牛早期胚胎Zscan4-like基因的表达研究
发布时间：2021-12-23 23:18
体细胞核移植技术（又称体细胞克隆技术）是动物转基因育种重要的技术环节；虽然体细胞核移植技术已成功应用于多种动物，但其效率至今非常低；供体细胞核不完全重编程是克隆胚胎发育异常的主要原因；受精后第一波转录的激活叫做合子基因组激活，标志着胚胎发育由母型调控向合子型调控转换，对于克隆胚胎同样也要历经此过程；体细胞通过体细胞核移植技术被重编程到多能状态，这是体细胞核被暴露在众多未知的重编程因子中的结果，不仅成熟卵母细胞中含有许多重编程因子，而且合子基因组激活后胚胎型因子也发挥着重要的重编程作用。Zscan4基因是小鼠基因组激活时特异性的标记基因之一，是小鼠早期胚胎发育所必须的；在小鼠ES和iPS细胞中，有一种细胞亚群瞬时高水平地表达与2-细胞期胚胎转录产物相似的转录产物，这类细胞亚群被称为2C-like ES细胞，Zscan4基因也是这类2C-like ES细胞的标志性基因之一；Zscan4基因不仅能够维持小鼠ES细胞基因组的稳定性和维持其多能性，而且Zscan4基因是小鼠iPS细胞形成过程中重要的重编程增强因子。根据美国国家生物技术信息中心（NCBI），Zscan4基因在牛上有2个同源基因，分...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：67 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
Zscan4同源基因的PCR检测AB
图 2-1 Zscan4 同源基因的 PCR 检测Figure 2-1 Expression of Zscan4 homologous genes by PCR图 A：Zscan4 同源基因的表达，图 B：GAPDH 基因的表达；M1 和 M2：100 plusⅡDNALadde（r100bp，200bp，300bp，400bp，500bp，600bp，700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp），1~12：心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、卵巢、睾丸、子宫、肌肉、8-细胞期 IVF 胚胎和水。Figure A: Zscan4 homologous gene expression, figure B: GAPDH gene expression; M1 and M2: 100 plusⅡ DNA Ladder(100bp，200bp，300bp，400bp，500bp，600bp，700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp), 1 ~ 12: heart, liver, spleen, lung, kidney, pancreas, ovary, testis, uterus, muscle, 8-cell stage ofIVF embryos and water.A B
细胞期胚胎和 4-细胞期胚胎中的表达量平均值下调，但差异不显著；到 8-细胞期胚胎表达大量上调，在 9 至 16 期-细胞期胚胎表达量达到最大值，随后的桑椹胚表达量迅速下调，在囊胚表达量进一步下调。Zscan4-like 在 SCNT 早期胚胎中的相对定量 PCR 检测结果（如图 3-5）：Zscan4-like基因在成熟的卵母细胞中表达相对 8 细胞期胚胎较少，1-细胞期胚胎的表达量开始上调，但与卵母细胞相比差异不显著；与 1-细胞期胚胎相比，2-细胞期胚胎的表达量下调，随后 4-细胞期胚胎的表达量稍微上调，但差异不显著；；到 8-细胞期胚胎开始表达大量上调，在 9 至 16 期-细胞期胚胎的表达量达到最大值，随后的桑椹胚的表达量迅速下调，在囊胚表达量进一步下调。IVF 与 SCNT 各期中 Zscan4-like 表达比较结果（如图 3-6）：IVF 与 SCNT 的 1-细胞期胚胎、2-细胞期胚胎、4-细胞期胚胎、8-细胞期胚胎和 9 至 16-细胞期胚胎中 Zscan4-like表达两两之间差异不显著；IVF 桑葚胚中 Zscan4-like 表达比 SCNT 桑葚胚中的表达量要高，差异显著；IVF 囊胚中 Zscan4-like 表达比 SCNT 桑葚胚中的表达量要低，差异显著。M1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 M2 1 2 3 4 5 6 7 8 9
本文编号：3549376
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
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【学位级别】：硕士
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Zscan4同源基因的PCR检测AB
图 2-1 Zscan4 同源基因的 PCR 检测Figure 2-1 Expression of Zscan4 homologous genes by PCR图 A：Zscan4 同源基因的表达，图 B：GAPDH 基因的表达；M1 和 M2：100 plusⅡDNALadde（r100bp，200bp，300bp，400bp，500bp，600bp，700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp），1~12：心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胰腺、卵巢、睾丸、子宫、肌肉、8-细胞期 IVF 胚胎和水。Figure A: Zscan4 homologous gene expression, figure B: GAPDH gene expression; M1 and M2: 100 plusⅡ DNA Ladder(100bp，200bp，300bp，400bp，500bp，600bp，700bp，800bp，900bp，1000bp，1200bp，1500bp), 1 ~ 12: heart, liver, spleen, lung, kidney, pancreas, ovary, testis, uterus, muscle, 8-cell stage ofIVF embryos and water.A B
细胞期胚胎和 4-细胞期胚胎中的表达量平均值下调，但差异不显著；到 8-细胞期胚胎表达大量上调，在 9 至 16 期-细胞期胚胎表达量达到最大值，随后的桑椹胚表达量迅速下调，在囊胚表达量进一步下调。Zscan4-like 在 SCNT 早期胚胎中的相对定量 PCR 检测结果（如图 3-5）：Zscan4-like基因在成熟的卵母细胞中表达相对 8 细胞期胚胎较少，1-细胞期胚胎的表达量开始上调，但与卵母细胞相比差异不显著；与 1-细胞期胚胎相比，2-细胞期胚胎的表达量下调，随后 4-细胞期胚胎的表达量稍微上调，但差异不显著；；到 8-细胞期胚胎开始表达大量上调，在 9 至 16 期-细胞期胚胎的表达量达到最大值，随后的桑椹胚的表达量迅速下调，在囊胚表达量进一步下调。IVF 与 SCNT 各期中 Zscan4-like 表达比较结果（如图 3-6）：IVF 与 SCNT 的 1-细胞期胚胎、2-细胞期胚胎、4-细胞期胚胎、8-细胞期胚胎和 9 至 16-细胞期胚胎中 Zscan4-like表达两两之间差异不显著；IVF 桑葚胚中 Zscan4-like 表达比 SCNT 桑葚胚中的表达量要高，差异显著；IVF 囊胚中 Zscan4-like 表达比 SCNT 桑葚胚中的表达量要低，差异显著。M1 1 2 3 4 5 6 7 8 9 M2 1 2 3 4 5 6 7 8 9
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