融合表达BVDV E2蛋白与CTB重组干酪乳杆菌的构建及其免疫原性评价
发布时间：2021-12-16 06:18
牛病毒性腹泻（Bovine viral diarrhea,BVD）是由牛病毒性腹泻病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）引起的牛的一种临床症状复杂多样,可在牛群中持续感染的重要牛病毒性传染病之一。由于BVDV独特的致病机制能够造成宿主的免疫抑制,从而导致免疫失败以及其它呼吸道传染病的发生。同时,被BVDV感染的牛群,其繁殖、产肉、产奶等生产性能会受到极大地影响,进而引起严重的经济损失。目前,预防BVD主要采用疫苗接种,包括弱毒疫苗和灭活疫苗。出于对弱毒疫苗的安全性考虑,免疫接种仍以灭活疫苗为主,但由于BVDV易发生突变,灭活疫苗应对病毒突变的能力差,常常导致免疫失败。因此,研制能够有效预防BVDV感染的新型疫苗对防控牛病毒性腹泻病具有重要意义。本研究基于BVDV主要经消化道黏膜感染的特点,诱导机体产生有效的保护性黏膜免疫应答可构筑机体抵抗BVDV经黏膜感染的第一道防线为指导思想实施课题研究,选择BVDV保护性抗原E2蛋白为免疫原及霍乱毒素B亚单位（CTB）为免疫佐剂,利用干酪乳杆菌作为抗原传递载体,构建融合表达BVDV E2蛋白和CTB的基因工程乳酸菌...
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
目的基因E2的PCR扩增结果
Marker DL8000；1：pPG-E2 经 Sa Marker DL8000;1: pPG-E2 digested 重组质粒 pPG-E2 的双酶切鉴tification of pPG-E2 digested by pPG-E2/Lc W56 表达 E果c W56 静置培养 24 h，收集菌后，先后用鼠抗 E2 蛋白抗血酪乳杆菌 pPG-E2/Lc W56 出应条带，表明目的蛋白获得表
：DNA Marker DL8000；1：pPG-E2 经 SacI、ApaI 双酶: DNA Marker DL8000;1: pPG-E2 digested by SacI and A图 3-8 重组质粒 pPG-E2 的双酶切鉴定结果-8 Identification of pPG-E2 digested by Sac I and Ap菌 pPG-E2/Lc W56 表达 E2 蛋白的定结果G-E2/Lc W56 静置培养 24 h，收集菌体并进行裂PVDF 膜后，先后用鼠抗 E2 蛋白抗血清和 HRP重组干酪乳杆菌 pPG-E2/Lc W56 出现预期大小未见相应条带，表明目的蛋白获得表达（见图 3
【参考文献】：
期刊论文
[1]表面展示狂犬病病毒糖蛋白的重组乳酸菌的构建及其免疫原性的研究[J]. 赵维静,赵建伟,胡译文,谢静,刘琼,王春凤,王建忠,钱爱东. 中国兽医科学. 2019(04)
[2]犬细小病毒VP2基因乳酸菌表达载体的构建及蛋白检测[J]. 段欣强,张洪亮,周保琨,杨瑞梅,单虎. 中国兽医杂志. 2018(10)
[3]牛病毒性腹泻疫苗的研究进展[J]. 李世芳,龚美娇,邵军军,常惠芸. 中国兽医学报. 2018(04)
[4]牛病毒性腹泻病毒的分子生物学研究进展[J]. 陈新诺,张斌. 中国畜牧兽医. 2017(11)
[5]饲用优良乳酸菌鉴定及生物学特性研究[J]. 李肖,李海洋,房艳华,来航线,韦小敏,娄义. 西北农业学报. 2017(11)
[6]牛病毒性腹泻病毒基因分型二重RT-PCR检测方法的建立[J]. 崔元,王建昌,王金凤,袁万哲. 中国兽医杂志. 2017(07)
[7]VP7-CTB融合蛋白在拟南芥种子中的表达及免疫原性分析[J]. 李余先,官丽莉,周永刚,刘秀明,杨晶,郭咏昕,杨赫,王红雨,李海燕,李校堃. 中国兽医科学. 2017(04)
[8]表面展示H9N2亚型禽流感病毒HA2蛋白的新功能型乳酸菌的构建[J]. 王棋,石昊林,王占楠,黄科谚,姚心茹,王成宇,杨桂连,姜延龙,王春凤. 中国兽医科学. 2017(04)
[9]牛病毒性腹泻病的危害及防控措施[J]. 李晓霞,李勇生,贺奋义,韩庆彦,贺泂杰,赵秋霞,郭慧琳. 中国牛业科学. 2016(05)
[10]牛病毒性腹泻病毒生物学特性、危害及防控[J]. 王炜,武华. 中国奶牛. 2014(Z4)
硕士论文
[1]新型猪流行性腹泻病毒S1基因重组乳酸菌载体的构建及小鼠免疫研究[D]. 郭梦茹.吉林农业大学 2018
