灰仓鼠体内鞭毛虫分离鉴定及驱虫药筛选与效果评价研究

发布时间：2022-01-01 17:08

　　目的：野生灰仓鼠是一种生活在中亚地区的野生啮齿类动物。属于啮齿目，仓鼠科，仓鼠亚科，仓鼠属。其栖息生境主要分布在荒漠平原、高山草甸。大量研究表明灰仓鼠在鼠疫菌分离，包虫病动物模型等方面明显优于现有其它实验动物，具有良好的应用前景。新疆实验动物研究中心已对灰仓鼠进行多年实验动物化研究。本研究拟对从新疆实验动物研究中心饲养的封闭群灰仓鼠体内分离到的1株鞭毛虫进行形态学及基因鉴定；建立该鞭毛虫感染动物模型；筛选驱虫药物并对其驱虫效果进行研究。方法：建立该鞭毛虫的体外培养体系，将分离到的鞭毛虫虫体沉淀转到细胞皿中，加入除菌RPMI1640培养基，置于37℃培养箱中培养；间隔2d转种1次，每次转种500μl，直至鞭毛虫稳定生长；对体外培养的鞭毛虫直接涂片和常规姬姆萨染色后置于光学显微镜镜检，以戊二醛固定虫体后置于透射电镜观察形态学特点；提取虫体总DNA，PCR扩增该鞭毛虫的16S rRNA基因，测序后与国外已报道的鞭毛虫进行核酸同源性分析，并应用MEGA5.22软件绘制系统发育进化树；使用分离培养的虫体感染BALB/c小鼠建立感染动物模型；以此动物模型为材料研究甲硝唑、替硝唑、阿苯达唑口服乳剂、... 

【文章来源】：新疆农业大学新疆维吾尔自治区

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

灰仓鼠回盲部检出的鞭毛虫直接涂片(×100)

图 2-1 灰仓鼠回盲部检出的鞭毛虫直接涂片(×100)鞭毛虫转入 RPMI 1640 培养基 80%、10%胎牛血清、10%104U比例混合配制的培养基，置于 37℃恒温培养箱中培养，期间转 虫体密度达到峰值，之后密度下降，6 d 后得到稳定生长的鞭集虫体后，吸取 100 μl 悬液，滴在载玻片上，置于光学显微见大量水滴形、梨形以转圈方式游动的虫体，虫体游动活泼。观察，可见由前向后呈波浪状运动的波动膜(图 2-2)。

图 2-3 灰仓鼠回盲部分离培养的鞭毛虫虫体(瑞氏-姬姆萨染色×1000)体培养液经 2.5%戊二醛固定后，置于透射电子显微镜下观察(图均为 18 μm，宽度平均为 10 μm。

【参考文献】：
期刊论文
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本文编号：3562467