鸡IL-17及其相关细胞因子在贝氏隐孢子虫感染中的动态变化
发布时间：2022-01-03 17:36
隐孢子虫（Cryptosporidium）是一种广泛寄生于多种宿主消化道、呼吸道上皮细胞的胞内原虫，由其引起的隐孢子虫病（cryptosporidiosis）是一种人兽共患病。自Tyzzer于1907年首先在鼠体内发现隐孢子虫以来，已在人、禽类、哺乳动物、鱼类和爬行类等240余种动物体内发现了24个有效种和70多个基因型。目前，尚无有效的疫苗或药物治疗隐孢子虫病，该病严重威胁人的健康和动物的生长发育，造成巨大的经济损失。了解隐孢子虫的致病机制、宿主的免疫防御机制对该病的治疗和预防可提供十分重要的参考。本研究以贝氏隐孢子虫（C. baileyi）为研究对象，以雏鸡为模型，检测贝氏隐孢子虫（C. baileyi）感染雏鸡的气管、脾脏中IL-17及其相关细胞因子（IL-1β、IL-6、TGF-β和STAT3）在不同时间点变化情况，以此来推测Th17细胞、IL-17及其相关细胞因子在C. baileyi感染和清除中的作用。1.为获取纯净的贝氏隐孢子虫卵囊，建立感染雏鸡的模型，本试验根据不同虫种的寄生特点，采用从混合卵囊感染雏鸡法氏囊和喉头气管中分离并纯化卵囊。结果在感染鸡只的法氏囊、喉头气管等...
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
贝氏隐孢子虫卵囊的形态（400×）
3.2.3 测序结果及种系发育分析将两份含目的条带的 PCR 扩增产物送往上海生工后，成功获得两个样品 SSU rRN基因序列，经过 Clustal 比对后二者序列相同。选取其中一个样品的序列进一步通过在NCBI 上使用 BLAST 检索比对后，发现该序列与 NCBI 上已发表的贝氏隐孢子虫（Cbaileyi）SSU rRNA 基因序列相似度达 99%，因此，证实所分离的隐孢子虫为贝氏隐子虫。由图 3-3 可以看出所分离的贝氏隐孢子虫株（Fecal sample）与其它已公布的贝隐孢子虫位于同一进化分枝上，从而更能证实该隐孢子虫为贝氏隐孢子虫（C. baileyM. DNA 标准 DL 2000；1. 粪便样品；2. 组织样品；C. 阴性对照M. DNA Marker DL 2000; 1. Fecal samples; 2. Tissue samples; C. Negative control图 3-2 C. baileyi SSU rRNA 基因 PCR 扩增结果Fig. 3-2 PCR amplication of C. baileyi SSU rRNA gene
4.3 讨论隐孢子虫是胞内寄生性原虫，主要寄生于上皮细胞刷状缘表面，位于由虫体两侧微绒毛包围融合形成的带虫空泡内，不与宿主细胞浆接触（Fayer 2004）。隐孢子虫卵囊对外界环境抵抗力强，孢子化的卵囊脱离宿主后能够在外界环境存活较长的时间，Jenkins等（2003）的研究表明，C. parvum 卵囊贮存在 19 ℃灭菌水中 7 个月仍有活性。而有人对 C. baileyi 的活性研究表明，保存于 4 ℃ 2.5%重铬酸钾溶液中的卵囊 18 个月仍可引起雏鸡明显感染（黄磊等 2012）。然而，随着保存时间的延长，隐孢子虫卵囊的活性也会降低，需定期对卵囊进行复苏。目前，常采用接种易感宿主对卵囊进行复壮。当前，对于贝氏隐孢子虫的体内外培养做了不少工作，Lindsey 等（1988）建立了C. baileyi 鸡胚体外培养模型，并探究了 C. baileyi 感染禽和哺乳动物细胞情况。Wunderlin等（Wunderlin et al. 1997）利用 C. baileyi 接种鸡胚并与感染鸡做了对比，比较发现两个感染鸡胚收获得卵囊与一只感染的鸡扩增的卵囊相当。Zhang 等（2012）利用鸡胚气管图 4-1 两组雏鸡接种 1×105贝氏隐孢子虫卵囊后排卵囊规律Fig. 4-1 The patterns of oocyst shedding in two chicken groups after inoculation with 1×105C. baileyi
