。抑制素是由卵巢颗粒细胞产生的信号分子，通过垂体-性腺轴负反馈调节FSH的分泌（图1-2）。抑制素通过与ACT竞争性结合ACTII型受体（ACTRII）减弱ACT的作用效果，从而降低ACT对垂体FSH合成与分泌的正反馈调节的影响（Mathews，1994;FRANCESCAetal.,2018），达到负向调节FSH分泌的效果。此外，FSH也能结合ACT，通过阻止ACT与ACTRII的结合而使ACT失活，从而间接抑制FSH的合成和分泌（YANetal.,2015）。图1-2下丘脑-垂体-性腺轴的抑制素调节Fig.1-2Inhibinregulationofthehypothalamo-pituitary-gonadalaxis
中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论31.2.2.2抑制素与卵泡发育大多数动物（包括人类）在胎儿时期的一定时间内就已经完成卵原细胞增殖和原始卵泡的储备。出生后，每头牛的卵巢共含原始卵泡大约150000枚，形成原始卵泡库。每枚原始卵泡均由一枚初级卵母细胞和一层扁平的颗粒细胞组成（图1-3）。在雌性家畜的生殖（繁殖）时期，卵泡生长动态的特征是一群原始卵泡从原始卵泡库中被募集进入生长卵泡库，然后生长发育，最终得以成熟排卵或闭锁退化。图1-3卵巢卵泡池及其封闭的卵母细胞对热应激的抵抗力/敏感度随阶段变化（引自ROTH,2017）Fig.1-3Astage-dependentpatternofresistance/sensitivityoftheovarianpooloffolliclesandtheirenclosedoocytestoheatstress牛卵巢上原始卵泡发育到排卵卵泡需要大约180天的时间。原始卵泡发育到排卵前阶段大概经历三个阶段（ORISAKAetal.,2009;CAMPBELL,2009）。第一阶段，即卵泡的募集阶段。该阶段为非促性腺激素依赖性阶段（KIM,2012;NILSSONandSKINNER,2009）。第二阶段，随着原始卵泡的募集和发育，卵泡直径从200μm增长到1mm，并开始形成初级卵泡，初级卵泡包含的卵母细胞直径约80μm。在此阶段大量增殖的卵泡颗粒细胞和膜细胞也表达FSH受体（FSHR）和黄体生成素（LH）受体（LHR）。第三阶段，优势化阶段。卵泡继续发育，卵泡腔继续增大并充满卵泡液，卵泡直径达1.5-2mm，卵母细胞也生长至直径80-110μm（ORISAKAetal.,2009;CORTVRINDTandSMIZ,2001）。在此阶段，颗粒细胞分化形成壁层和窦层颗粒层，卵丘细胞包围卵母细胞。研究表明，卵泡内INHA的浓度只占INHB总量的一小部分，并且在卵泡选择后才开始上升（图1-5）。抑制素A由发育中的卵泡分泌，其浓度通常反映卵泡的发育能力，特别是在?
