鸽屠体和肉质性状相关基因的遗传效应及表达研究
发布时间：2021-12-17 08:42
本研究以泰深王鸽为研究对象,研究了 DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2和FABP3五个基因多态性及其与屠体和肉质性状的遗传相关,利用荧光定量PCR技术研究了基因在鸽组织中的表达特点,采取组织学切片技术研究了鸽肌纤维发育特征。在此基础上,应用慢病毒介导的RANi技术研究了干扰FABP1、FABP2和FABP3基因对鸽胚胎成纤维细胞增殖和凋亡的影响。主要研究结果如下:1、利用直接测序法对200只4周龄鸽的DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2和FABP3五个基因进行了多态性检测和分型,并与屠体及肉质性状进行了关联分析。(1)在DGAT2基因上共检测到了 5个SNP位点,其中有2个位点与鸽屠体及肉质性状有显著相关。在G18398T位点上,AA和AB基因型的腹脂重和腹脂率极显著高于BB基因型(P<0.01),而BB基因型的肌苷酸和肌内脂肪含量极显著高于AA和AB基因型(P<0.01);在G22484C位点上,AA基因型的宰前活重、屠体重、半净膛重、全净膛重和胸肌重极显著高于AB和BB基因型(P<0.01),BB基因型的肌内脂肪含量显著高于AA和AB基因型(P&...
【文章来源】： 浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：162 页
【文章目录】：
缩略词表
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1 SNP的研究进展
1.1 SNP的分类及作用
1.2 SNP的特性
1.3 SNP的检测技术
1.4 SNP的研究意义
2 性状相关基因的研究进展
2.1 DGAT2基因的研究进展
2.2 ADSL基因的研究进展
2.3 FABP1、FABP2、FABP3基因的研究进展
3 肉品质和肌肉组织学特性的研究进展
3.1 肉品质的评价指标
3.2 肉品质的影响因素
3.3 肌肉组织学特性及其与肉品质的关系
3.4 肌纤维发育特征及影响因素
4 RNA干扰的研究进展
4.1 RNA干扰的发现
4.2 RNA干扰的作用机制
4.3 RNA干扰的特点
4.4 RNA干扰的应用
5 本研究目的和意义
第二章 鸽DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2、FABP3基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器
1.3 主要试剂
1.4 溶液试剂配制
1.5 实验器材处理与灭菌
2 实验方法
2.1 屠体性状测定
2.2 肉质性状测定
2.3 基因组DNA的提取及检测
2.4 引物设计、溶解及稀释
2.5 PCR反应体系及程序
2.6 PCR产物直接测序、SNP分型及氨基酸序列分析
2.7 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 基因组DNA的提取结果
3.2 PCR扩增结果
3.3 基因多态性及氨基酸序列分析结果
3.4 基因频率、基因型频率及群体遗传特性
3.5 基因多态性与屠体性状及肉质性状的关联分析
4 讨论
4.1 DGAT2基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
4.2 ADSL基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
4.3 FABP1基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
4.4 FABP2基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
4.5 FABP3基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
第三章 鸽DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2、FABP3基因时空表达及肌纤维发育特征的研究
