健康与患子宫内膜炎水牛子宫内细菌组的比较分析
发布时间：2021-12-29 01:45
奶水牛子宫内膜炎是奶水牛产后由病原微生物感染引起的一种常见繁殖疾病,常造成受胎率的下降和产犊间隔时期的延长,给奶水牛养殖业造成了严重的经济损失。细菌感染是引起奶水牛子宫内膜炎的主要病原微生物之一,对于产后奶水牛子宫内细菌组成的研究将为临床上奶水牛子宫内膜炎的防治提供相关的理论依据。本论文研究了产后14d健康和患子宫内膜炎奶水牛子宫内细菌组成的差异。首先通过实际操作对比研究了3种从奶水牛子宫内采集粘液的方法；其次对比研究了三种从子宫冲洗液中提取微生物总DNA的方法；最后分别建立了健康和患子宫内膜炎水牛子宫内细菌的克隆文库,并对子宫内的细菌进行了序列比对和系统发育分析。试验结果如下：1.使用子宫冲洗枪配套喷壶的采样方法适合采集水牛子宫内的粘液,该方法操作简单、对器械要求较低并且采集的样品具有代表性。2.使用QIAamp DNA stool mini kit和Bead beating结合的方法适合提取子宫冲洗液中微生物总DNA,该方法的DNA浓度可达1000ng/ul,纯度高,并且片段完整性较好,通过PCR检测,所提取的DNA适合进一步的分子生物学研究。3.产后14天水牛子宫内的细菌主要属于...
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩略符号
第一章 文献综述 奶牛子宫内膜炎以及生殖道微生态的研究进展
1. 奶牛子宫内膜炎的病因
1.1 奶牛自身因素
1.1.1 营养因素
1.1.2 激素水平
1.1.3 继发性因素
1.1.4 操作管理不当
1.2 外界因素
1.2.1 细菌
1.2.2 其他病原微生物
2 子宫内膜炎的危害
2.1 子宫内膜炎对精子存活和功能的影响
2.2 子宫内膜炎对卵巢功能、卵泡发育和排卵作用的影响
3 奶牛子宫内膜炎的诊断方法
3.1 直肠触诊
3.2 子宫内膜活检
3.3 细胞学检查
4 奶牛子宫内膜炎治疗方法
4.1 抗生素治疗
4.2 激素治疗
4.3 中草药治疗
4.4 微生态治疗
5 分子生物学技术在生殖道微生态方面的研究进展
研究目的和意义
第二章 水牛子宫冲洗液DNA提取方法的比较研究
1 材料和方法
1.1 试验动物
1.2 主要仪器及药品
1.3 样品采集
1.4 DNA提取方法
1.4.1 方法一(QIAamp DNA stool mini kit)
1.4.2 方法二(QIAamp DNA stool mini kit+溶菌酶)
1.4.3 方法三(QIAamp DNA stool mini kit+Bead beating)
1.5 DNA浓度的测定和电泳检测
1.6 PCR检测
2 结果与分析
2.1 DNA纯度及浓度的检测结果
2.2 DNA电泳检测
2.3 PCR检测
3 讨论
3.1 采样方法
3.2 DNA提取方法
第三章 健康与患子宫内膜炎水牛子宫内细菌组成的比较分析
1 材料和方法
1.1 试验水牛日粮水平及饲养管理
1.2 水牛产后子宫冲洗液的采集
1.3 主要仪器和试剂
1.4 子宫内膜炎的判定
1.5 子宫冲洗液DNA的提取
1.6 DNA的纯化
1.7 PCR
1.8 PCR产物的切胶回收
1.9 水牛产后子宫内细菌16S rRNA基因克隆文库的构建
2 序列分析及进化树的构建
3 结果与分析
3.1 子宫内膜炎的判段结果(见表3-2,图3-5)
3.2 产后水牛子宫内细菌16S rDNA基因序列分析
3.3 产后水牛子宫内细菌16S rRNA克隆序列的系统发育分析
4 讨论
总结论
参考文献
致谢
作者简介
在读期间发表论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]锡林浩特市周边地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定[J]. 李润元,娜日苏,迎春,何雯娟. 黑龙江畜牧兽医. 2012(23)
[2]复方中草药防治奶牛子宫内膜炎的效果[J]. 何光中,刘镜,杨红文,何金平. 安徽农业科学. 2011(25)
[3]奶水牛子宫内膜炎细菌的分离鉴定及药敏试验分析[J]. 高玉梅,何宝祥,覃广胜,杨宪苓,郑威. 中国奶牛. 2010(06)
[4]奶牛子宫炎的临床分析[J]. 肖定汉,李兰华,张兴全,陈宝兴. 中国奶牛. 1999(06)
