表达猪瘟病毒E2蛋白的重组PRRSV疫苗株rPRRSV-E2的水平传播能力研究
发布时间：2021-12-31 10:03
为研究表达猪瘟病毒E2蛋白的重组PRRSV疫苗株rPRRSV-E2能否在猪群中水平传播,本研究将15头PRRSV抗原抗体均为阴性,PRV、CSFV和PCV2抗原阴性的35日龄健康仔猪,随机分成3组,每组5头。A组接种rPRRSV-E2第5代细胞毒,剂量为105.0TCID50/头;B组为同居感染对照组,接种DMEM;Mock组接种DMEM,单独饲养。猪体免疫后第7 d采集血清、鼻拭子和肛拭子样品,进行病毒载量和PRRSV、CSFV的抗原抗体含量测定,共持续监测3个月;所有猪只在试验期间每天观察临床症状。结果显示:未接种疫苗的同居对照组猪只各时间点血清中均未检测到PRRSV,也未检测到针对PRRSV和CSFV的抗体。研究结果表明,rPRRSV-E2不能在猪群中水平传播。
【文章来源】：中国动物传染病学报. 2020,28(06)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
rPRRSV-E2免疫后血清抗体水平变化情况分析
对所有试验组的猪只鼻拭子和肛拭子样品利用本试验室建立的方法进行荧光定量PCR检测。rPRRSV-E2免疫组及其同居感染观察组中拭子样品和空白对照组相比,病毒拷贝数均较低,无显著差异(图4)。对其中病毒拷贝数略高于阴性对照的样品进行病毒分离,在MARc-145细胞上进行传代,观察细胞病变及IFA荧光结果,结果显示,免疫组猪只从免疫开始至试验结束,均未从拭子中分离到PRRSV。2.5 病理学检查结果
表1 荧光定量RT-PCR使用引物序列Table 1 Oligonucleotides used for RT-qPCR 名称aNamea 序列Sequence 位置bPositionb 应用Application PNPF 5＇-CCCTAGTGAGCGGCAATTGT-3＇ 15 002-15 021 qRT-PCR primer (PRRSV) PNPR 5＇-TCCAGCGCCCTGATTGAA-3＇ 15 045-15 062 qRT-PCR primer (PRRSV) NP-probe FAM-TCTGTCGTCGATCCAGA-MGB 15 023-15 039 qRT-PCR probe (PRRSV)说明:a=引物名称的缩写;F=上游引物,R=下游引物;b=引物在亲本病毒HuN4 (EF635006) 基因组中的位置Notes:a=Abbreviations in primer names;F=forward PCR primer;R=reverse PCR primer;b=Numbers in the primer names denotes the nucleotide positions in the parental Hu N4 (EF635006)图2 rPRRSV-E2免疫后猪只血清中病毒含量检测结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭肝炎病毒A66弱毒株的水平传播感染[J]. 张小飞,黄显明,尹秀凤,陆承平. 江苏农业学报. 2011(04)
[2]猪繁殖与呼吸综合征病毒Taq Man-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用[J]. 韦天超,田志军,安同庆,周艳君,肖燕,姜一峰,郝晓芳,张善瑞,彭金美,仇华吉,童光志. 中国预防兽医学报. 2008(12)
[3]甲型肝炎减毒活疫苗病毒的水平传播[J]. 黄小琴,曹逸云,谭顺革,白惠珠,邵聪文,龙润乡,周德久,董德祥. 中华医学杂志. 2001(08)
本文编号：3560061
【文章来源】：中国动物传染病学报. 2020,28(06)北大核心
【文章页数】：5 页
【部分图文】：
rPRRSV-E2免疫后血清抗体水平变化情况分析
对所有试验组的猪只鼻拭子和肛拭子样品利用本试验室建立的方法进行荧光定量PCR检测。rPRRSV-E2免疫组及其同居感染观察组中拭子样品和空白对照组相比,病毒拷贝数均较低,无显著差异(图4)。对其中病毒拷贝数略高于阴性对照的样品进行病毒分离,在MARc-145细胞上进行传代,观察细胞病变及IFA荧光结果,结果显示,免疫组猪只从免疫开始至试验结束,均未从拭子中分离到PRRSV。2.5 病理学检查结果
表1 荧光定量RT-PCR使用引物序列Table 1 Oligonucleotides used for RT-qPCR 名称aNamea 序列Sequence 位置bPositionb 应用Application PNPF 5＇-CCCTAGTGAGCGGCAATTGT-3＇ 15 002-15 021 qRT-PCR primer (PRRSV) PNPR 5＇-TCCAGCGCCCTGATTGAA-3＇ 15 045-15 062 qRT-PCR primer (PRRSV) NP-probe FAM-TCTGTCGTCGATCCAGA-MGB 15 023-15 039 qRT-PCR probe (PRRSV)说明:a=引物名称的缩写;F=上游引物,R=下游引物;b=引物在亲本病毒HuN4 (EF635006) 基因组中的位置Notes:a=Abbreviations in primer names;F=forward PCR primer;R=reverse PCR primer;b=Numbers in the primer names denotes the nucleotide positions in the parental Hu N4 (EF635006)图2 rPRRSV-E2免疫后猪只血清中病毒含量检测结果
【参考文献】：
期刊论文
[1]鸭肝炎病毒A66弱毒株的水平传播感染[J]. 张小飞,黄显明,尹秀凤,陆承平. 江苏农业学报. 2011(04)
[2]猪繁殖与呼吸综合征病毒Taq Man-MGB荧光定量RT-PCR方法的建立和应用[J]. 韦天超,田志军,安同庆,周艳君,肖燕,姜一峰,郝晓芳,张善瑞,彭金美,仇华吉,童光志. 中国预防兽医学报. 2008(12)
[3]甲型肝炎减毒活疫苗病毒的水平传播[J]. 黄小琴,曹逸云,谭顺革,白惠珠,邵聪文,龙润乡,周德久,董德祥. 中华医学杂志. 2001(08)
本文编号：3560061
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