捻转血矛线虫ABC转运蛋白的基因克

发布时间：2021-12-16 23:58

　　捻转血矛线虫（Haemonchus contortus）是绵羊（Ovis aries）、山羊（Capra hircus）等反刍动物重要的寄生虫之一,可造成养殖业的巨大经济损失。基于转录组研究,本课题组前期从捻转血矛线虫耐药虫株中鉴定获得耐药基因—ABC （ATP-binding cassette）转运蛋白基因（GenBank No. MT478136）。本研究拟分析ABC转运蛋白基因的生物信息学特征,建立ABC转运蛋白的可溶性诱导表达及纯化体系,为进一步探究ABC转运蛋白参与的耐药机制提供参考依据。首先利用在线软件对ABC进行蛋白质结构分析及抗原表位预测,结果显示,ABC分子式为C₉₂₈H₁₅₀₂N₂₇₀O₂₆₅S₇,属于不含跨膜区和信号肽的亲水性蛋白质,二级结构主要以延伸链为主;ABC转运蛋白的抗原性较高,含有较多的抗原表位。利用反转录PCR （reverse transcription PCR, RT-PCR）扩增ABC转运蛋白基因,经酶切连接构建重组质粒pET30a（+）... 

【文章来源】：农业生物技术学报. 2020,28(10)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

不同诱导温度条件下ABC转运蛋白原核表达的SDS-PAGE检测

ABC转运蛋白基因PCR扩增(A)及重组质粒酶切鉴定(B和C)

ABC转运蛋白是真核生物体内产生耐药性的重要原因之一。大量研究发现，ABC转运蛋白在介导细菌耐药、昆虫耐药及肿瘤耐药中发挥重要作用。Kesavan等(2020)对新型四环素—依拉环素(eravacycline)诱导鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)进行转录组和蛋白组学分析，结果显示，ABC转运蛋白为响应药物选择压力，在诱导耐药株中显著高表达。Dooley等(2015)利用马来丝虫(Brugia malayi)伊维菌素耐药虫株模型，通过体内和体外平行实验发现，宿主ABC转运蛋白在线虫耐药性中起到关键的作用。Raza等(2016)对捻转血矛线虫伊维菌素耐药虫株和敏感虫株进行ABC转运蛋白表达模式分析，发现ABC转运蛋白在耐药虫株中的表达量较敏感虫株高12.6倍。研究人员回顾了过去10年ABC转运蛋白介导肿瘤多药耐药的调节，结果显示，ABC转运蛋白介导的外排泵系统导致肿瘤化学治疗失败及多药耐药的产生(Chen et al.,2016)。最近有研究人员利用低温电子显微镜解析ABC蛋白结构，揭示了ABC转运体介导细胞耐药性的机制(Hofmann et al.,2019)。这些研究表明ABC转运蛋白在耐药性中发挥一定的作用。图4 不同IPTG诱导浓度条件下ABC转运蛋白原核表达的SDS-PAGE检测

【参考文献】：
期刊论文
[1]捻转血矛线虫GST耐药基因的克隆、表达及生物信息学分析[J]. 赵学亮,孙柯,苏倩,呼和巴特尔,王文龙.  中国农业大学学报. 2020(01)
[2]绵羊捻转血矛线虫流行病学调查及耐药性检测[J]. 赵学亮,额叶勒德格,海鹰,米其德,孙柯,吕旭,王文龙.  家畜生态学报. 2019(11)
[3]捻转血矛线虫阿苯达唑敏感株和耐药株比较转录组学分析[J]. 赵学亮,王姝懿,孙柯,苏倩,王文龙,刘春霞.  畜牧兽医学报. 2019(09)



本文编号：3539040