[5]子宫内膜炎和卵巢机能不全患牛血清中铜含量变化及其影响因素[J]. 玉之磊,潘兴广,胡春山. 黑龙江畜牧兽医. 1998(01)
硕士论文
[1]细菌性阴道病菌群的16S rDNA微生态分析[D]. 刘雅娟.南方医科大学 2012
[2]体外培养和分子生物学技术研究奶牛产后子宫内菌群的动态变化[D]. 彭宇.南京农业大学 2011
[3]北京地区奶牛子宫内膜炎致病菌的分离鉴定及抑菌试验[D]. 张祎娜.河北农业大学 2011
[4]奶牛子宫内膜炎致病菌的16S rRNA序列鉴定及金黄色葡萄球菌血浆凝固酶的原核表达[D]. 张洪波.山东农业大学 2009
本文编号：3555151
【文章来源】：广西大学广西壮族自治区 211工程院校
【文章页数】：55 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
英文缩略符号
第一章 文献综述 奶牛子宫内膜炎以及生殖道微生态的研究进展
1. 奶牛子宫内膜炎的病因
1.1 奶牛自身因素
1.1.1 营养因素
1.1.2 激素水平
1.1.3 继发性因素
1.1.4 操作管理不当
1.2 外界因素
1.2.1 细菌
1.2.2 其他病原微生物
2 子宫内膜炎的危害
2.1 子宫内膜炎对精子存活和功能的影响
2.2 子宫内膜炎对卵巢功能、卵泡发育和排卵作用的影响
3 奶牛子宫内膜炎的诊断方法
3.1 直肠触诊
3.2 子宫内膜活检
3.3 细胞学检查
4 奶牛子宫内膜炎治疗方法
4.1 抗生素治疗
4.2 激素治疗
4.3 中草药治疗
4.4 微生态治疗
5 分子生物学技术在生殖道微生态方面的研究进展
研究目的和意义
第二章 水牛子宫冲洗液DNA提取方法的比较研究
1 材料和方法
1.1 试验动物
1.2 主要仪器及药品
1.3 样品采集
1.4 DNA提取方法
1.4.1 方法一(QIAamp DNA stool mini kit)
1.4.2 方法二(QIAamp DNA stool mini kit+溶菌酶)
1.4.3 方法三(QIAamp DNA stool mini kit+Bead beating)
1.5 DNA浓度的测定和电泳检测
1.6 PCR检测
2 结果与分析
2.1 DNA纯度及浓度的检测结果
2.2 DNA电泳检测
2.3 PCR检测
3 讨论
3.1 采样方法
3.2 DNA提取方法
第三章 健康与患子宫内膜炎水牛子宫内细菌组成的比较分析
1 材料和方法
1.1 试验水牛日粮水平及饲养管理
1.2 水牛产后子宫冲洗液的采集
1.3 主要仪器和试剂
1.4 子宫内膜炎的判定
1.5 子宫冲洗液DNA的提取
1.6 DNA的纯化
1.7 PCR
1.8 PCR产物的切胶回收
1.9 水牛产后子宫内细菌16S rRNA基因克隆文库的构建
2 序列分析及进化树的构建
3 结果与分析
3.1 子宫内膜炎的判段结果(见表3-2,图3-5)
3.2 产后水牛子宫内细菌16S rDNA基因序列分析
3.3 产后水牛子宫内细菌16S rRNA克隆序列的系统发育分析
4 讨论
总结论
参考文献
致谢
作者简介
在读期间发表论文
【参考文献】：
期刊论文
[1]锡林浩特市周边地区奶牛子宫内膜炎病原菌的分离鉴定[J]. 李润元,娜日苏,迎春,何雯娟. 黑龙江畜牧兽医. 2012(23)
[2]复方中草药防治奶牛子宫内膜炎的效果[J]. 何光中,刘镜,杨红文,何金平. 安徽农业科学. 2011(25)
[3]奶水牛子宫内膜炎细菌的分离鉴定及药敏试验分析[J]. 高玉梅,何宝祥,覃广胜,杨宪苓,郑威. 中国奶牛. 2010(06)
[4]奶牛子宫炎的临床分析[J]. 肖定汉,李兰华,张兴全,陈宝兴. 中国奶牛. 1999(06)
[5]子宫内膜炎和卵巢机能不全患牛血清中铜含量变化及其影响因素[J]. 玉之磊,潘兴广,胡春山. 黑龙江畜牧兽医. 1998(01)
硕士论文
[1]细菌性阴道病菌群的16S rDNA微生态分析[D]. 刘雅娟.南方医科大学 2012
[2]体外培养和分子生物学技术研究奶牛产后子宫内菌群的动态变化[D]. 彭宇.南京农业大学 2011
[3]北京地区奶牛子宫内膜炎致病菌的分离鉴定及抑菌试验[D]. 张祎娜.河北农业大学 2011
[4]奶牛子宫内膜炎致病菌的16S rRNA序列鉴定及金黄色葡萄球菌血浆凝固酶的原核表达[D]. 张洪波.山东农业大学 2009
本文编号：3555151
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