副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立及应用

发布时间：2021-11-19 12:53

　　本试验针对副猪嗜血杆菌的16S rRNA基因设计环介导等温扩增（LAMP）引物,建立副猪嗜血杆菌LAMP方法,并进行特异性和灵敏度试验。结果显示,建立的LAMP检测方法特异性良好,与其它5种细菌无交叉反应,灵敏度为10^-4ng/μL。分别使用LAMP和PCR方法对30份临床采集样品进行检测,阳性检出率均为40%,符合率100%。本试验建立的LAMP检测方法不需要特殊的仪器设备,可用于副猪嗜血杆菌的鉴定。 

【文章来源】：山东农业科学. 2020,52(10)

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

不同扩增引物下的浊度曲线

以H21基因组DNA为模板，以表1中LAMP序列作为引物，分别在60～67℃进行反应，根据浊度仪实时监测的浊度结果绘制浊度曲线(图2)。当反应温度为64、65、66℃时，最先发生扩增反应。由于64℃时的扩增效率比较高，因此设定64℃为最佳反应温度。2.3 LAMP方法的特异性检测

LAMP特异性试验

【参考文献】：
期刊论文
[1]副猪嗜血杆菌及巴氏杆菌双重荧光定量PCR检测方法的建立[J]. 姜睿姣,周丽军,邬旭龙,张鹏飞,罗梓丹,肖璐,王印,姚学萍,杨泽晓,罗燕.  中国预防兽医学报. 2019(05)
[2]副猪嗜血杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立[J]. 侯魁,丁轲,刘守业,余祖华,赵战勤.  河南科技大学学报(自然科学版). 2017(06)
[3]副猪嗜血杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立[J]. 吴诗敏,陈芳艳,陈瑞爱,刘颖,王林川.  畜牧与兽医. 2010(04)
[4]副猪嗜血杆菌环介导等温扩增检测方法的建立[J]. 朱杰仪,谭实勇,曾小娜,刘健,刘中勇,朱道中,罗满林.  中国畜牧兽医. 2010(02)
[5]副猪嗜血杆菌研究进展[J]. 刘正飞,蔡旭旺,陈焕春,吴斌,何启盖.  动物医学进展. 2003(05)

硕士论文
[1]副猪嗜血杆菌环介导等温扩增快速检测方法的建立[D]. 魏晓媛.河北农业大学 2013



本文编号：3505082