盐酸克伦特罗通过p27途径抑制成肌细胞增殖的机制研究
发布时间：2021-12-18 15:20
骨骼肌是机体的重要组成部分,骨骼肌的生长和损伤后修复对机体而言十分重要,同时骨骼肌的生长发育对畜牧生产也有很重要的作用。盐酸克伦特罗（Clenbuterol, CLB）作为经典的β2肾上腺素受体激动剂,对骨骼肌的生长有显著的促进作用,对肌肉的损伤修复也有明显的帮助。但盐酸克伦特罗调控肌肉发生的分子机制到底如何,目前仍不清楚。C2C12成肌细胞是体外研究肌肉发生机制常用的细胞模型之一,所以本研究采用C2C12成肌细胞作为实验材料,探讨盐酸克伦特罗对肌肉发生过程中细胞增殖的影响。在培养基中加入CLB,导致C2C12细胞发生细胞周期阻滞。同时,通过BrdU标记增殖的细胞,观察到CLB减少DNA的合成。此外,经CLB处理后,还检测到cyclin D、cyclin E和Cdk2蛋白表达下降和p27蛋白表达升高。以上结果说明CLB会延缓C2C12细胞的细胞周期进程。通过定量PCR和荧光素酶实验,发现CLB并未改变p27的转录水平。当在培养液中加入抑制蛋白生物合成的放线菌酮（Cycloheximide, CHX）,发现CLB抑制了p27的蛋白降解。继而通过细胞免疫荧光染色和Western blot实...
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：120 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－２骨骼肌肌肉发生中细胞的谱系关系??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ａ?ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｏｓｓ?化?ｌｅ?ｌｉｎｅａｇｅ?ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ?ｏｆｓｋｄｅｔａｌ?ｍｙｏｂｌａ?別?ｓ（?Ｍｅｓｓｉｎａ?ａｎｄ?Ｃｏｓｓｕ．?２００９）??
肌酸的增加，而不是肌纤维中收缩组分的增加。??参与肥大的信号通路繁多并且比较复杂。外部的刺激（如生长因子、营养物质和运动训练）??通过胞内的信号通路改变了基因转录和翻译的活性，从而影响了胞内蛋白的合成和降解，如图１－６。??５??
图１－６骨駱肌目Ｅ大信号通路??Ｆｉｇｕｒｅ?１－６?Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆｓｋｃｌｅｔａｌ?ｍｕｓｃｌｅｓ?ｕｎｄｅｒｇｏ?ｈ＼ｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ?ｇｒｏ＼ｖｔｈ（Ｊａｃｉｎｔｏ?ａｎｄ?Ｈａｌｌ．?２００３）．??如图１－７所示，ＩＧＦ－１信号级联系统是骨骼肌肥大机制中认识比较系统的信号通路之一。??ＩＧＦ－１通过影响了细胞増靖、分化、蛋白降解、氨基酸转运等过程巧ａｌｄｗｉｎ?ａｎｄ?Ｈａｄｄａｄ，?２００２），促??进了肌肉肥大。事实上生长激素促合成代谢的一部分作用也被认为是通过增加ＩＧＦ－１來实现的。??过表挂ＩＧＦ－１能引发小鼠的肌肉肥大，促进卫星细胞的增殖和分化（Ｗｉｌｂｏｍ?ｅｔ?ａｌ．，?２００９）。ＩＧＦ－１??信号往下游传迸需要ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信号通路的参与。Ａｋｔ参与大量的细胞活动，比如调节葡萄糖的??转运、肌肉细胞生长分化Ｌ：ｉ及肌肉蛋白合成。激活Ａｋｔ是实现肌肉肥大的重要环节，它激活了??ｍＴＯＲ，随后ｍＴＯ民作用于下游的ｐ７０Ｓ化和ｅＩＦ４Ｂ，增加蛋白翻译活性，最终促进肌肉蛋白合??成（Ｂｏｄｉｎｅ，?２００６）。Ａｋｔ同时抑制了?ＧＳＫ３Ｐ和ＦｏｘＯ，抑制蛋白降解。??１ＧＦ－１增加体外外培养的Ｃ２Ｃ１２肌管的面积是通过激活ＰＩ３Ｋ?／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ信号通路来实现的。??ＩＧＦ－１诱导的体外培养的微管的生长并不是增加肌核数Ｍ的结果（民ｏｍｍｅｌ?ｅｔ?ａｌ．，２００］）。通常认为，??卫星细胞的激活、増殖和融合对肌肉生长Ｗ及肌肉损伤后修复至关重要（Ｃｈａｒｇｅ?ａｎｄ?Ｒｕｄｎｉｃｋｉ
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同转录因子与p27Kip1启动子区结合的时空顺序对其表达的影响[J]. 陈巍魏,管晓翔,陈龙邦. 临床肿瘤学杂志. 2011(02)
本文编号：3542664
【文章来源】：中国农业大学北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：120 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－２骨骼肌肌肉发生中细胞的谱系关系??Ｆｉｇｕｒｅ?１－２?Ａ?ｓｃｈｅｍｅ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｐｏｓｓ?化?ｌｅ?ｌｉｎｅａｇｅ?ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ?ｏｆｓｋｄｅｔａｌ?ｍｙｏｂｌａ?別?ｓ（?Ｍｅｓｓｉｎａ?ａｎｄ?Ｃｏｓｓｕ．?２００９）??
