食品和饲料中沙门氏菌及动物皮毛中炭疽杆菌快速鉴定方法的研究
发布时间：2021-11-15 15:55
传统的细菌系统分类的主要依据是形态特征和生理生化性状，采取的主要方法是对细菌进行纯培养，然后从形态学、生理生化反应特征以及血清学特性等方面加以鉴定。但在实践中，细菌的分离过程往往出现假阳性的结果，直到最后的鉴定（生化和血清学鉴定），而且对于目前已经开发成熟的鉴定系统，如VITEK、BIOLOG,、脂肪酸分析系统等仍然存在无法对相似菌进行鉴定的情况。在沙门氏菌的日常检测过程中，经常在选择性培养基中分离到类似于沙门氏菌的细菌。这些细菌的分离给后续确定带来很大的干扰，不仅造成人力和物力的浪费，还大大推迟了得到确诊结果的时间。对于分离到的可疑沙门氏菌，通常会进行系统的生化鉴定以及血清学鉴定。生化鉴定可以通过商品化的微生物鉴定系统，如VITEK2、BIOLOG和PHOENIX-100，血清学鉴定则需要昂贵的分型血清逐一进行。细菌的生化鉴定成本高、检测周期长、特异性低。同时血清型分析在临床检测中存在假阳性的缺点，而且也是个耗时、费力的工作。因此，迫切需要改良并开发新的方法来弥补传统鉴定方法的不足。在炭疽杆菌的检测过程中，假阳性的反应经常出现，一些常见的芽胞杆菌是引起假阳性的真正原因。这些细菌包括苏...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：86 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
单聚体Ig分子和源自抗体的生物活性物质
Colony numbers43 16 0 0图3-1 梯度（4%～20%）SDS-PAGE检测多克隆抗体的纯度Fig.3-1 Purity inspection by gradient (4%-20%) SDS-PAGE for polyclonal antibody32
3.2.4 铜绿假单胞菌抗体的体外特异性抑菌试验用SEM分析铜绿假单胞菌抗体与铜绿假单胞菌共同孵育后的培养物，结果见图3-2。在共同孵育10min后，抗体开始攻击菌体。同时，该抗体对其他铜绿假单胞菌也有抑制作用。交叉反应显示，制备的铜绿假单胞菌多克隆抗体对阴沟肠杆菌无抑制作用，见图3-3。图3-2 铜绿假单胞菌抗体在体外特异性抑菌作用A.无抗体加入的营养肉汤中的铜绿假单胞菌；B.抗体作用后5min的铜绿假单胞菌；C.抗体作用后10min的铜绿假单胞菌，此时菌体开始膨胀，有的已经开始裂解；D、E和F: 抗体作用后20min、40min、80min的铜绿假单胞菌，菌体全部裂解并形成明显的网状结构。Fig.3-2 The antimicrobial effect of the antibody against P.aeruginosa as evaluated by SEMA. P.aeruginosa incubated with 0.85% NaCl without antibody added for 2h at 37℃.B. P.aeruginosa treated with antibody for 5 min at 37℃.C. P.aeruginosa treated with antibody for 10 min at 37℃. The cells indicated by the arrow becameswollen and were destroyed.D, E and F. P.aeruginosa treated with antibody for 20, 40, and 80 min
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于PCR技术的番鸭细小病毒和沙门氏菌混合感染诊断[J]. 米朝勇,水超,陈彬. 贵州农业科学. 2012(03)
[2]加环引物LAMP法快速检测沙门氏菌方法的研究[J]. 李雪,唐善虎,郝小倩,岑璐伽. 西南民族大学学报(自然科学版). 2012(01)
[3]动物饲料中沙门氏菌环介导等温扩增（LAMP）快速诊断方法的建立[J]. 孙园园,赵鹏. 中国畜牧兽医. 2012(01)
[4]不同沙门氏菌及干扰菌的分离鉴定[J]. 王志伟. 食品研究与开发. 2012(01)
[5]LAMP技术快速检测沙门氏菌方法的建立及其应用[J]. 田桢干,阎俊,陆晔,王婷,章琪,张胜萍,王传贵. 中国国境卫生检疫杂志. 2011(05)
[6]饲料中沙门氏菌的分离鉴定与Dot-ELISA检测[J]. 韩志辉,张红见. 安徽农业科学. 2011(26)
