十二指肠贾第虫内源性CAS9基因启动子的筛选及瞬时表达
发布时间：2021-11-19 22:07
贾第虫病（Giardiasis）是由寄生于十二指肠的贾第虫（Giardia spp.）引起的以腹泻为主要症状的人兽共患原虫病。宿主感染贾第虫后因自身免疫能力的差异表现出不同症状。其中免疫正常的宿主多产生自限性腹泻,而免疫力低下的宿主尤其艾滋病患者则产生脱水性腹泻,严重者危及生命。该病呈世界性分布,感染性极强,宿主仅摄入10个左右的感染性包囊即可引发感染,因此贾第虫也被WHO列为首要容易忽视的病原体。贾第虫是较为古老的低等真核生物,其具有独特的细胞内超微结构（如存在外周囊泡和缺乏线粒体、典型的高尔基体及过氧化物酶类等）,然而在增殖方面,贾第虫却仍然保留着原核生物的二分裂方式,生活史较为简单,仅分为滋养体和包囊两个阶段,使其成为研究高等真核生物细胞或其它寄生虫细胞分化和分子机理的重要模式生物。研究贾第虫的分子机理需对其进行基因操作,对贾第虫的基因组进行编辑有利于我们了解各基因的功能,为阐明该病原的致病机理和毒力因素提供理论基础,同时也为研究治疗贾第虫病提供新的药物靶点。近年来,CRISPR-CAS9基因编辑系统被发现并在生命科学各领域得以广泛应用,其快速有效的靶基因编辑体系是以CAS9蛋白...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
贾第虫生活史Fig.1-1ThelifecycleofGiardia
CRISPR-CAS9构成图
5图 1-3 三种 CAS 基因工作原理示意图（引用自 Hsu, P. D., et al. Cell 2014, 157(6): 1262-1278.）Fig. 1-3 The working principle diagram of three types of CAS gene (Quote from Hsu, P. D., et al. Cell2014, 157(6): 1262-1278.)1.3.3 CRISPR-CAS9 基因编辑技术的优势与 ZFNs 和 TALENs 两种基因编辑技术相比，CRISPR-CAS9 技术不需要设计过于复杂的核酸酶结构，仅需要将 CRISPR-CAS9 与基因工程载体连接构建成能够表达 CAS9 蛋白的特异性载体，同时设计靶基因的 gRNA 列，将上述载体转入细胞内就可以进行基因编辑。另外还可以设计多个gRNA 共同转入细胞内实现基因的多靶点敲除[55]。针对不同的靶序列也无需重新构建载体，仅需
【参考文献】：
期刊论文
[1]真核启动子研究进展[J]. 汤方,涂慧珍. 林业科技开发. 2015(02)
本文编号：3505965
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：56 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
贾第虫生活史Fig.1-1ThelifecycleofGiardia
CRISPR-CAS9构成图
5图 1-3 三种 CAS 基因工作原理示意图（引用自 Hsu, P. D., et al. Cell 2014, 157(6): 1262-1278.）Fig. 1-3 The working principle diagram of three types of CAS gene (Quote from Hsu, P. D., et al. Cell2014, 157(6): 1262-1278.)1.3.3 CRISPR-CAS9 基因编辑技术的优势与 ZFNs 和 TALENs 两种基因编辑技术相比，CRISPR-CAS9 技术不需要设计过于复杂的核酸酶结构，仅需要将 CRISPR-CAS9 与基因工程载体连接构建成能够表达 CAS9 蛋白的特异性载体，同时设计靶基因的 gRNA 列，将上述载体转入细胞内就可以进行基因编辑。另外还可以设计多个gRNA 共同转入细胞内实现基因的多靶点敲除[55]。针对不同的靶序列也无需重新构建载体，仅需
【参考文献】：
期刊论文
[1]真核启动子研究进展[J]. 汤方,涂慧珍. 林业科技开发. 2015(02)
本文编号：3505965
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