催乳素对绵羊颗粒细胞的增殖与凋亡、激素分泌及相关基因表达的影响
发布时间：2021-11-14 13:58
催乳素（Prolactin,PRL）是由单基因编码的多肽类激素,PRL不仅可以启动和维持哺乳动物泌乳,还会影响雌性动物卵巢发育和排卵,然而关于PRL对卵泡发育作用研究较少,PRL在绵羊卵泡发育过程中的作用机制未见报道。颗粒细胞作为卵泡的重要组成结构,除了可以支持卵泡生长外,颗粒细胞分泌的激素还可以维持卵母细胞发育成熟,因此可以通过探究PRL对绵羊颗粒细胞功能的影响来阐明PRL在卵泡发育及闭锁中的生物学功能。本试验以1岁左右小尾寒羊卵巢颗粒细胞为试验材料,通过外源添加不同浓度PRL培养颗粒细胞,利用CCK-8法测定颗粒细胞增殖、Annexin V-FITC/PI染色颗粒细胞、流式细胞仪检测颗粒细胞凋亡、ELISA试剂盒检测颗粒细胞培养液上清中雌激素（E2）和孕酮（P4）含量、qRT-PCR检测颗粒细胞凋亡和激素分泌相关基因相对表达量等方法,以期研究PRL对绵羊卵巢颗粒细胞增殖凋亡和激素分泌的影响,阐明PRL调节绵羊卵泡发育机制,试验主要获得以下研究结果:（1）在绵羊卵巢颗粒细胞体外培养体系,分别加入不同浓度的PRL（0、0.05、0.5、5μg/mL）,连续培养颗粒细胞7d,每隔24h测...
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]重组胰岛素生长因子-1对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的研究[J]. 杨玲玲,何艳桃,王宇欣,马会明,徐仙. 医学理论与实践. 2020(06)
[2]小尾寒羊和苏尼特羊从短光照到长光照过程中促黄体素和催乳素的变化特征[J]. 夏青,张金龙,狄冉,贺小云,张效生,王翔宇,胡文萍,刘秋月,储明星. 农业生物技术学报. 2020(03)
[3]哺乳动物原始卵泡形成与发育的研究进展[J]. 阳美霞,张羽芳,汤亚茹,张虹亮,王水莲. 畜牧兽医学报. 2020(03)
[4]畜禽的催乳素受体基因研究进展[J]. 时坤鹏,卢小宁,黄志阳,陈梦柯,马永康,巩慧荣,范征宇,胡琦杭,黄高想,曹恒,付学言,樊红灯,白俊艳. 当代畜禽养殖业. 2020(01)
[5]添加外源激素FSH对绵羊卵丘颗粒细胞增殖的影响[J]. 滑留帅,赵培杰,梁浩,王璟,柏中林,徐照学,王二耀. 黑龙江畜牧兽医. 2020(02)
[6]哺乳动物卵巢卵泡发育调控机制研究进展[J]. 张焱,张华. 生理学报. 2020(01)
[7]甘加藏羊发情周期垂体和卵巢中PRLR基因表达与组织分布的研究[J]. 周凯仁,何玉琴,葛闻博,张全伟,杨大鹏,王霞,陈卫刚,包莹莹. 农业生物技术学报. 2019(10)
[8]牛卵泡颗粒细胞中生长相关基因的表达研究[J]. 马丽珠,郑宇新,王立强,江中良. 家畜生态学报. 2019(09)
[9]miR-383通过下调细胞周期相关蛋白的表达抑制小鼠卵泡颗粒细胞的增殖[J]. 李振淼,李文. 细胞与分子免疫学杂志. 2019(06)
[10]基于生长分化因子-9调控的补肾法治疗卵巢早衰研究进展[J]. 王姝婉,梁嘉丽,杨静,秦佳佳. 中国中医药信息杂志. 2018(10)
博士论文
[1]FSH调控小鼠卵泡闭锁及卵泡颗粒细胞Cyp1b1基因表达机制[D]. 周晓龙.南京农业大学 2013
硕士论文
[1]TGIF1对奶山羊卵巢颗粒细胞E2/P4分泌及凋亡作用的研究[D]. 曹贺然.西北农林科技大学 2019
[2]Chk1在猪卵母细胞减数分裂成熟过程中的作用及调控机制[D]. 聂正文.华中农业大学 2017
[3]不同浓度催乳素对人早孕滋养层细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响[D]. 黄华生.广西医科大学 2017
[4]Ghrelin在绵羊颗粒细胞拟黄体化过程中的作用[D]. 菅瑞珍.内蒙古农业大学 2013
[5]类固醇激素合成酶及相关受体表达与猪卵泡闭锁过程的关系研究[D]. 张金璧.南京农业大学 2010
[6]鸡PRL、PRLR基因表达及其与繁殖性能的关系[D]. 汪峰.南京农业大学 2007
[7]海门山羊早期胚胎形态观察及泌尿生殖器官发生的研究[D]. 侯庆文.扬州大学 2002
本文编号：3494765
【文章来源】：河北农业大学河北省
【文章页数】：57 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３－３?ＰＲＬ处理后绵羊颗粒细胞的凋亡??Ｆｉｇ３－３?Ｔｒｅａｔｍｅｎｔ?ｗｉｔｈ?ＰＲＬ?ｏｎ?ａｐｏｐｔｏｓｉｓ?ｉｎ?ｃｕｌｔｕｒｅｄ?ｓｈｅｅｐ?ｇｒａｎ?
ｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ??（Ｐ＜０．０５）?．?Ｉｎ?ｔｈｅ?ｓａｍｅ?ｃｏｌｕｍｎ，?ｖａｌｕｅｓ?ｗｉｔｈ?＊?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ?（Ｐ＜０．０５?）??ｎｏ?＊?ｉｎｄｉｃａｔｅ?ｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ?ｗａｓ?ｎｏｔ?ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔ?Ｃ／＾０．０５）．??３．６绵羊颗粒细胞总ＲＮＡ质量??绵羊颗粒细胞总ＲＮＡ经核酸蛋白检测仪检测分析表明：ＯＤ２６０／２８０值为１．８？２．０；??１％琼脂糖凝胶电泳结果３条带（图３－４），３条带从上到下分别为２８３『１＾八、１８３『１＾八??和５ＳｒＲＮＡ，表明绵羊颗粒细胞ＲＮＡ提取质量较好，可以用于ＲＴ－ｑＰＣＲ试验。??５Ｓ??图３－４颗粒细胞ＲＮＡ琼脂糖胶电泳图??Ｆｉｇ３－４?Ａｇａｒｏｓｅ?ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｏｇｒａｍ?ｆｏｒ?ｔｏｔａｌ?ＲＮＡ?ｆｒｏｍ?ｓｈｅｅｐ?ｇｒａｎｕｌｏｓａ?ｃｅｌｌ??２０??
?催乳素对绵羊颗粒细胞的增殖与凋亡、激素分泌及相关基因表达的影响???３．７不同浓度ＰＲＬ对绵羊颗粒细胞凋亡相关基因表达的影响??不同浓度ＰＲＬ（０、０．０５、０．５、５ｐｇ／ｍＬ）处理绵羊卵巢颗粒细胞２４ｈ后对５ｃ／－２、??５ａｘ、／？５３、Ｃａ＾ｍｓｅ－３ｍＲＮＡ相对表达量影响结果见图３－５。由图３－５可知，与对照??组相比，Ａ?组（０．０５?ｐｇ／ｍＬ）、Ｂ?组（０．５?ｐｇ／ｍＬ）和?Ｃ?组（５?｜ｉｇ／ｍＬ）?ＰＲＬ?处理颗粒??细胞后５ｃ／－２?ｍＲＮＡ相对表达量升高，其中Ｂ组和Ｃ组显著高于对照组和Ａ组??（Ｐ＜０．０５），?Ｂ组和Ｃ组、Ａ组和对照组５ｄ－２?ｍＲＮＡ相对表达量差异不显著（Ｐ＞０．０５）??（见图３－５ａ）；?Ａ组ｍＲＮＡ相对表达量显著高于对照组、Ｂ组和Ｃ组（Ｐ＜０．０５?），??Ｃ组Ｓｏｘ?ｍＲＮＡ相对表达量显著低于对照组（尸＜０．０５），Ｂ组与对照组、Ｃ组差异不??显著（／＾＞０．０５）（见图３－５ｂ）；?Ａ组／７５３?ｍＲＮＡ相对表达量显著高于对照组、Ｂ组和??Ｃ组（尸＜０．０５），对照组、Ｂ组和Ｃ组之间差异不显著（办０．０５）（见图３－５ｃ）；对照??组颗粒细胞Ｃ＇ａｓ／ｗｄ?ｍＲＮＡ相对表达量与各试验组之间差异不显著（／＞＞０．０５）（见??图?３－５ｄ）??３?ｂ??肖■?Ｄ！?２．５－ｉ?ｗ?ｘ??＾?ｃ??￡?〇?２?〇－?￥?＾?．?ｃ?ａｂ??ｂ?ｂ?１０?ｂ?ＪＬ?ａ??ｉｋｕ?ｉ：ｌｉｌｕ??０?０．０５?０．５?５?０?０．０５?０．５?５??ＰＲＬ浓度（ｊｊｑＭｉＬ｝?Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ?ＰＲＬ浓度（｜ｊｇ／ｍＬ）?Ｃｏｎｃｅｎｔ