[7]检测鸡蛋中沙门氏菌的LAMP方法的建立及初步应用[J]. 唐梦君,周生,张小燕,顾荣,蒲俊华,葛庆联,高玉时. 安徽农业大学学报. 2011(01)
[8]铜绿假单胞菌抗体制备及抑菌作用[J]. 陈煜,杨燕凌,谢小芳,肖西志. 动物医学进展. 2010(08)
[9]原位荧光LAMP技术检测食源性沙门氏菌[J]. 叶宇鑫,李琳,山崎伸二,石磊. 食品与发酵工业. 2009(03)
[10]沙门氏菌PCR快速检测技术研究[J]. 陈晓玲,周玲艳,温仕杰,谢振文. 湖北农业科学. 2009(03)
本文编号：3497084
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：86 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
单聚体Ig分子和源自抗体的生物活性物质
Colony numbers43 16 0 0图3-1 梯度（4%～20%）SDS-PAGE检测多克隆抗体的纯度Fig.3-1 Purity inspection by gradient (4%-20%) SDS-PAGE for polyclonal antibody32
3.2.4 铜绿假单胞菌抗体的体外特异性抑菌试验用SEM分析铜绿假单胞菌抗体与铜绿假单胞菌共同孵育后的培养物，结果见图3-2。在共同孵育10min后，抗体开始攻击菌体。同时，该抗体对其他铜绿假单胞菌也有抑制作用。交叉反应显示，制备的铜绿假单胞菌多克隆抗体对阴沟肠杆菌无抑制作用，见图3-3。图3-2 铜绿假单胞菌抗体在体外特异性抑菌作用A.无抗体加入的营养肉汤中的铜绿假单胞菌；B.抗体作用后5min的铜绿假单胞菌；C.抗体作用后10min的铜绿假单胞菌，此时菌体开始膨胀，有的已经开始裂解；D、E和F: 抗体作用后20min、40min、80min的铜绿假单胞菌，菌体全部裂解并形成明显的网状结构。Fig.3-2 The antimicrobial effect of the antibody against P.aeruginosa as evaluated by SEMA. P.aeruginosa incubated with 0.85% NaCl without antibody added for 2h at 37℃.B. P.aeruginosa treated with antibody for 5 min at 37℃.C. P.aeruginosa treated with antibody for 10 min at 37℃. The cells indicated by the arrow becameswollen and were destroyed.D, E and F. P.aeruginosa treated with antibody for 20, 40, and 80 min
【参考文献】：
期刊论文
[1]基于PCR技术的番鸭细小病毒和沙门氏菌混合感染诊断[J]. 米朝勇,水超,陈彬. 贵州农业科学. 2012(03)
[2]加环引物LAMP法快速检测沙门氏菌方法的研究[J]. 李雪,唐善虎,郝小倩,岑璐伽. 西南民族大学学报(自然科学版). 2012(01)
[3]动物饲料中沙门氏菌环介导等温扩增（LAMP）快速诊断方法的建立[J]. 孙园园,赵鹏. 中国畜牧兽医. 2012(01)
[4]不同沙门氏菌及干扰菌的分离鉴定[J]. 王志伟. 食品研究与开发. 2012(01)
[5]LAMP技术快速检测沙门氏菌方法的建立及其应用[J]. 田桢干,阎俊,陆晔,王婷,章琪,张胜萍,王传贵. 中国国境卫生检疫杂志. 2011(05)
[6]饲料中沙门氏菌的分离鉴定与Dot-ELISA检测[J]. 韩志辉,张红见. 安徽农业科学. 2011(26)
[7]检测鸡蛋中沙门氏菌的LAMP方法的建立及初步应用[J]. 唐梦君,周生,张小燕,顾荣,蒲俊华,葛庆联,高玉时. 安徽农业大学学报. 2011(01)
[8]铜绿假单胞菌抗体制备及抑菌作用[J]. 陈煜,杨燕凌,谢小芳,肖西志. 动物医学进展. 2010(08)
[9]原位荧光LAMP技术检测食源性沙门氏菌[J]. 叶宇鑫,李琳,山崎伸二,石磊. 食品与发酵工业. 2009(03)
[10]沙门氏菌PCR快速检测技术研究[J]. 陈晓玲,周玲艳,温仕杰,谢振文. 湖北农业科学. 2009(03)
本文编号：3497084
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