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器
1.3 主要试剂
1.4 溶液试剂配制
1.5 实验器材处理与灭菌
2 实验方法
2.1 基因时空表达谱的建立
2.2 鸽肌纤维切片制作和图像分析
3 结果与分析
3.1 DGAT2基因时空表达谱
3.2 ADSL基因时空表达谱
3.3 FABP1基因时空表达谱
3.4 FABP2基因时空表达谱
3.5 FABP3基因时空表达谱
3.6 鸽肌纤维发育特征
4 讨论
4.1 关于相对定量法条件优化
4.2 DGAT2基因的表达
4.3 ADSL基因的表达
4.4 FABP1基因的表达
4.5 FABP2基因的表达
4.6 FABP3基因的表达
4.7 肌纤维发育特征
第四章 慢病毒介导的RNA干扰FABP1、FABP2和FABP3基因对鸽胚胎成纤维细胞增殖与凋亡的初步研究
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器
1.3 主要试剂
1.4 溶液试剂配制
1.5 实验器材处理与灭菌
2 实验方法
2.1 鸽胚胎成纤维细胞的培养、传代与冻存
2.2 siRNA的设计、转染及筛选
2.3 慢病毒载体构建及包装
2.4 重组慢病毒转染成纤维细胞
2.5 转染后细胞增殖与凋亡检测
3 结果与分析
3.1 鸽成纤维细胞原代细胞与传代细胞形态观察
3.2 鸽胚胎成纤维细胞生长曲线
3.3 siRNA的筛选结果
3.4 重组慢病毒干扰载体的测序鉴定结果
3.5 慢病毒滴度测定结果
3.6 重组慢病毒转染效率检测
3.7 干扰FABP1、FABP2和FABP3基因后细胞增殖检测
3.8 干扰FABP1、FABP2和FABP3基因后细胞凋亡检测
4 讨论
4.1 鸽胚胎成纤维细胞的培养
4.2 慢病毒介导的RNA干扰
4.3 FABP1、FABP2和FABP3基因干扰对成纤维细胞增殖的影响
4.4 FABP1、FABP2和FABP3基因干扰对成纤维细胞凋亡的影响
第五章 结论、创新点及研究展望
参考文献
博士期间科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]北川白山羊FABP3基因cDNA的克隆及表达研究 [J]. 姚毅,马红艳,吕学斌,杨跃奎. 中国畜牧杂志. 2017(06)
[2]鸭I-FABP基因的克隆、组织表达模式及功能研究 [J]. 陈芳,张昊,卢立志. 畜牧兽医学报. 2016(05)
[3]鲁禽3号麻鸡优良肉质性状分子遗传标记筛选 [J]. 王丹丹,周艳,雷秋霞,韩海霞,林浴霜. 中国家禽. 2016(09)
[4]FABP-5基因沉默对宫颈癌SiHa细胞生物学特性的影响 [J]. 陈逢振,尹利荣. 中国组织工程研究. 2016(15)
[5]南方农区不同饲养方式和类群羔羊胴体品质及肉质比较 [J]. 钱勇,钟声,张俊,李隐侠,黎有娣. 家畜生态学报. 2015(04)
[6]沉默FABP-5基因对人肝癌HepG2细胞的影响 [J]. 周玲丽,曹骥,李薇,罗旺,杨香娣,杨春,骆成飘,唐艳萍,李瑗. 世界华人消化杂志. 2015(02)
[7]高脂饮食对幼年大鼠小肠组织FABP2 mRNA表达的影响 [J]. 徐云鹏,王文栋,郝敏,张晓磊,高雪,常晓彤. 卫生研究. 2014(05)
[8]北京鸭FABP2基因多态性与体尺和屠体性状的相关性研究 [J]. 廖秀冬,任立明,王光瑛,李昂,黄银花. 中国家禽. 2012(17)
[9]大白猪二脂酰甘油酰基转移酶1和2基因(DGAT1和DGAT2)发育性表达特点及其与背膘厚的关联分析 [J]. 王国富,高树新,张立凡,蔡兆伟,徐宁迎. 农业生物技术学报. 2011(04)
[10]鸭肝脏基础型脂肪酸结合蛋白Lb-FABP基因的克隆、组织表达谱和序列特征分析 [J]. 钟万福,李加琪,杨承忠,王翀,张豪,张爱玲. 中国农业科学. 2010(20)
博士论文
[1]鸡肌苷酸相关候选基因遗传效应及表达规律研究[D]. 束婧婷.扬州大学. 2008
[2]莱芜猪肉质特性及其分子遗传学基础的研究[D]. 曾勇庆.南京农业大学. 2004
[3]DGAT1和DGAT2基因多态性与牛部分经济性状相关性的研究[D]. 徐秀容.西北农林科技大学. 2004
硕士论文
[1]鸡DGAT2基因组织表达特性及其SNP、CNV遗传效应分析[D]. 付金秀.河南农业大学. 2016
