重组二硫键还原酶与内源酶活性互作降解植物源原料及羽毛条件优化
发布时间：2021-11-14 23:48
我国常规蛋白质饲料资源短缺,因此可通过提高植物源原料的消化利用率,优化羽毛资源的处理工艺,在一定程度上缓解蛋白质资源短缺问题。本实验室的二硫键还原酶分离提纯于地衣芽胞杆菌CP-16,经枯草芽孢杆菌WB600异源表达,具有广泛pH和温度适应性的高还原二硫键活性的蛋白酶,可对原料蛋白的二硫键结构进行破坏,具有巨大的肠道添加剂应用潜质。但畜禽的消化过程是多酶协同处理的过程,因此本试验深入研究二硫键还原酶活性与内源酶活性的互作效应和剂量关系,测定添加不同剂量二硫键还原酶对胰蛋白酶、糜蛋白酶降解饲料原料（豆粕、花生粕、菜籽粕、玉米蛋白粉和棉籽粕）产物的酪氨酸含量的变化趋势,以及结合体外法评价添加二硫键还原酶对后在40 min、80 min、120 min、160 min内促进植物性蛋白饲料可溶性蛋白含量、小肽含量以及游离巯基的变化规律,推测其可能的作用机理;此外,本研究还探讨二硫键还原酶对角蛋白酶促进剂量作用,针对羽绒加工副产物的加工参数进行单因素分析,经过正交试验并优化。试验结果如下:1.试验一,深入研究了不同剂量的二硫键还原酶与胰蛋白酶和糜蛋白酶的互作关系。结果显示胰蛋白酶和糜蛋白酶的酶活损...
【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
研究方案
甘肃农业大学2020届硕士学位论文66附录1.对硝基苯胺标准曲线图1.对硝基苯胺与吸光值标准曲线Figure1.Standardcurveofp-nitroanilineandabsorptionvalue2.胰蛋白酶和糜蛋白酶商品酶的测定表2.1胰蛋白酶酶活Table2.1trypsinactivity平行1Group1/（u/g)平行2Group2/（u/g)平行3Group3/（u/g)平行4Group4/（u/g)平行5Group5/（u/g)平行6Group6/（u/g)均值meanvalue/（u/g)酶活值trypsinactivity3317.523307.593317.523302.533343.913352.193323.54±18.28表2.2糜蛋白酶酶活Table2.2chymotrypsinactivity平行1Group1/（u/g)平行2Group2/（u/g)平行3Group3/（u/g)平行4Group4/（u/g)平行5Group5/（u/g)平行6Group6/（u/g)均值meanvalue/（u/g)酶活值chymotrypsinactivity917.73917.73921.94921.94917.73921.94919.8395±2.105
重组二硫键还原酶与内源酶活性互作降解植物源原料及羽毛条件优化67表2.3.胰蛋白酶和糜蛋白酶的二硫键还原酶酶活测定Table2.3DeterminationofdisuLfidebondreductaseactivityoftrypsinandchymotrypsin酶种类Group平行1Group1/（u/g)平行2Group2/（u/g)平行3Group3/（u/g)均值meanvalue/（u/g）胰蛋白酶trypsinactivity756.22728.34721.37735.31±15.06糜蛋白酶chymotrypsinactivity1388.551324.341244.081318.99±32.113.L-酪氨酸含量标准曲线图2.L-酪氨酸含量标准曲线（福林酚法）Figure2.StandardcurveofL-tyrosinecontent(folinphenolmethod)4.0.04U二硫键还原酶体外试验操作流程1、试验目的以豆粕为底物，通过测定0.04U二硫键还原酶和反应时间（0min、40min、80min、120min、160min），内源酶水解植物性饲料中产物的变化（可溶性蛋白含量、小肽即酸溶蛋白、巯基含量的变化），研究二硫键重组酶对内源酶水解植物蛋白速率的影响，探索重组二硫键还原酶促进植物性蛋白饲料消化的可能性及其机制。2、试验设计和操作2.1试验分类：
【参考文献】：
期刊论文
[1]反刍动物瘤胃运动机制、影响因素及其调控[J]. 宋阳,沈维军,殷磊,赵渊. 动物营养学报. 2020(07)