[2]表达传染性法氏囊病病毒VP2重组乳酸菌主动递送活载体的构建及免疫效果评价[D]. 刘琳琳.中国农业科学院 2017
[3]融合表达TGEV 6Ds与PEDV ps420非抗性标记重组干酪乳杆菌表达系统的构建及免疫效果评价[D]. 王玉赛.东北农业大学 2016
[4]表达PEDV保护性抗原靶向融合肽乳酸杆菌活菌载体的构建及其免疫原性分析[D]. 陈苏.东北农业大学 2016
本文编号：3537643
【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校
【文章页数】：83 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
目的基因E2的PCR扩增结果
Marker DL8000；1：pPG-E2 经 Sa Marker DL8000;1: pPG-E2 digested 重组质粒 pPG-E2 的双酶切鉴tification of pPG-E2 digested by pPG-E2/Lc W56 表达 E果c W56 静置培养 24 h，收集菌后，先后用鼠抗 E2 蛋白抗血酪乳杆菌 pPG-E2/Lc W56 出应条带，表明目的蛋白获得表
：DNA Marker DL8000；1：pPG-E2 经 SacI、ApaI 双酶: DNA Marker DL8000;1: pPG-E2 digested by SacI and A图 3-8 重组质粒 pPG-E2 的双酶切鉴定结果-8 Identification of pPG-E2 digested by Sac I and Ap菌 pPG-E2/Lc W56 表达 E2 蛋白的定结果G-E2/Lc W56 静置培养 24 h，收集菌体并进行裂PVDF 膜后，先后用鼠抗 E2 蛋白抗血清和 HRP重组干酪乳杆菌 pPG-E2/Lc W56 出现预期大小未见相应条带，表明目的蛋白获得表达（见图 3
【参考文献】：
期刊论文
[1]表面展示狂犬病病毒糖蛋白的重组乳酸菌的构建及其免疫原性的研究[J]. 赵维静,赵建伟,胡译文,谢静,刘琼,王春凤,王建忠,钱爱东. 中国兽医科学. 2019(04)
[2]犬细小病毒VP2基因乳酸菌表达载体的构建及蛋白检测[J]. 段欣强,张洪亮,周保琨,杨瑞梅,单虎. 中国兽医杂志. 2018(10)
[3]牛病毒性腹泻疫苗的研究进展[J]. 李世芳,龚美娇,邵军军,常惠芸. 中国兽医学报. 2018(04)
[4]牛病毒性腹泻病毒的分子生物学研究进展[J]. 陈新诺,张斌. 中国畜牧兽医. 2017(11)
[5]饲用优良乳酸菌鉴定及生物学特性研究[J]. 李肖,李海洋,房艳华,来航线,韦小敏,娄义. 西北农业学报. 2017(11)
[6]牛病毒性腹泻病毒基因分型二重RT-PCR检测方法的建立[J]. 崔元,王建昌,王金凤,袁万哲. 中国兽医杂志. 2017(07)
[7]VP7-CTB融合蛋白在拟南芥种子中的表达及免疫原性分析[J]. 李余先,官丽莉,周永刚,刘秀明,杨晶,郭咏昕,杨赫,王红雨,李海燕,李校堃. 中国兽医科学. 2017(04)
[8]表面展示H9N2亚型禽流感病毒HA2蛋白的新功能型乳酸菌的构建[J]. 王棋,石昊林,王占楠,黄科谚,姚心茹,王成宇,杨桂连,姜延龙,王春凤. 中国兽医科学. 2017(04)
[9]牛病毒性腹泻病的危害及防控措施[J]. 李晓霞,李勇生,贺奋义,韩庆彦,贺泂杰,赵秋霞,郭慧琳. 中国牛业科学. 2016(05)
[10]牛病毒性腹泻病毒生物学特性、危害及防控[J]. 王炜,武华. 中国奶牛. 2014(Z4)
硕士论文
[1]新型猪流行性腹泻病毒S1基因重组乳酸菌载体的构建及小鼠免疫研究[D]. 郭梦茹.吉林农业大学 2018
[2]表达传染性法氏囊病病毒VP2重组乳酸菌主动递送活载体的构建及免疫效果评价[D]. 刘琳琳.中国农业科学院 2017
[3]融合表达TGEV 6Ds与PEDV ps420非抗性标记重组干酪乳杆菌表达系统的构建及免疫效果评价[D]. 王玉赛.东北农业大学 2016
[4]表达PEDV保护性抗原靶向融合肽乳酸杆菌活菌载体的构建及其免疫原性分析[D]. 陈苏.东北农业大学 2016
本文编号：3537643
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