【参考文献】：
期刊论文
[1]重组胰岛素生长因子-1对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的研究[J]. 杨玲玲,何艳桃,王宇欣,马会明,徐仙. 医学理论与实践. 2020(06)
[2]小尾寒羊和苏尼特羊从短光照到长光照过程中促黄体素和催乳素的变化特征[J]. 夏青,张金龙,狄冉,贺小云,张效生,王翔宇,胡文萍,刘秋月,储明星. 农业生物技术学报. 2020(03)
[3]哺乳动物原始卵泡形成与发育的研究进展[J]. 阳美霞,张羽芳,汤亚茹,张虹亮,王水莲. 畜牧兽医学报. 2020(03)
[4]畜禽的催乳素受体基因研究进展[J]. 时坤鹏,卢小宁,黄志阳,陈梦柯,马永康,巩慧荣,范征宇,胡琦杭,黄高想,曹恒,付学言,樊红灯,白俊艳. 当代畜禽养殖业. 2020(01)
[5]添加外源激素FSH对绵羊卵丘颗粒细胞增殖的影响[J]. 滑留帅,赵培杰,梁浩,王璟,柏中林,徐照学,王二耀. 黑龙江畜牧兽医. 2020(02)
[6]哺乳动物卵巢卵泡发育调控机制研究进展[J]. 张焱,张华. 生理学报. 2020(01)
[7]甘加藏羊发情周期垂体和卵巢中PRLR基因表达与组织分布的研究[J]. 周凯仁,何玉琴,葛闻博,张全伟,杨大鹏,王霞,陈卫刚,包莹莹. 农业生物技术学报. 2019(10)
[8]牛卵泡颗粒细胞中生长相关基因的表达研究[J]. 马丽珠,郑宇新,王立强,江中良. 家畜生态学报. 2019(09)
[9]miR-383通过下调细胞周期相关蛋白的表达抑制小鼠卵泡颗粒细胞的增殖[J]. 李振淼,李文. 细胞与分子免疫学杂志. 2019(06)
[10]基于生长分化因子-9调控的补肾法治疗卵巢早衰研究进展[J]. 王姝婉,梁嘉丽,杨静,秦佳佳. 中国中医药信息杂志. 2018(10)
博士论文
[1]FSH调控小鼠卵泡闭锁及卵泡颗粒细胞Cyp1b1基因表达机制[D]. 周晓龙.南京农业大学 2013
硕士论文
[1]TGIF1对奶山羊卵巢颗粒细胞E2/P4分泌及凋亡作用的研究[D]. 曹贺然.西北农林科技大学 2019
[2]Chk1在猪卵母细胞减数分裂成熟过程中的作用及调控机制[D]. 聂正文.华中农业大学 2017
[3]不同浓度催乳素对人早孕滋养层细胞增殖、迁移和侵袭功能的影响[D]. 黄华生.广西医科大学 2017
[4]Ghrelin在绵羊颗粒细胞拟黄体化过程中的作用[D]. 菅瑞珍.内蒙古农业大学 2013
[5]类固醇激素合成酶及相关受体表达与猪卵泡闭锁过程的关系研究[D]. 张金璧.南京农业大学 2010
[6]鸡PRL、PRLR基因表达及其与繁殖性能的关系[D]. 汪峰.南京农业大学 2007
[7]海门山羊早期胚胎形态观察及泌尿生殖器官发生的研究[D]. 侯庆文.扬州大学 2002
本文编号：3494765
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