【参考文献】：
期刊论文
[1]猫隐孢子虫研究进展[J]. 成温玉,贾燕青,边青青,杜帅之,方艳琴,邓明俊,于三科. 动物医学进展. 2013(09)
[2]山东德州市鸡源隐孢子虫种类的分子鉴定[J]. 姜健阁,许禔森. 德州学院学报. 2013(02)
[3]贝氏隐孢子虫鸡胚培养方法研究[J]. 黄磊,张云,张素梅,菅复春,宁长申,张龙现. 中国人兽共患病学报. 2012(03)
[4]洛阳地区规模化鸡场隐孢子虫流行病学分析[J]. 代娟,闫文朝,王天奇,李小军,杨沛沛,徐鑫. 河南科技大学学报(自然科学版). 2012(01)
[5]TH17细胞的研究进展[J]. 付立主,李其皓. 临床肺科杂志. 2011(04)
[6]贝氏隐孢子虫对不同免疫状态雏鸡的致病性比较研究[J]. 齐萌,黄磊,高庚渠,张素梅,刘扬科,徐利纳,王荣军,菅复春,张龙现,宁长申. 中国病原生物学杂志. 2010(03)
[7]柔嫩艾美耳球虫YL株的生物学特性[J]. 于三科,刘蕾,林青. 畜牧与兽医. 2008(02)
[8]河南省鹌鹑隐孢子虫病的流行病学调查[J]. 王芳,胡群山,朱静静,宁长申,菅复春,李清州,张龙现. 中国兽医科学. 2008(01)
[9]隐孢子虫病免疫学研究进展[J]. 菅复春,张龙现,宁长申,孙铭飞,闫文朝,邵兆霞. 动物医学进展. 2005(06)
[10]黔东南州鸡鸭鹅寄生虫感染状况及地理分布调查[J]. 汪俭,龙文波,李云英,陈坚,周承高,王元萍,刘小惠. 中国兽医寄生虫病. 2005(01)
硕士论文
[1]关中地区牛球虫种类和安氏隐孢子虫基因分型研究[D]. 高曼.西北农林科技大学 2012
[2]火鸡隐孢子虫和巨型艾美耳球虫生物学特性及对雏鸡致病性研究[D]. 杨楠.河南农业大学 2011
本文编号：3566689
【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：54 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
贝氏隐孢子虫卵囊的形态（400×）
3.2.3 测序结果及种系发育分析将两份含目的条带的 PCR 扩增产物送往上海生工后，成功获得两个样品 SSU rRN基因序列，经过 Clustal 比对后二者序列相同。选取其中一个样品的序列进一步通过在NCBI 上使用 BLAST 检索比对后，发现该序列与 NCBI 上已发表的贝氏隐孢子虫（Cbaileyi）SSU rRNA 基因序列相似度达 99%，因此，证实所分离的隐孢子虫为贝氏隐子虫。由图 3-3 可以看出所分离的贝氏隐孢子虫株（Fecal sample）与其它已公布的贝隐孢子虫位于同一进化分枝上，从而更能证实该隐孢子虫为贝氏隐孢子虫（C. baileyM. DNA 标准 DL 2000；1. 粪便样品；2. 组织样品；C. 阴性对照M. DNA Marker DL 2000; 1. Fecal samples; 2. Tissue samples; C. Negative control图 3-2 C. baileyi SSU rRNA 基因 PCR 扩增结果Fig. 3-2 PCR amplication of C. baileyi SSU rRNA gene