[2]废弃羽毛的结构特征及其吸声性能[J]. 吕丽华,刘英杰,郭静,王滢,毕吉红,叶方. 纺织学报. 2020(01)
[3]羊毛角蛋白/聚乙烯醇共混膜的制备及药物缓释分析[J]. 夏平,王威,徐磊. 上海纺织科技. 2019(11)
[4]施用羽毛生物降解液对白菜生长和基质养分的影响[J]. 魏启舜,赵荷娟,周影,黄莹,文蔚明,王琳. 江苏农业科学. 2019(20)
[5]CNC/角蛋白复合膜的制备及其染料吸附性能[J]. 钱迅南,朱笑吉,朱卫明,余志成,宋凯利. 功能高分子学报. 2020(02)
[6]角蛋白酶产生菌及其应用研究进展[J]. 章帅文,杨勇,李昆太. 生物灾害科学. 2019(03)
[7]角蛋白酶体外酶解豆粕的营养价值及其在断奶仔猪生产中的应用研究[J]. 于海涛,周智旋,耿正颖,陆文清. 中国畜牧杂志. 2019(07)
[8]聚酯/角蛋白纳米纤维膜的制备及其铬离子吸附性能[J]. 王闻宇,靳许,史长曲,金欣,李刘倩,林童. 天津工业大学学报. 2019(03)
[9]超声功率对胰蛋白酶的酶活性与结构变化的影响[J]. 黄姗芬,马海乐,杨雪,王禹程,赵丽霞,李云亮. 中国食品学报. 2019(07)
[10]单宁与饲用纤维素酶对湖羊生长性能、血液生化指标、屠宰性能及器官发育的影响[J]. 赵梦迪,邸凌峰,唐泽宇,李成云. 中国畜牧兽医. 2019(06)
博士论文
[1]太平洋磷虾（Euphausia pacifica Hansen）胰蛋白酶样酶酶学性质及基因片段研究[D]. 吴志强.中国海洋大学 2007
硕士论文
[1]功能性羽毛的制备及性能研究[D]. 储兆洋.安徽工程大学 2018
[2]花生粕深度降解及其降解产物的美拉德反应研究[D]. 崔燕玲.广州大学 2018
[3]角蛋白酶毕赤酵母工程菌的构建及酶学性质研究[D]. 许佳惠.华中农业大学 2016
[4]地衣芽孢杆菌CP-16与嗜麦芽窄食单胞菌10号菌降解角蛋白关键酶研究[D]. 邹林源.中国农业科学院 2015
[5]人发角蛋白的提取及其生物医学应用研究[D]. 李鹏飞.南京师范大学 2015
[6]地衣芽孢杆菌CP-16降解羽毛角蛋白相关蛋白酶的分离、表达和相互关系[D]. 王德山.中国农业科学院 2014
[7]高二硫键还原能力角蛋白降解菌的研究[D]. 齐志国.中国农业科学院 2012
[8]角膜修复材料的制备及生物相容性研究[D]. 龙玉宇.华南理工大学 2012
[9]Bacillus licheniformis NJU-1411-1固体发酵羽毛角蛋白生化机制研究[D]. 王玲.南京大学 2011
[10]玉米蛋白粉水解及应用研究[D]. 李进.大连理工大学 2008
本文编号：3495600
【文章来源】：甘肃农业大学甘肃省
【文章页数】：84 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
研究方案
甘肃农业大学2020届硕士学位论文66附录1.对硝基苯胺标准曲线图1.对硝基苯胺与吸光值标准曲线Figure1.Standardcurveofp-nitroanilineandabsorptionvalue2.胰蛋白酶和糜蛋白酶商品酶的测定表2.1胰蛋白酶酶活Table2.1trypsinactivity平行1Group1/（u/g)平行2Group2/（u/g)平行3Group3/（u/g)平行4Group4/（u/g)平行5Group5/（u/g)平行6Group6/（u/g)均值meanvalue/（u/g)酶活值trypsinactivity3317.523307.593317.523302.533343.913352.193323.54±18.28表2.2糜蛋白酶酶活Table2.2chymotrypsinactivity平行1Group1/（u/g)平行2Group2/（u/g)平行3Group3/（u/g)平行4Group4/（u/g)平行5Group5/（u/g)平行6Group6/（u/g)均值meanvalue/（u/g)酶活值chymotrypsinactivity917.73917.73921.94921.94917.73921.94919.8395±2.105
