大豆卵磷脂与卵黄在山羊精液冷冻过程中的联合作用研究

发布时间：2021-12-31 00:31

　　试验旨在探究在山羊精液冷冻保存过程中单独使用大豆卵磷脂（SL）、卵黄（EY）及其联合使用的效果。以20%EY（V/V）和2%SL（m/V）为对照,在山羊冻精基础稀释液中分别添加10%EY+2%SL、20%EY+1%SL、20%EY+2%SL,冷冻解冻后分别对精子活率、精子活力、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性进行检测,同时利用试剂盒检测活性氧（ROS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量变化。结果表明:当冷冻稀释液中联合添加10%EY+2%SL,解冻后该组的精子活力、精子活率、质膜完整率、顶体完整率和线粒体活性与20%EY和2%SL对照组无显著性差异,较20%EY+1%SL和20%EY+2%SL联合添加组显著提高;与20%EY和2%SL组相比,联合添加10%EY+2%SL组精子解冻后ROS和MDA含量和SOD活性无显著性差异,但精子抗氧化能力较另外2个联合添加组显著提高。综上,山羊精液冷冻基础稀释液中添加SL可替代或者部分替代EY,EY和SL的联合添加对山羊冻精无协同作用,20%EY联合添加不同浓度的SL则会加大对冷冻精子的氧化损伤。 

【文章来源】：中国畜牧杂志. 2020,56(09)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

EY和SL及其联合添加对精子线粒体活性的影响

EY作为家畜精液冷冻保护剂，易在精液冷冻和后续体外受精过程中带来微生物污染，且山羊精浆中的卵黄凝固酶可将EY中的卵磷脂水解为脂肪酸和溶血卵磷脂，而后者对山羊精子的活力和顶体产生损害作用[12]。本研究首次在冷冻稀释液中添加SL以替换或降低EY使用浓度，结果表明冷冻稀释液中使用2%的SL可完全替代EY，取得了与20%EY组相近的冷冻解冻效果。SL主要包括磷酯类和非磷脂类物质，磷酯类物质大部分为LDL。研究证实，降温会造成精子质膜上的磷脂发生从液晶态到凝胶态的相位转变，降低精子膜的流动性，导致膜刚性增强，易受冰晶物理伤害，SL中的LDL能为受损的精子膜提供外源性磷脂，从而降低精子膜相位转变温度，以便于冷冻过程中精子脱水，提高精子质膜和顶体对冷冻伤害的耐受性，同时也可作为外源性磷脂来替代修补超低温损伤的精子膜磷脂，从而维持质膜的结构和功能，防止精子冷休克[13-15]。另一方面，LDL可在细胞周围形成保护层，以防止快速降温细胞冰晶的形成，保护精子膜在冷冻-解冻过程中免受机械损伤[16]。本研究也证实了SL在山羊精液冷冻中具有与EY相似的冷冻保护效果。精液冷冻过程中，10%EY+2%SL组获得了最高冷冻效率，可能与SL的添加降低EY使用浓度，减少卵黄凝固酶（EYCE）对精子的毒害作用有关。EYCE可诱导稀释液中卵黄凝结，催化卵黄脂类物质中脂肪酸的释放，造成精液pH下降，从而导致孵育后精子死亡。结果表明，与单独添加EY或SL相比较，10%EY+2%SL组解冻后精子质膜和顶体完整性提高的主要原因可能是EY和SL的联合添加可能会弥补卵磷脂单一来源的局限性，改善冷冻效果。然而，这两种冷冻保护剂之间的相互作用尚不清楚。有研究表明，稀释液中的EY会加速精子发生获能反应，降低精子存活时间，因此在冷冻过程中，降低稀释液中的EY浓度，同时利用SL补充添加冷冻所需的必须成分，可更好地保护精子的顶体[17]。本实验中10%EY+2%SL联合添加组亦获得了最佳的精子活力、精子活率、质膜完整性和顶体完整性。

【参考文献】：
期刊论文
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[2]无卵黄牛冷冻精液稀释液研究进展[J]. 王彦平,韩广文,李艳华,杨超,刘玉.  中国奶牛. 2014(08)
[3]大豆卵磷脂取代卵黄对猪精液低温保存的影响[J]. 胡传水,朱银莉,许春荣,李美珍,胡传活.  广西农学报. 2013(01)
[4]荧光染色法检测虹鳟精子质量[J]. 刘奕,纪锋,谷伟,龚丽,郑金霞,杨翟平,王炳谦.  水产学杂志. 2010(01)

博士论文
[1]内蒙古绒山羊精液冷冻保存方法优化及精液稀释液主要成份的作用机制研究[D]. 栗瑞兰.内蒙古农业大学 2018

硕士论文
[1]牛精液冷冻稀释液新配方研究[D]. 蔡虹.华中农业大学 2009



本文编号：3559274