【参考文献】：
期刊论文
[1]单侧隐睾对患儿血清抗苗勒管激素及抑制素B水平的影响研究[J]. 曹顺顺,单小鸥,胡杨杨. 中华男科学杂志. 2016(09)
[2]抑制素基因的研究进展[J]. 薛昱,储明星,周忠孝. 遗传. 2004(05)
硕士论文
[1]抑制素被动免疫对羊生殖激素及卵泡颗粒细胞凋亡的影响[D]. 陈守云.四川农业大学 2008
本文编号：3494609
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：60 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
抑制素的分子结构
中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论2图1-1抑制素的分子结构Fig.1-1Subunitsofinhibin1.2.2抑制素与雌性动物生殖生理1.2.2.1抑制素与激素分泌（1）对Activin的影响ACT、INH和骨形态发生蛋白（Bonemorphogeneticprotein,BMP）（TAKEDAetal.,2007）均属于TGF-β超家族，其中ACT和INH共用同结构的β亚基。研究发现，ACT的合成与分泌受INH等多种内源性抑制剂的调节（DEKRETSERetal.,2002），INH可竞争性结合β亚基，从而调节ACT的合成与分泌（WIJAYARATHNAandKRETSER,2016）。（2）对FSH合成的影响FSH合成与分泌的主要调节方式包括两种：一是通过下丘脑促性腺激素释放激素（GnRH），进而引起腺垂体促性腺激素的节律性释放。二是性腺激素的调节，性腺除了产生雄激素、雌激素和孕激素等类固醇激素参与生殖功能的调节外，还发现了INH、卵泡抑素（Follistatin）、ACT等激素。（EZRAandWYLIE,2003;BERNARDetal.,2001）。抑制素是由卵巢颗粒细胞产生的信号分子，通过垂体-性腺轴负反馈调节FSH的分泌（图1-2）。抑制素通过与ACT竞争性结合ACTII型受体（ACTRII）减弱ACT的作用效果，从而降低ACT对垂体FSH合成与分泌的正反馈调节的影响（Mathews，1994;FRANCESCAetal.,2018），达到负向调节FSH分泌的效果。此外，FSH也能结合ACT，通过阻止ACT与ACTRII的结合而使ACT失活，从而间接抑制FSH的合成和分泌（YANetal.,2015）。图1-2下丘脑-垂体-性腺轴的抑制素调节Fig.1-2Inhibinregulationofthehypothalamo-pituitary-gonadalaxis
中国农业科学院硕士学位论文第一章绪论31.2.2.2抑制素与卵泡发育大多数动物（包括人类）在胎儿时期的一定时间内就已经完成卵原细胞增殖和原始卵泡的储备。出生后，每头牛的卵巢共含原始卵泡大约150000枚，形成原始卵泡库。每枚原始卵泡均由一枚初级卵母细胞和一层扁平的颗粒细胞组成（图1-3）。在雌性家畜的生殖（繁殖）时期，卵泡生长动态的特征是一群原始卵泡从原始卵泡库中被募集进入生长卵泡库，然后生长发育，最终得以成熟排卵或闭锁退化。图1-3卵巢卵泡池及其封闭的卵母细胞对热应激的抵抗力/敏感度随阶段变化（引自ROTH,2017）Fig.1-3Astage-dependentpatternofresistance/sensitivityoftheovarianpooloffolliclesandtheirenclosedoocytestoheatstress牛卵巢上原始卵泡发育到排卵卵泡需要大约180天的时间。原始卵泡发育到排卵前阶段大概经历三个阶段（ORISAKAetal.,2009;CAMPBELL,2009）。第一阶段，即卵泡的募集阶段。该阶段为非促性腺激素依赖性阶段（KIM,2012;NILSSONandSKINNER,2009）。第二阶段，随着原始卵泡的募集和发育，卵泡直径从200μm增长到1mm，并开始形成初级卵泡，初级卵泡包含的卵母细胞直径约80μm。在此阶段大量增殖的卵泡颗粒细胞和膜细胞也表达FSH受体（FSHR）和黄体生成素（LH）受体（LHR）。第三阶段，优势化阶段。卵泡继续发育，卵泡腔继续增大并充满卵泡液，卵泡直径达1.5-2mm，卵母细胞也生长至直径80-110μm（ORISAKAetal.,2009;CORTVRINDTandSMIZ,2001）。在此阶段，颗粒细胞分化形成壁层和窦层颗粒层，卵丘细胞包围卵母细胞。研究表明，卵泡内INHA的浓度只占INHB总量的一小部分，并且在卵泡选择后才开始上升（图1-5）。抑制素A由发育中的卵泡分泌，其浓度通常反映卵泡的发育能力，特别是在?
【参考文献】：
期刊论文
[1]单侧隐睾对患儿血清抗苗勒管激素及抑制素B水平的影响研究[J]. 曹顺顺,单小鸥,胡杨杨. 中华男科学杂志. 2016(09)
[2]抑制素基因的研究进展[J]. 薛昱,储明星,周忠孝. 遗传. 2004(05)
硕士论文
[1]抑制素被动免疫对羊生殖激素及卵泡颗粒细胞凋亡的影响[D]. 陈守云.四川农业大学 2008
本文编号：3494609
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