山东部分地区猪瘟病毒分离鉴定及E2基因遗传进化分析

发布时间：2021-12-23 06:20

　　2019年1月山东省莱芜某猪场保育猪在免疫猪瘟（classicai swine fever,CSF）疫苗后发病,病死率高达60%。对病猪进行实验室综合诊断,确诊为猪瘟病毒（classical swine fever virus,CSFV）感染,经检测分离毒株（Laiwu2019）存在变异。为进一步了解山东地区CSFV遗传进化情况,2019年上半年从山东部分地区收集23份CSF疑似病料,确定17份阳性并成功分离到14株CSFV,对分离毒株的E2基因进行遗传进化分析。结果表明,分离的15株CSFV间的核苷酸与推导氨基酸的同源性分别为97.0%～99.9%和97.1%～100.0%,与参考株间的同源性分别为81.9%～97.4%和88.7%～99.7%。通过与Shimen株糖基化位点分析,分离株仅在"⁹⁸⁶NYAK-NYTK⁹⁸⁹"处发生突变。分离毒株与Shimen株抗原表位分析比较,15株分离株在抗原表位"⁷¹⁷TTWKEYSH⁷²⁴"发生了"K⁷²⁰R"的突变,在"^77... 

【文章来源】：中国兽医学报. 2020,40(09)北大核心CSCD

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【部分图文】：

病猪临床剖检病变

镜检病理切片可见,肾小管上皮细胞变性坏死,肾间质出血(图2A);淋巴结充血、出血,淋巴细胞坏死(图2B);回盲瓣淋巴滤泡出血性坏死(图2C);扁桃体黏膜上皮细胞坏死、脱落,淋巴组织坏死,隐窝内充满坏死物(图2D);膀胱黏膜固有层充血、出血(图2E);脾脏充血,淋巴细胞坏死(图2F)。2.3 病毒检测结果

将18份阳性病料研磨液经过0.22 μm滤器过滤后,用DMEM稀释10倍,接种于生长密度为70%单层PK-15细胞培养瓶中,连续盲传3代,收取带毒细胞,于-80℃反复冻融3次,通过CSFV全长引物RT-PCR扩增结果显示15份细胞病毒液检测为阳性(图5),并将15株分离毒株进行命名(表3)。图4 23份疑似CSF病料RT-PCR检测结果


本文编号：3547957