肌酸的增加，而不是肌纤维中收缩组分的增加。??参与肥大的信号通路繁多并且比较复杂。外部的刺激（如生长因子、营养物质和运动训练）??通过胞内的信号通路改变了基因转录和翻译的活性，从而影响了胞内蛋白的合成和降解，如图１－６。??５??
图１－６骨駱肌目Ｅ大信号通路??Ｆｉｇｕｒｅ?１－６?Ｓｉｇｎａｌｉｎｇ?ｐａｔｈｗａｙ?ｏｆｓｋｃｌｅｔａｌ?ｍｕｓｃｌｅｓ?ｕｎｄｅｒｇｏ?ｈ＼ｐｅｒｔｒｏｐｈｉｃ?ｇｒｏ＼ｖｔｈ（Ｊａｃｉｎｔｏ?ａｎｄ?Ｈａｌｌ．?２００３）．??如图１－７所示，ＩＧＦ－１信号级联系统是骨骼肌肥大机制中认识比较系统的信号通路之一。??ＩＧＦ－１通过影响了细胞増靖、分化、蛋白降解、氨基酸转运等过程巧ａｌｄｗｉｎ?ａｎｄ?Ｈａｄｄａｄ，?２００２），促??进了肌肉肥大。事实上生长激素促合成代谢的一部分作用也被认为是通过增加ＩＧＦ－１來实现的。??过表挂ＩＧＦ－１能引发小鼠的肌肉肥大，促进卫星细胞的增殖和分化（Ｗｉｌｂｏｍ?ｅｔ?ａｌ．，?２００９）。ＩＧＦ－１??信号往下游传迸需要ＰＩ３Ｋ／ＡＫＴ信号通路的参与。Ａｋｔ参与大量的细胞活动，比如调节葡萄糖的??转运、肌肉细胞生长分化Ｌ：ｉ及肌肉蛋白合成。激活Ａｋｔ是实现肌肉肥大的重要环节，它激活了??ｍＴＯＲ，随后ｍＴＯ民作用于下游的ｐ７０Ｓ化和ｅＩＦ４Ｂ，增加蛋白翻译活性，最终促进肌肉蛋白合??成（Ｂｏｄｉｎｅ，?２００６）。Ａｋｔ同时抑制了?ＧＳＫ３Ｐ和ＦｏｘＯ，抑制蛋白降解。??１ＧＦ－１增加体外外培养的Ｃ２Ｃ１２肌管的面积是通过激活ＰＩ３Ｋ?／ＡＫＴ／ｍＴＯＲ信号通路来实现的。??ＩＧＦ－１诱导的体外培养的微管的生长并不是增加肌核数Ｍ的结果（民ｏｍｍｅｌ?ｅｔ?ａｌ．，２００］）。通常认为，??卫星细胞的激活、増殖和融合对肌肉生长Ｗ及肌肉损伤后修复至关重要（Ｃｈａｒｇｅ?ａｎｄ?Ｒｕｄｎｉｃｋｉ
【参考文献】：
期刊论文
[1]不同转录因子与p27Kip1启动子区结合的时空顺序对其表达的影响[J]. 陈巍魏,管晓翔,陈龙邦. 临床肿瘤学杂志. 2011(02)
本文编号：3542664
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