[2]山羊PPARγ和FABP家族基因的分离鉴定、组织表达及其多态性检测[D]. 蒋婧.四川农业大学. 2012
[3]RNA干扰技术沉默A-FABP基因对脂肪细胞合成甘油三酯及脂联素分泌的影响[D]. 钟敏.南华大学. 2011
[4]鸭ADSL与PurH基因序列特征及表达与肌肉肌苷酸（IMP）含量的相关性分析[D]. 徐善金.南京农业大学. 2011
[5]鸭A-FABP和H-FABP基因cDNA序列克隆及其mRNA表达规律的研究[D]. 储冬生.扬州大学. 2008
[6]藏猪和太湖猪H-FABP基因表达及肌内脂肪含量的发育性变化研究[D]. 黄河.四川农业大学. 2007
[7]南阳牛几个基因的多态性及其与生长发育性状的相关性的研究[D]. 张争锋.西北农林科技大学. 2006
本文编号：3539773
【文章来源】： 浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：162 页
【文章目录】：
缩略词表
摘要
Abstract
第一章 文献综述
1 SNP的研究进展
1.1 SNP的分类及作用
1.2 SNP的特性
1.3 SNP的检测技术
1.4 SNP的研究意义
2 性状相关基因的研究进展
2.1 DGAT2基因的研究进展
2.2 ADSL基因的研究进展
2.3 FABP1、FABP2、FABP3基因的研究进展
3 肉品质和肌肉组织学特性的研究进展
3.1 肉品质的评价指标
3.2 肉品质的影响因素
3.3 肌肉组织学特性及其与肉品质的关系
3.4 肌纤维发育特征及影响因素
4 RNA干扰的研究进展
4.1 RNA干扰的发现
4.2 RNA干扰的作用机制
4.3 RNA干扰的特点
4.4 RNA干扰的应用
5 本研究目的和意义
第二章 鸽DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2、FABP3基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器
1.3 主要试剂
1.4 溶液试剂配制
1.5 实验器材处理与灭菌
2 实验方法
2.1 屠体性状测定
2.2 肉质性状测定
2.3 基因组DNA的提取及检测
2.4 引物设计、溶解及稀释
2.5 PCR反应体系及程序
2.6 PCR产物直接测序、SNP分型及氨基酸序列分析
2.7 数据统计分析
3 结果与分析
3.1 基因组DNA的提取结果
3.2 PCR扩增结果
3.3 基因多态性及氨基酸序列分析结果
3.4 基因频率、基因型频率及群体遗传特性
3.5 基因多态性与屠体性状及肉质性状的关联分析
4 讨论
4.1 DGAT2基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
4.2 ADSL基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
4.3 FABP1基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
4.4 FABP2基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
4.5 FABP3基因多态性及其与屠体和肉质性状的关联分析
第三章 鸽DGAT2、ADSL、FABP1、FABP2、FABP3基因时空表达及肌纤维发育特征的研究
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器
1.3 主要试剂
1.4 溶液试剂配制
1.5 实验器材处理与灭菌
2 实验方法
2.1 基因时空表达谱的建立
2.2 鸽肌纤维切片制作和图像分析
3 结果与分析
3.1 DGAT2基因时空表达谱
3.2 ADSL基因时空表达谱
3.3 FABP1基因时空表达谱
3.4 FABP2基因时空表达谱
3.5 FABP3基因时空表达谱
3.6 鸽肌纤维发育特征
4 讨论
4.1 关于相对定量法条件优化
4.2 DGAT2基因的表达
4.3 ADSL基因的表达
4.4 FABP1基因的表达
4.5 FABP2基因的表达
4.6 FABP3基因的表达
4.7 肌纤维发育特征
第四章 慢病毒介导的RNA干扰FABP1、FABP2和FABP3基因对鸽胚胎成纤维细胞增殖与凋亡的初步研究
1 实验材料
1.1 实验动物