重组二硫键还原酶与内源酶活性互作降解植物源原料及羽毛条件优化67表2.3.胰蛋白酶和糜蛋白酶的二硫键还原酶酶活测定Table2.3DeterminationofdisuLfidebondreductaseactivityoftrypsinandchymotrypsin酶种类Group平行1Group1/（u/g)平行2Group2/（u/g)平行3Group3/（u/g)均值meanvalue/（u/g）胰蛋白酶trypsinactivity756.22728.34721.37735.31±15.06糜蛋白酶chymotrypsinactivity1388.551324.341244.081318.99±32.113.L-酪氨酸含量标准曲线图2.L-酪氨酸含量标准曲线（福林酚法）Figure2.StandardcurveofL-tyrosinecontent(folinphenolmethod)4.0.04U二硫键还原酶体外试验操作流程1、试验目的以豆粕为底物，通过测定0.04U二硫键还原酶和反应时间（0min、40min、80min、120min、160min），内源酶水解植物性饲料中产物的变化（可溶性蛋白含量、小肽即酸溶蛋白、巯基含量的变化），研究二硫键重组酶对内源酶水解植物蛋白速率的影响，探索重组二硫键还原酶促进植物性蛋白饲料消化的可能性及其机制。2、试验设计和操作2.1试验分类：
【参考文献】：
期刊论文
[1]反刍动物瘤胃运动机制、影响因素及其调控[J]. 宋阳,沈维军,殷磊,赵渊. 动物营养学报. 2020(07)
[2]废弃羽毛的结构特征及其吸声性能[J]. 吕丽华,刘英杰,郭静,王滢,毕吉红,叶方. 纺织学报. 2020(01)
[3]羊毛角蛋白/聚乙烯醇共混膜的制备及药物缓释分析[J]. 夏平,王威,徐磊. 上海纺织科技. 2019(11)
[4]施用羽毛生物降解液对白菜生长和基质养分的影响[J]. 魏启舜,赵荷娟,周影,黄莹,文蔚明,王琳. 江苏农业科学. 2019(20)
[5]CNC/角蛋白复合膜的制备及其染料吸附性能[J]. 钱迅南,朱笑吉,朱卫明,余志成,宋凯利. 功能高分子学报. 2020(02)
[6]角蛋白酶产生菌及其应用研究进展[J]. 章帅文,杨勇,李昆太. 生物灾害科学. 2019(03)
[7]角蛋白酶体外酶解豆粕的营养价值及其在断奶仔猪生产中的应用研究[J]. 于海涛,周智旋,耿正颖,陆文清. 中国畜牧杂志. 2019(07)
[8]聚酯/角蛋白纳米纤维膜的制备及其铬离子吸附性能[J]. 王闻宇,靳许,史长曲,金欣,李刘倩,林童. 天津工业大学学报. 2019(03)
[9]超声功率对胰蛋白酶的酶活性与结构变化的影响[J]. 黄姗芬,马海乐,杨雪,王禹程,赵丽霞,李云亮. 中国食品学报. 2019(07)
[10]单宁与饲用纤维素酶对湖羊生长性能、血液生化指标、屠宰性能及器官发育的影响[J]. 赵梦迪,邸凌峰,唐泽宇,李成云. 中国畜牧兽医. 2019(06)
博士论文
[1]太平洋磷虾（Euphausia pacifica Hansen）胰蛋白酶样酶酶学性质及基因片段研究[D]. 吴志强.中国海洋大学 2007
硕士论文
[1]功能性羽毛的制备及性能研究[D]. 储兆洋.安徽工程大学 2018
[2]花生粕深度降解及其降解产物的美拉德反应研究[D]. 崔燕玲.广州大学 2018
[3]角蛋白酶毕赤酵母工程菌的构建及酶学性质研究[D]. 许佳惠.华中农业大学 2016
[4]地衣芽孢杆菌CP-16与嗜麦芽窄食单胞菌10号菌降解角蛋白关键酶研究[D]. 邹林源.中国农业科学院 2015
[5]人发角蛋白的提取及其生物医学应用研究[D]. 李鹏飞.南京师范大学 2015
[6]地衣芽孢杆菌CP-16降解羽毛角蛋白相关蛋白酶的分离、表达和相互关系[D]. 王德山.中国农业科学院 2014
[7]高二硫键还原能力角蛋白降解菌的研究[D]. 齐志国.中国农业科学院 2012
[8]角膜修复材料的制备及生物相容性研究[D]. 龙玉宇.华南理工大学 2012
[9]Bacillus licheniformis NJU-1411-1固体发酵羽毛角蛋白生化机制研究[D]. 王玲.南京大学 2011
[10]玉米蛋白粉水解及应用研究[D]. 李进.大连理工大学 2008
本文编号：3495600
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