4.3 讨论隐孢子虫是胞内寄生性原虫，主要寄生于上皮细胞刷状缘表面，位于由虫体两侧微绒毛包围融合形成的带虫空泡内，不与宿主细胞浆接触（Fayer 2004）。隐孢子虫卵囊对外界环境抵抗力强，孢子化的卵囊脱离宿主后能够在外界环境存活较长的时间，Jenkins等（2003）的研究表明，C. parvum 卵囊贮存在 19 ℃灭菌水中 7 个月仍有活性。而有人对 C. baileyi 的活性研究表明，保存于 4 ℃ 2.5%重铬酸钾溶液中的卵囊 18 个月仍可引起雏鸡明显感染（黄磊等 2012）。然而，随着保存时间的延长，隐孢子虫卵囊的活性也会降低，需定期对卵囊进行复苏。目前，常采用接种易感宿主对卵囊进行复壮。当前，对于贝氏隐孢子虫的体内外培养做了不少工作，Lindsey 等（1988）建立了C. baileyi 鸡胚体外培养模型，并探究了 C. baileyi 感染禽和哺乳动物细胞情况。Wunderlin等（Wunderlin et al. 1997）利用 C. baileyi 接种鸡胚并与感染鸡做了对比，比较发现两个感染鸡胚收获得卵囊与一只感染的鸡扩增的卵囊相当。Zhang 等（2012）利用鸡胚气管图 4-1 两组雏鸡接种 1×105贝氏隐孢子虫卵囊后排卵囊规律Fig. 4-1 The patterns of oocyst shedding in two chicken groups after inoculation with 1×105C. baileyi
【参考文献】：
期刊论文
[1]猫隐孢子虫研究进展[J]. 成温玉,贾燕青,边青青,杜帅之,方艳琴,邓明俊,于三科. 动物医学进展. 2013(09)
[2]山东德州市鸡源隐孢子虫种类的分子鉴定[J]. 姜健阁,许禔森. 德州学院学报. 2013(02)
[3]贝氏隐孢子虫鸡胚培养方法研究[J]. 黄磊,张云,张素梅,菅复春,宁长申,张龙现. 中国人兽共患病学报. 2012(03)
[4]洛阳地区规模化鸡场隐孢子虫流行病学分析[J]. 代娟,闫文朝,王天奇,李小军,杨沛沛,徐鑫. 河南科技大学学报(自然科学版). 2012(01)
[5]TH17细胞的研究进展[J]. 付立主,李其皓. 临床肺科杂志. 2011(04)
[6]贝氏隐孢子虫对不同免疫状态雏鸡的致病性比较研究[J]. 齐萌,黄磊,高庚渠,张素梅,刘扬科,徐利纳,王荣军,菅复春,张龙现,宁长申. 中国病原生物学杂志. 2010(03)
[7]柔嫩艾美耳球虫YL株的生物学特性[J]. 于三科,刘蕾,林青. 畜牧与兽医. 2008(02)
[8]河南省鹌鹑隐孢子虫病的流行病学调查[J]. 王芳,胡群山,朱静静,宁长申,菅复春,李清州,张龙现. 中国兽医科学. 2008(01)
[9]隐孢子虫病免疫学研究进展[J]. 菅复春,张龙现,宁长申,孙铭飞,闫文朝,邵兆霞. 动物医学进展. 2005(06)
[10]黔东南州鸡鸭鹅寄生虫感染状况及地理分布调查[J]. 汪俭,龙文波,李云英,陈坚,周承高,王元萍,刘小惠. 中国兽医寄生虫病. 2005(01)
硕士论文
[1]关中地区牛球虫种类和安氏隐孢子虫基因分型研究[D]. 高曼.西北农林科技大学 2012
[2]火鸡隐孢子虫和巨型艾美耳球虫生物学特性及对雏鸡致病性研究[D]. 杨楠.河南农业大学 2011
本文编号：3566689
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