1.2 主要仪器
1.3 主要试剂
1.4 溶液试剂配制
1.5 实验器材处理与灭菌
2 实验方法
2.1 鸽胚胎成纤维细胞的培养、传代与冻存
2.2 siRNA的设计、转染及筛选
2.3 慢病毒载体构建及包装
2.4 重组慢病毒转染成纤维细胞
2.5 转染后细胞增殖与凋亡检测
3 结果与分析
3.1 鸽成纤维细胞原代细胞与传代细胞形态观察
3.2 鸽胚胎成纤维细胞生长曲线
3.3 siRNA的筛选结果
3.4 重组慢病毒干扰载体的测序鉴定结果
3.5 慢病毒滴度测定结果
3.6 重组慢病毒转染效率检测
3.7 干扰FABP1、FABP2和FABP3基因后细胞增殖检测
3.8 干扰FABP1、FABP2和FABP3基因后细胞凋亡检测
4 讨论
4.1 鸽胚胎成纤维细胞的培养
4.2 慢病毒介导的RNA干扰
4.3 FABP1、FABP2和FABP3基因干扰对成纤维细胞增殖的影响
4.4 FABP1、FABP2和FABP3基因干扰对成纤维细胞凋亡的影响
第五章 结论、创新点及研究展望
参考文献
博士期间科研成果
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]北川白山羊FABP3基因cDNA的克隆及表达研究 [J]. 姚毅,马红艳,吕学斌,杨跃奎. 中国畜牧杂志. 2017(06)
[2]鸭I-FABP基因的克隆、组织表达模式及功能研究 [J]. 陈芳,张昊,卢立志. 畜牧兽医学报. 2016(05)
[3]鲁禽3号麻鸡优良肉质性状分子遗传标记筛选 [J]. 王丹丹,周艳,雷秋霞,韩海霞,林浴霜. 中国家禽. 2016(09)
[4]FABP-5基因沉默对宫颈癌SiHa细胞生物学特性的影响 [J]. 陈逢振,尹利荣. 中国组织工程研究. 2016(15)
[5]南方农区不同饲养方式和类群羔羊胴体品质及肉质比较 [J]. 钱勇,钟声,张俊,李隐侠,黎有娣. 家畜生态学报. 2015(04)
[6]沉默FABP-5基因对人肝癌HepG2细胞的影响 [J]. 周玲丽,曹骥,李薇,罗旺,杨香娣,杨春,骆成飘,唐艳萍,李瑗. 世界华人消化杂志. 2015(02)
[7]高脂饮食对幼年大鼠小肠组织FABP2 mRNA表达的影响 [J]. 徐云鹏,王文栋,郝敏,张晓磊,高雪,常晓彤. 卫生研究. 2014(05)
[8]北京鸭FABP2基因多态性与体尺和屠体性状的相关性研究 [J]. 廖秀冬,任立明,王光瑛,李昂,黄银花. 中国家禽. 2012(17)
[9]大白猪二脂酰甘油酰基转移酶1和2基因(DGAT1和DGAT2)发育性表达特点及其与背膘厚的关联分析 [J]. 王国富,高树新,张立凡,蔡兆伟,徐宁迎. 农业生物技术学报. 2011(04)
[10]鸭肝脏基础型脂肪酸结合蛋白Lb-FABP基因的克隆、组织表达谱和序列特征分析 [J]. 钟万福,李加琪,杨承忠,王翀,张豪,张爱玲. 中国农业科学. 2010(20)
博士论文
[1]鸡肌苷酸相关候选基因遗传效应及表达规律研究[D]. 束婧婷.扬州大学. 2008
[2]莱芜猪肉质特性及其分子遗传学基础的研究[D]. 曾勇庆.南京农业大学. 2004
[3]DGAT1和DGAT2基因多态性与牛部分经济性状相关性的研究[D]. 徐秀容.西北农林科技大学. 2004
硕士论文
[1]鸡DGAT2基因组织表达特性及其SNP、CNV遗传效应分析[D]. 付金秀.河南农业大学. 2016
[2]山羊PPARγ和FABP家族基因的分离鉴定、组织表达及其多态性检测[D]. 蒋婧.四川农业大学. 2012
[3]RNA干扰技术沉默A-FABP基因对脂肪细胞合成甘油三酯及脂联素分泌的影响[D]. 钟敏.南华大学. 2011
[4]鸭ADSL与PurH基因序列特征及表达与肌肉肌苷酸（IMP）含量的相关性分析[D]. 徐善金.南京农业大学. 2011
[5]鸭A-FABP和H-FABP基因cDNA序列克隆及其mRNA表达规律的研究[D]. 储冬生.扬州大学. 2008
[6]藏猪和太湖猪H-FABP基因表达及肌内脂肪含量的发育性变化研究[D]. 黄河.四川农业大学. 2007
[7]南阳牛几个基因的多态性及其与生长发育性状的相关性的研究[D]. 张争锋.西北农林科技大学. 2006
本文编号：3539773
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